短柱肖菝葜的资源调查及品质分析△

关扎根，吴尚英，李安平，3，张兴安，贾学思，杨霞，魏红国，王瑞珍

(1.山西振东道地药材开发有限公司，山西 长治 047100；2.山西长治县农业局，山西 长治 047100；3.山西中医学院，山西 太原 030024)

国家发改委中药高技术产业化发展专项(复方苦参注射液优质原料药材生产基地建设)

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吴尚英，研究方向：药用植物栽培，Tel：(0355)8096033，E-mail：yingzi841024@163.com

短柱肖菝葜的资源调查及品质分析△

关扎根1，吴尚英2*，李安平1，3，张兴安1，贾学思1，杨霞1，魏红国1，王瑞珍1

(1.山西振东道地药材开发有限公司，山西 长治 047100；2.山西长治县农业局，山西 长治 047100；3.山西中医学院，山西 太原 030024)

目的探讨短柱肖菝葜的资源品质与生态环境的关系。方法通过对全国短柱肖菝葜的资源调查，得到采集样品和生态环境资料；采用高效液相色谱法测定甲基氧化偶氮甲醇樱草糖苷的含量。结果不同产地短柱肖菝葜中甲基氧化偶氮甲醇樱草糖苷的含量差异明显。结论短柱肖菝葜的品质与其生态环境之间具有一定的相关性。

短柱肖菝葜；资源调查；甲基氧化偶氮甲醇樱草糖苷；品质分析

短柱肖菝葜HeterosmilaxyunnanensisGagnep.为菝葜科(Smilakaceae)肖菝葜属多年生攀缘灌木，其干燥块茎药用，具有清热、除湿、解毒、通利关节之功能，临床用于湿热淋浊，带下，痈肿，瘰疠，疥癣，梅毒，筋骨挛痛以及钩端螺旋体病，民间习称“白土苓”[1]，收载于四川、贵州、湖南省中药材标准中，与《中国药典》收载的土茯苓不仅药名相近，且历代本草常以土茯苓记载，与土茯苓混用[2]。

随着短柱肖菝葜抗肿瘤作用的不断开发和利用，其临床应用也逐渐扩大，短柱肖菝葜需求量急剧增加。目前短柱肖菝葜广泛分布于湖南、湖北、广西、四川、贵州、云南等地。由于产地生长环境的不同，导致不同产地之间药材质量存在很大的差异，这不利于现代制药工程规范化生产要求。为了合理开发资源和提高临床疗效，本课题组对湖北、湖南、广西、云南、甘肃、贵州、四川、重庆、陕西、山西等9省短柱肖菝葜的资源进行了调查和样本采集；以甲基氧化偶氮甲醇樱草糖苷的含量作为评价指标[3-4]，对比不同地区短柱肖菝葜的质量差异，为合理利用菝葜药材资源以及实施GAP种植提供科学依据。

1 仪器与试药

乙腈(色谱纯，美国Honeywell公司)；娃哈哈纯净水；无水乙醇(色谱纯，天津市丰越化学品有限公司)；其他试剂均为分析纯。甲基氧化偶氮甲醇樱草糖苷对照品为山西振东光明研究院制备，用于含量测定(面积归一法测定质量分数分别为：99%)。

Agilent 1260高效液相色谱仪(VWD检测器)，SHANGPINGFA2104(1/1万)电子天平。

2 方法与结果

2.1 资源调查

2.1.1 调查内容与方法 本课题组于2011年6～8月对湖北、湖南、广西、云南、甘肃、贵州、四川、重庆、陕西、山西等9省的短柱肖菝葜植物资源进行了调查，收集了其生态环境资料和样品，包括短柱肖菝葜的植物标本、药材样品、生态数据及土样等。

2.1.2 调查结果 各地共采集样品27个，经植物标本鉴定，在湖南、湖北、广西、云南、贵州5省采集到的9个标本为短柱肖菝葜，其中代表性的样品及其分布地的生态环境情况见表1。

表1 短柱肖菝葜不同分布地及生态环境情况

2.2甲基氧化偶氮甲醇樱草糖苷的测定

2.2.1色谱条件 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-0.01 mol·L-1醋酸铵溶液(浓氨水调节pH值至8.0)(3∶97)为流动相，检测波长215 nm，流速0.6 mL·min-1。理论板数按甲基氧化偶氮甲醇樱草糖苷峰计算应不低于2 000。

2.2.2标准品溶液的制备 取甲基氧化偶氮甲醇樱草糖苷对照品适量，精密称定约12 mg，置20 mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1 mL置20 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，即得。(每1 mL含0.03 mg甲基氧化偶氮甲醇樱草糖苷)

2.2.3供试品溶液的制备 取本品粉末(过四号筛)约0.2 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入水50 mL，称定重量，超声处理1 h，放冷，再称定重量，加水补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.2.4样品测定 取9批采自不同产地的短柱肖菝葜药材参照2.2.3项下方法进行样品制备，然后进行液相分析，测定其中甲基氧化偶氮甲醇樱草糖苷的含量，结果见表2。

表2 不同产地短柱肖菝葜药材中甲基氧化偶氮甲醇樱草糖苷的含量测定结果

3 结论与讨论

从甲基氧化偶氮甲醇樱草糖苷的含量测定结果来看，不同产地的短柱肖菝葜中甲基氧化偶氮甲醇樱草糖苷的含量差异明显，以湖北恩施市龚家坪的含量最高，为0.66%，湖南、贵州的含量次之，广西玉林沙河的含量最低，为0.01%。短柱肖菝葜为多年生植物，其生长年限难以辨别，本次资源调查采集的短柱肖菝葜存在地域群落不同和生长年限的差异，因此测定的甲基氧化偶氮甲醇樱草糖苷的含量存在较大差异，需通过进一步的深入研究种质和生长年限来对比其含量的不同。

从短柱肖菝葜的资源调查和品质分析的结果来看，菝葜药材质量差异可能与菝葜产地的经纬度、海拔、土壤性质以及地理环境有关，从中可以初步得出适合短柱肖菝葜生长的生态环境特点：(1)主要分布在海拔50～1 600 m的环境中，但甲基氧化偶氮甲醇樱草糖苷含量较高的短柱肖菝葜集中生长在400～1 100 m的海拔区段；(2)从经纬度来看，纬度影响差异不大，随着经度的增加，甲基氧化偶氮甲醇樱草糖苷的含量也在增加，从而说明地理环境对短柱肖菝葜的品质存在一定的影响。(3)从土壤性质来看，短柱肖菝葜适宜生长的土壤是富含腐殖质的中高肥力土壤，对土壤质地要求不严，在沙土、粘土、壤土中均可生长。(4)短柱肖菝葜主要分布于喀斯特地貌区的灌木或中小乔木的次生林地，喜温暖湿润，在通风良好、半阴的环境生长最好。

[1] 秦文杰，王钢力，林瑞超.短柱肖菝葜化学成分的研究[J].中草药，2007，38(10)：1466-1468.

[2] 蒯玉花，海丽娜，菅晓勇，等.肖菝葜属药用植物的研究进展[J].中国实验方剂学杂志，2010，16(11)：207-209.

[3] 秦文杰.短柱肖菝葜化学成分及质量控制研究[D].北京中医药大学，2007.

[4] 乔蕾.中药白土茯苓质量控制方法研究[D].沈阳药科大学，2007.

HeterosmilaxyunnanensisMedicinalPlantsResourceInvestigationandQualityAnalysis

GUANZhagen1，WUShangying2*，LIAnping1，3，ZHANGXing’an1，JIAXuesi1，YANGXia1，WEIHongguo1，WANGRuizhen1

(1.Thefamous-regiondrugofDevelopmentCo.，Ltd.ofShanXiZhenDong，Changzhi047100，China；2.ChangzhiCountyBureauofAgriculture，Changzhi047100，China；3.ShanxiUniversityofTraditionalChineseMedicine，Taiyuan030024，China)

Objective：Discuss the relationship betweenHeterosmilaxyunnanensisquality and its growing environment.MethodsRepresentative growing district ofHeterosmilaxyunnanensiswas selected for resource investigation.The information of samples and the environment were collected.The content of macrozamin was determined by HPLC.ResultsMacrozamin content inHeterosmilaxyunnanensisfrom different districts were obviously different.ConclusionThere is certain relativity between the quality ofHeterosmilaxyunnanensisand its growing environment.

Heterosmilaxyunnanensis；Resource investigation；Macrozamin；Quality analysis

10.13313/j.issn.1673-4890.2014.06.004

2014-02-28)