AVE—763B型自动尿沉渣分析仪检测红细胞影响因素的分析

张丽丽

【摘要】 目的：分析用AVE-763B型自动尿沉渣分析仪检测红细胞的影响因素。方法：采用AVE-763B型自动尿沉渣分析仪和显微镜检测法分析了545份住院患者的尿液标本，并将二者结果进行比较。结果：AVE-763型尿沉渣全自动检测仪检测标本红细胞的假阳性率为15.2%，假阴性率为0，灵敏度为100%，特异度为84.8%。与显微镜检测法相比，差异有统计学意义（P<0.05）。结晶、上皮细胞核、酵母菌等是影响AVE-763B型自动尿沉渣分析仪检测结果的主要因素。结论：为获得准确可靠的尿红细胞检测结果，应以AVE-763B型自动尿沉渣分析仪进行筛查并结合显微镜检查。

【关键词】 尿沉渣； 红细胞； 尿沉渣分析仪

【Abstract】 Objective： To analyze the influencing factors regarding determination of urine red blood cells by AVE-763B automated urinalysis analyzer. Method： 545 samples of urine from hospitalized patients were tested by AVE-763B automated urinalysis analyzer and microscopic examination. The results were compared with statistics method. Result： The false-positive rate， false-negative rate， sensitivity and specificity of determination of urine red blood cells by AVE-763B automated urinalysis analyzer were 15.2%， 0，1%， 84.8% respectively. When compared with the microscopic examination group， the results were statistic difference （P<0.05）. The results showed that the crystal， epithelial cells， yeast were main factors of affecting the detected results by AVE-763B automated urinalysis analyzer. Conclusion： Discussion AVE-763B automated urinalysis analyzer must combine microscope examination in order to improve the urine examination quality.

【Key words】 Urinalysis； Erythrocytes； Urinalysis analyzer

First-authors address： Peoples Hospital of Yanjiang District， Ziyang 641300， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2014.25.045

尿液红细胞（RBC）检测对于泌尿系统疾病的诊断和鉴别诊断有重要的参考价值，因此血尿检测的准确性非常重要。AVE-763自动尿沉渣分析仪的问世，给尿沉渣筛选带来了许多方便。它采用机器视觉技术对尿液有形成分进行定量分析，样本不需离心，通过扩大计数面积提高阳性检出率。但由于尿中多种有形成分十分复杂，因此在实际工作中该仪器常出现不能识别或误判的现象，从而造成尿液红细胞出现假阳性结果。笔者的实验对这些影响因素进行了观察，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 标本来源 随机收集本院住院患者晨尿545份，其中男284份，女261份。

1.2 仪器及试剂 AVE-763型尿沉渣全自动检测仪及其配套试剂（湖南爱威公司）。

1.3 实验方法 用一次性尿杯收集住院患者洁净中段晨尿，充分混匀后倒入干净试管约10 mL，每份标本一分为二，其中一份用AVE-763型尿沉渣全自动检测仪作沉渣分析和干化学分析，另一份留作显微镜复检对照用。严格按照AVE-763操作方法进行尿液分析，所有标本在取样后2 h内完成。镜检尿液以1000 g，离心5 min，留沉渣约0.2 mL，作显微镜检查。AVE-763型尿沉渣全自动检测仪结果男RBC>4个/μL、女RBC>6个/μL为阳性；显微镜检查结果RBC>3个/HP为阳性。

1.4 统计学处理 使用SPSS 14.0统计软件包进行分析，数据采用McNemar 字2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

在545份住院患者的标本中，AVE-763型尿沉渣全自动检测仪提示红细胞异常者132份，而显微镜检查红细胞阳性者58份，两者符合率44%，差异具统计学意义（P<0.05）。按美国NCCLS文件规定[1]，尿沉渣细胞计数以显微镜检查为标准，AVE-763型尿沉渣全自动检测仪检测标本红细胞的假阳性率为15.2%，假阴性率为0，灵敏度为100%，特异度为84.8%。AVE-763型尿沉渣全自动检测仪与显微镜检测结果的比较见表1。

AVE-763型自动尿沉渣分析仪和显微镜检测不符合的74份标本中，经显微镜镜检确认由结晶引起的红细胞假阳性标本有31份；因上皮细胞核引起的红细胞假阳性标本有17份；因细菌引起的红细胞假阳性标本有14份；因霉菌引起的红细胞假阳性标本有9份；因脂肪滴引起的红细胞假阳性标本3份。

3 讨论

尿液中的有形成分是诊断泌尿系统疾病，尤其是肾脏疾病的重要检测指标[2]。尤其是尿液中的红细胞，更是在肾脏疾病的诊断、治疗、病情进展以及预后判断中有着非常重要的意义[3]。尿沉渣的检测方法包括传统离心法、标准镜检法、荧光染色流式细胞分析法和智能显微镜-图像分析处理系统等[4]，其中尿沉渣检查的经典方法是标本离心后在显微镜下进行人工镜检。为了规范实验方法学，中华医学会检验分会推荐了尿沉渣规范化的检测方法，即取10 mL尿液放入离心管内，RCF400×g下离心5 min，准确留取0.2 mL沉渣混匀，滴入细胞计数板内，先用低倍镜观察，后用高倍镜，计数细胞或管型，按XX/μL报告[5]。但是，人工镜检操作繁琐、速度慢，容易出现人工误差，且标本有形成分达到一定浓度时将严重影响测定结果[4]。近年来，为了实现尿液有形成分检测的标准化、快速化和自动化，其检测方法已由人工检查发展到了自动化检测。智能成像分析技术、流式细胞术等已用于尿液分析，使得全自动尿沉渣分析仪的应用越来越广泛。目前，临床使用的尿沉渣分析仪器种类较多，其检测原理也不尽相同。基于智能成像分析技术技术的湖南爱威公司的AVE系列全自动尿沉渣分析仪是目前国内使用较为广泛的一种尿沉渣分析仪。AVE-763型自动尿沉渣分析仪按照经典的显微镜镜检方法的流程来设计，工作时通过低倍镜以多于人工镜检检查量对样品进行扫描过筛，然后以低倍镜抓取目标定位后转高倍镜采集目标（如细胞，管行，结晶等）的特征参数（如大小、轴比、形状、纹理、梯度、颜色、灰度等），运用计算机对其各种特征参数进行统计，聚类，拟和，参照建立模型，自动识别出该图像所代表的实物[6]。此仪器前端配有自动送样装置，在进行尿沉渣定量分析时，操作者将样本置入样本架后，从进样、采集图像、低倍过筛、低倍目标跟踪到高倍图像处理全部由仪器自动完成，检测速度为40～80个样本/h，因而具备了使用简单、高效、快速和标本不需离心等优点。目前，AVE-763型自动尿沉渣分析仪的可靠性即精密度、线性、互染、准确性等方面的评价已有报道[7]。国内也有学者对AVE-763尿沉渣分析仪检测白细胞结果的影响因素及措施进行了研究[8]，然而关于该仪器在检测红细胞准确性方面的文章较少报道。

有学者研究认为，AVE-763B检测标本出现偏差的原因是，形态不规则、处在不同平面和角度的细胞，被仪器拍摄时的形态与机器内部储存的典型细胞形态相比不一致，造成机器误认[9]。同时，还有学者研究发现，尿液中大量的红细胞、白细胞、管型、上皮细胞、黏液丝等对AVE-763B尿沉渣分析仪的检测结果影响较大[10-11]。笔者的研究结果显示，AVE-763尿沉渣分析仪检测红细胞的假阴性率为0，灵敏度为100%，该结果提示当红细胞检测结果为阴性时不必复检。然而，研究结果同样显示，AVE-763尿沉渣分析仪检测红细胞的假阳性率为15.2%，特异度为84.8%。其中造成假阳性的主要因素有：（1）在影响检测尿红细胞准确性的因素中结晶占首位。其原因可能因为草酸钙结晶、非晶形盐类和药物结晶增多时，其大小、形态与红细胞类似而被误判，以草酸钙结晶最为多见。草酸钙结晶是尿中最常见的有形结晶之一，在酸性尿液中形态有哑铃形、球形及折光性强的八面体，有时也在中性或碱性尿中出现，不溶于乙酸。（2）住院患者，尤其是糖尿病患者和脑梗死患者，尿中常可出现大量酵母菌。酵母菌的形态和大小与红细胞类似，也容易被仪器误判为红细胞。（3）大量上皮细胞、细菌、脂肪滴等存在于尿液中时也容易造成仪器识别错误。常见于被白带污染的尿液标本、细菌性尿路感染患者的尿液标本以及经妇科外用药后患者的尿液标本。

研究结果表明，AVE-763B全自动尿沉渣分析仪采用不离心、多数量的计数方式，具有较高的灵敏度，用于尿液有形成分快速筛选是可取的，但它在准确辨认有形成分的能力方面有一定局限性，这一研究与国内很多学者的研究一致[12-14]。为了提高仪器的准确性，应重视仪器的日常维护保养工作，包括调好显微镜的焦距、保持流动池清洁等，以提高仪器的识别率，减少对检测结果的影响。由于显微镜镜检是形态学检查的金标准。因此，在临床工作中当尿沉渣分析仪测定结果出现上述成分且红细胞结果异常时，先采用仪器审核程序取消误判结果，同时进行显微镜复检。又因尿中红细胞的形态常受尿的pH值、比重、尿液放置时间以及病理情况的影响而呈现很大的变化，有时单纯用显微镜复检也难以辨认，必须结合尿干化学试纸法结果综合判断[15]，从而提高检测准确性，为临床诊断与治疗提供有力依据。

参考文献

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（收稿日期：2014-03-05） （本文编辑：王宇）