慢性阻塞性肺病患者下呼吸道感染革兰阴性杆菌分布及耐药性分析

吉维民

(江苏省宝应县人民医院，江苏 宝应 225800)

慢性阻塞性肺病(COPD)下呼吸道细菌感染的检测越来越普及，革兰阴性致病菌是临床COPD患者感染的主要病原菌，由于广谱抗菌药物的大量使用，其耐药菌株日益增多，且非发酵菌有增高趋势［1］。对其近期江苏省宝应县人民医院分离的下呼吸道革兰阴性致病菌的分布情况及耐药性进行统计分析。

1 材料与方法

1.1 材料

标本来源为江苏省宝应县人民医院2011年1月至2013年7月就诊的门诊及住院COPD患者深咳的合格痰标本，所分离出的革兰阴性杆菌病原菌，去除同一患者的重复菌株，共355株。

1.2 方法

1.2.1 细菌鉴定及药敏试验 采用API试剂盒，按微生物室常规方法进行鉴定和药敏试验。质控菌株为大肠埃希菌 ATCC25922、肺炎克雷伯菌ATCC700603和铜绿假单胞菌ATCC27853。

1.2.2 超广谱 β-内酰胺酶(ESBLs)的检测 大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌ESBLs检测采用头孢他啶或头孢噻肟单药MIC与加入克拉维酸后MIC相比，降低超过3个倍比稀释浓度，即判定为ESBLs阳性［2］。

2 结果与分析

2.1 慢性阻塞性肺病(COPD)患者下呼吸道感染革兰阴性杆菌的分布情况

COPD患者下呼吸道检出细菌的种类及分布，近期共分离出516株细菌，其中革兰阴性杆菌355株，占68.8%。革兰阴性杆菌的分布情况见表1。

表1 慢性阻塞性肺病(COPD)患者下呼吸道感染革兰阴性杆菌的分布情况Table 1 Constituent ratios of the Lower respiratory tract infection COPD patient pathogenic bacteria causing the gram-negative bacilli infections

2.2 肠杆菌科常见革兰阴性细菌对13种抗菌药物的耐药率

大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产ESBLs菌株的检出率分别为 37.6%(38/101)、32.9%(24/73)。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌及其产ESBLs菌株对13种抗菌药物的耐药率见表2。

表2 肠杆菌科常见革兰阴性细菌对13种抗菌药物的耐药率(%)Table 2 13 kinds drug resistance rates of the main gram-negative bacilli bacteria(%)

2.3 非发酵革兰阴性杆菌对10种抗菌药物的耐药率

检验结果见表3。

表3 常见非发酵革兰阴性细菌对10种药物的耐药率(%)Table 3 10 kinds drug resistance rates of the main non-fermenting gram-negative bacteria(%)

3 讨论

β-内酰胺酶(ESBLs)是肠杆菌科细菌对广谱β-内酰胺类抗生素耐药的关键酶，由质粒介导，通过质粒传播，可水解含氧亚氨基的β-内酰胺类抗生素，使其失活，能被β-内酰胺酶抑制剂所抑制［3］。本研究分离出革兰阴性细菌355株，大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产ESBLs菌株分别为37.6%、32.9%，其对大多数抗菌药物耐药，产酶株明显高于非产酶株。如头孢唑啉、头孢呋辛，不同地区产ESBLs类型不同，在欧美流行的以水解头孢他啶为主的TEM和SHV型，在我国较少见，尤其是TEM型，我国流行的ESBLs主要是以水解头孢噻肟为主的CTX-M型，可能与大量使用头孢噻肟有关。肠杆菌科细菌还可产生另外一种β-内酰胺酶即AmpC酶，它是由染色体介导的一种头孢菌素酶，自然状况下细菌产生此种酶较少，这可能是头孢他啶和头孢西丁对肠杆菌属细菌抗菌活性低的原因［4］。碳青霉烯类对肠杆菌科细菌有极强的抗菌活性，耐药率为0～1.6%，其次为哌拉西林/他唑巴坦和阿米卡星;喹诺酮类药物环丙沙星出现较高耐药，可能是病人及院内长期使用此类抗菌药物，产生耐药菌株［5］。对于肠杆菌科产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌，碳青霉烯类仍具极强的抗菌活性，耐药率为0～1.6%，其次为含酶抑制剂复合物和头霉素类。

非发酵菌铜绿假单胞菌临床较常见，本研究证实占革兰阴性菌分离株的16.6%。它具有多重耐药，铜绿假单胞菌对10种抗菌药物的耐药率均在20%以上，较好的抗菌药物有美罗培南、阿米卡星和头孢吡肟。铜绿假单胞菌可产生多种β-内酰胺酶，如 ESBLs、AmpC 酶和金属 β-内酰胺酶等，其中产金属β-内酰胺酶是铜绿假单胞菌耐碳青霉烯类抗生素的主要原因之一。鲍曼不动杆菌占18.3%，对碳青霉烯类较为敏感，耐药率为6.2%，对其他抗菌药物的耐药率均在40%以上，耐药机制包括产生多种β-内酰胺酶和氨基糖甙类修饰酶，DNA旋转酶和拓扑异构酶Ⅳ的基因突变，青霉素结合蛋白(PBPs)亲合力的改变等。研究发现鲍曼不动杆菌多重耐药株与敏感株的区别在于基因序列中是否存在86 kb的耐药基因片段，耐药株的基因序列中具有此基因片段，而敏感株缺乏［6］。对于多重耐药的铜绿假单胞菌和不动杆菌引起的感染，临床上可采用联合多种抗菌药物给予治疗［7］。嗜麦芽窄食单胞菌占5.9%，对碳青霉烯类高度耐药为100%，但对环丙沙星和替卡西林/克拉维酸较敏感。

［1］吉维民.慢性阻塞性肺病患者下呼吸道感染细菌培养及耐药分析［J］.当代医学，2011，16(32):39-40.

［2］张卓然，倪语星.临床微生物学和微生物检验(第3版)［M］.北京:人民卫生出版社，2004:503-506.

［3］Carvalho AP，Albano RM，deOliveira DN，et al.Characterization of an epidemic car bapenem resistant Pseudomonas aeruginos aproducing SPM21 metallo betalactamase in a hospital locatedin Riode Janeiro，Brazil［J］.Microb Drug Resist，2006，12(2):103-108.

［4］李宗清，崔颖鹏，陈求刚，等.常见革兰阴性杆菌的分布及耐药性分析［J］.中国微生态学杂志，2006，18(1):71-72.

［5］吉维民.ICU患者医院内感染病原菌分布及耐药分析［J］.实验与检验医学，2013，31(4):402-404.

［6］Roberts MC.Multidrug-resistant genes are associated with an 86 kb island in A cinet obacter baumannii［J］.Trends Microbiol，2006，14(9):375-378.

［7］吉维民.耐甲氧西林葡萄球菌对抗菌药物联用体外抗菌活性的检测［J］.实验与检验医学，2013，31(2):196-197.