下肢深静脉血栓患者外周血血小板p-选择素、D二聚体及超敏C反应蛋白的表达及临床意义

张纪媛 郭丹青 何 惠

1.广州市白云区疾病预防控制中心，广东广州 510445；2.广州中医药大学，广东广州 510407；3.广州中医药大学第一附属医院，广东广州 510407

下肢深静脉血栓 （lower deep venous thrombosis，LDVT）在我国的发生率约为8.7%[1]，其临床预后不良，极易形成肺血栓栓塞症 （pulmonary thromboembolism，PTE）。据报道，80%～90%PTE 患者的栓子来源于下肢深静脉血栓，而急性肺血栓栓塞是人类死亡原因第3位[2]，故下肢深静脉血栓可严重危害患者的生命。而临床对LDVT的治疗主要是抗凝、溶栓及去聚等药物，其临床效果多有限。因此，LDVT的早期诊断成为了治疗的关键。LDVT的传统研究已经发现，血管内皮细胞和血小板活化触发了血栓的形成[3]，而D二聚体升高是血栓形成后继发纤溶的结果[4]。近来的研究发现炎性反应可促进LDVT的发生[5]，本研究目的为探讨血小板活化、纤溶系统及炎性反应在LDVT发生过程中的表达及相互联系。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2011年1月～2012年1月于广州中医药大学第一附属医院确诊为LDVT的32例患者为治疗组，所有患者均符合1994年中国中西医结合研究会周围血管病专业委员会制定的诊断标准，入院前未行抗凝治疗。排除标准：①有严重心脑血管疾病、糖尿病、甲状腺疾病；②近期3个月内有急性炎症性及出血、血栓疾病者；③LDVT发病时间＞7 d；④妊娠期或哺乳期妇女。其中中央型5例，周围型9例，混合型18例；左下肢17例，右下肢11例，双下肢4例。另选择同期于广州中医药大学第一附属医院行健康体检的30例健康人为对照组。两组在年龄、性别及体重比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。见表1。本研究经医院伦理委员会通过，研究对象知情同意并签署知情同意书。

表1 两组患者一般资料比较（±s）

表1 两组患者一般资料比较（±s）

注：LDVT：下肢深静脉血栓

组别 年龄（岁） 性别（例，男/女） 体重（kg）LDVT 组（n=32）对照组（n=30）P值47.3±11.4 38.5±17.3 62.07±12.85 64.42±15.36 0.455 14/18 13/17 0.4020.612

1.2 治疗方法

一般治疗：卧床休息、抬高患肢（患肢高于心脏平面），下床活动时穿医用弹力袜。周围静脉滴入尿激酶，一般首次剂量 50万U，后25万U/d，连用5～7 d，总量150～200万U。低分子量肝素4000 U皮下注射q12h，应用3 d后同时口服华法林，待华法林起效后停用低分子量肝素。抗血小板凝聚药物阿司匹林100 mg口服，1次/d。

1.3 标本采集及检测

32例LDVT患者在入院后，治疗3 d及7 d后进行空腹静脉采血3～5 mL，迅速离心取血清。超敏C反应蛋白使用乳胶增强免疫透射比浊法检测，使用Omlipo分析仪进行检测，试剂盒由深圳国赛生物技术公司提供。外周血血小板p-选择素（CD62p）由FC500-MPL型流式细胞仪 （Beckman Coulter公司）进行检测，试剂为Monoclonal Antibody CD62p-FITC单克隆抗体及鼠抗人同型对照IgG1-FITC（Beckman Coulter公司）。D二聚体通过Sysmex CA 7000全自动血液凝固分析仪采用比浊法检测。

1.4 下肢周径的测量

对LDVT患者，在进行标本采集的同时于膝上15 cm和膝下10 cm处进行周径测量，测量时保持软尺与下肢纵轴垂直，计算健侧及患侧周径差，正常值为＜2 cm[6]。

1.5 统计学方法

数据采用SPSS 13.0统计软件处理，计量资料以均数±标准差（±s）表示，两独立样本的计量资料采用t检验；重复测量的计量资料采用方差分析，两两比较采用LSD-t检验。计数资料以率表示，采用χ2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组治疗前后血液指标情况

治疗前LDVT组患者血清的CD62p、D二聚体和超敏C反应蛋白均显著高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；治疗3 d后，三者仍显著高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；其中D二聚体和超敏C反应蛋白较治疗前显著降低，治疗7 d后较治疗3 d后进一步降低，差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 两组治疗前后血液指标情况（±s）

表2 两组治疗前后血液指标情况（±s）

注：与对照组比较，aP＜0.05；与同组治疗前比较，bP＜0.05；与同组治疗3 d后比较，cP＜0.05；LDVT：下肢深静脉血栓；CD62p：外周血血小板p-选择素

组别 CD62p（%）D二聚体（μg/L）超敏C反应蛋白（mg/L）对照组（n=30）LDVT 组（n=32）治疗前治疗3 d后治疗7 d后17.61±2.30149±232.45±0.50 25.80±4.26a 23.26±6.05a 19.75±8.32b 2495±95a 4870±174ab 2530±69ac 5.79±0.75a 4.50±0.58ab 2.51±0.42bc

2.2 LDVT组患者治疗前后两侧下肢周径差比较

结果显示：治疗3、7 d后患者两侧下肢周径差均小于治疗前，治疗7 d后患者两侧下肢周径差小于治疗3 d后，差异均有统计学意义（P＜0.05）。患者两侧下肢周径差随着治疗时间的延长而显著减小。见表3。

表3 LDVT组患者治疗前后两侧下肢周径差比较（cm，±s）

表3 LDVT组患者治疗前后两侧下肢周径差比较（cm，±s）

注：与治疗前比较，*P ＜ 0.05；与治疗 3 d后比较，△P ＜ 0.05；LDVT：下肢深静脉血栓

时间 膝上15 cm 膝下10 cm治疗前（n=32）治疗3天后（n=32）治疗7天后（n=32）5.7±0.9 3.7±0.2*2.5±0.6*△3.8±0.7 2.8±0.6*2.1±0.3*△

3 讨论

LDVT如果不得到及时处理，可继发深静脉血栓后遗症，出现长期慢性疼痛，影响患者的生活和工作，更危险的是栓子脱落发生致命性肺栓塞，危及生命。约50%的LDVT是不出现临床症状的，难以根据患者的临床表现来诊断LDVT[7]。而下肢静脉造影为有创检查，且患者在搬动过程中也可能发生肺栓塞，难以作为LDVT的诊断首选。本研究追踪了血栓形成与降解过程中的不同因子指标，测定了治疗后不同时间点CD62p、D二聚体和超敏C反应蛋白的变化，以提供一种血液学的综合方法来尽早诊断LDVT。

血小板通过血小板活化在LDVT形成过程中起重要作用。正常状态下，血小板及CD62p都处于静止状态，而当机体出现病理状态时，对其产生了刺激，血小板发生活化反应，血小板质膜CD62p分子增加[8]。血小板成分中含量最多的为CD62p，故其是血小板活化反应的特征性标志物[9]。本研究结果显示，正常健康人与LDVT患者的CD62p差异有统计学意义（P＜0.05），这说明LDVT患者存在血小板活化反应。在治疗7 d后，CD62p较治疗前显著降低，但与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05），说明随着治疗的进行，血小板活化状态已有了初步控制，但仍是血栓形成的高危人群。CD62p的变化趋势与LDVT组患者治疗前后两侧下肢周径差的变化趋势一致，说明了随着CD62p的降低，患者的临床症状也得到了改善，两者之间可能相关。

D二聚体是血栓形成后继发纤溶的结果，反映的是血液高凝和纤溶亢进[10-11]。目前临床上已广泛的将D二聚体的监测作为排除血栓性疾病的重要手段[11-12]，有学者报道，D二聚体对老年患者骨科大手术后的LDVT具有很高的阴性预测价值[13]。本研究结果显示，正常健康人与LDVT患者的D二聚体具有显著差异，说明LDVT患者血液处于高凝状态，纤维蛋白溶解亢进。治疗3 d，D二聚体明显升高，说明纤溶活性增加，逐步达到顶峰，而在治疗7 d后，又逐步回落至治疗前的水平，但仍与正常人具有显著差异，说明血液的高凝状态仍未消除，仍易形成血栓。

有学者报道，血液高凝状态与炎症是互为因果的关系，炎症可促进血液高凝，而血栓形成又可加重炎症[10]。C反应蛋白是一种细胞膜糖蛋白，是炎症刺激的急性反应产物。超敏C反应蛋白化学结构与C反应蛋白完全一致，但敏感度极高，可以及时反映机体的炎性反应[5,12]。研究证明超敏C反应蛋白上升得越高血管内壁损伤越严重,发生血栓可能性愈大，超敏C反应蛋白可作为预测血管内壁损伤程度的一个指标，本研究结果也证实了这一点。随着治疗的进行，超敏C反应蛋白显著降低，到治疗7 d后已基本与正常人一致。这说明LDVT组患者治疗7 d后虽然CD62p和D二聚体均高于正常人，但血管内壁损伤已得到控制，这与临床症状的改善也是一致的。

综上所述，CD62p、D二聚体及超敏C反应蛋白是在下肢深静脉血栓形成及降解过程的不同特异性指标，随着LDVT的发展而变化，可以作为LDVT的早期诊断、治疗效果监测依据，具有较高的临床价值。

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