丹参地上部分糖类成分的动态变化△

葛婷，郑云枫，崔健，夏彦铭，黄利，彭国平

(南京中医药大学 药学院，江苏 南京 210023)

丹参地上部分糖类成分的动态变化△

葛婷，郑云枫*，崔健，夏彦铭，黄利，彭国平

(南京中医药大学 药学院，江苏 南京 210023)

目的：研究丹参地上部分中糖类成分及其动态变化。方法：用HPLC-ELSD法分别测定丹参地上部分中糖类成分的含量。结果：丹参地上部分中含有葡萄糖、麦芽糖、水苏糖等，在不同生长期中，基本呈现有规律的变化，10～12月份总糖的含量较高。结论：丹参地上部分中存在糖类成分，为丹参地上部分的开发利用提供了一定的理论基础。

丹参；地上部分；糖类成分；动态变化

中药丹参为唇形科鼠尾草属植物丹参SalviamiltiorrhizaBge.的干燥根及根茎，是最常用的活血化瘀中药之一，首载于《神农本草经》，具有去瘀止痛、养血安神的功效[1]。目前研究的丹参有效成分主要为水溶性的丹酚酸类[2]、脂溶性的丹参酮类[3]以及糖类成分[4]。丹参药材用量大，国内已大量栽培，而其地上部分直接丢弃，造成了资源的浪费。

近年来，医药界对丹参地上部分兴起了新的研究热潮，已发现含有酚酸类、黄酮类等成分[5-7]。现代研究表明，中药低聚糖及多糖成分具有良好的药理活性[8-9]，有关丹参地上部分中是否含有糖类成分的研究未见报道，本文对丹参地上部分中的糖类成分进行了分析和含量测定，并比较了不同生长期的丹参地上部分中3种糖类成分的动态变化，旨在为更好的开发利用丹参地上部分提供理论参考。

1 仪器与试药

1.1 仪器

Waters 2695 HPLC 色谱系统、Alltech ELSD 2000蒸发光散射检测器、HS色谱数据工作站V4.0+(Waters公司)，AE240型电子分析天平(瑞士Mettler)。

1.2 试药

葡萄糖对照品(0844-200003)、麦芽糖对照品(100287-200601)、水苏糖对照品(851787)购自Sigma-Aldrich公司。乙腈为色谱纯，水为亚沸蒸馏水，其余试剂均为分析纯。

丹参供试样株位于江苏省南京市南京中医药大学药用植物园内，经南京中医药大学巢建国教授鉴定为丹参SalviamiltiorrhizaBge.的植株。从2013年1月～12月，每月14日左右采集同一区域内的丹参地上部分(茎、叶)。采集完成后各样品经统一处理：置阴凉通风处，晾至近干，置鼓风干燥箱于50 ℃烘干，粉碎过40目筛，真空包装，避光冷藏保存。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

采用Prevail Carbohydrate ES(250 mm×4.6 mm，5 μm)为色谱柱，乙腈-水(67∶33)为流动相，体积流量为1.0 mL·min-1；ELSD漂移管温度90 ℃，载气为空气，载气流量为3.0 L·min-1；柱温为35 ℃；进样量：10 μL。对照品及样品色谱图见图1。

A.混标对照品 B.丹参茎 C.丹参叶1.葡萄糖 2.麦芽糖 3.水苏糖图1 丹参地上部分样品HPLC-ELSD色谱图

2.2 对照品溶液的制备

分别精密称取葡萄糖、麦芽糖、水苏糖对照品12.00 mg、19.80 mg、14.64 mg置10 mL量瓶中，用水溶解并加水至刻度，摇匀，制成每1 mL分别含葡萄糖1.200 mg、麦芽糖1.980 mg及水苏糖1.464 mg的对照品储备溶液。再准确移取储备溶液1.0、2.5、5.0和7.5 mL于10 mL量瓶中，用水稀释配制成不同浓度的系列混合对照品溶液。

2.3 供试品溶液的制备

取丹参地上部分粗粉约2 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加水50 mL，称定重量，加热回流1 h，放冷，再称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.4 线性关系

分别精密吸取5种不同浓度的混合对照品溶液10 μL，注入高效液相色谱仪，按2.1项下色谱条件进行测定，以峰面积对数值(Y)对质量浓度(μg·mL-1)对数值(X)进行线性回归，得回归方程。结果见表1，表明各糖类化合物在试验质量浓度范围内线性关系良好。

表1 3种糖类化合物的线性回归方程

2.5 精密度试验

取混合对照品溶液，按2.1项下色谱条件进行测定，重复进样6次，葡萄糖、麦芽糖、水苏糖峰面积的RSD分别为2.13%、2.86%、2.12%，说明该方法的精密度良好。

2.6 稳定性试验

取同一供试品溶液分别在0，2，4，6，8，12 h进样分析，葡萄糖、麦芽糖、水苏糖峰面积的RSD分别为2.04%、2.78%、2.13%，表明供试品溶液在12 h内稳定。

2.7 重复性试验

按2.3项下方法供试品溶液制备方法，对同一样品进行6次平行试验，按“2.1”项下色谱条件分别进行测定，测得葡萄糖、麦芽糖、水苏糖峰面积的RSD分别为2.15%、2.69%、2.54%。说明该方法的重现性良好。

2.8 加样回收率试验

取丹参地上部分，称取1 g，精密称定，共6份，2份一组，每组按相当于样品含量的80%，100%，120%分别精密加入3种对照品，按2.3项下方法制备供试品溶液，并按2.1项下色谱条件分别进行测定，计算回收率。葡萄糖的平均回收率为103.1%(RSD=2.97%)；麦芽糖的平均回收率为102.8%(RSD=2.21%)；水苏糖的平均回收率为97.9%(RSD=2.69%)。

2.9 样品测定结果

按照2.3项下方法制备各丹参地上部分的供试品溶液，再按照2.1项下相应的测定方法测定峰面积，并由标准曲线计算各样品中葡萄糖、麦芽糖、水苏糖含量。

图2 丹参不同生产期地上部分糖类成分的动态变化

从图中可以看出，丹参地上部分的糖类成分的含量总体来看呈上升趋势，葡萄糖含量为0.5%～2.5%，麦芽糖含量为0.6%～4.0%，水苏糖含量为0.6%～4.1%，总糖含量为2.0%～9.7%，12月份的总糖含量最高。

3 分析与讨论

含量测定的结果表明，丹参地上部分中含有葡萄糖、麦芽糖、水苏糖等，总糖含量介于2.0%～9.7%，10～12月份丹参地上部分的总糖含量较高。1月至6月总糖含量较低，6月至12月总糖含量曲线上升，并在12月份达到最高值，12月至1月为总糖含量迅速减少阶段。总糖含量出现上述波动的原因除实验误差外还可能与丹参的生长周期有关。1～6月份丹参地上部分是从枯萎至新生的过程，加上气温低，总糖含量较少，6～12月份，丹参幼苗长出，新生出茎叶部分，并趋于成熟，丹参地上部分的糖不断累积增加，12～1月份，丹参进入生长末期，地上部分逐渐枯萎，营养物质消耗，总糖含量大大下降。其中开发价值较高的水苏糖、麦芽糖在10月份时达到峰值，这为丹参非药用部位的综合开发提供了理论依据。试验发现，冬季时丹参地上部分总糖含量最高，为实现中药资源综合利用的最大化，冬季时采收效果最佳。

丹参地上部分中不仅含有丹酚酸类、丹参酮类成分，也含有糖类成分。在中药丹参加工过程中，其地上部分大多直接丢弃，若能对这一资源加以充分利用，将对中药资源利用、丹参植物经济发展起到积极的推动作用。

[1] 赵娜，郭治昕，赵雪，等.丹参的化学成分与药理作用[J].国外医药·植物药分册，2007，22(4)：155-160.

[2] 唐娜，杭太俊，叶正良，等.丹参提取物中酚酸类成分稳定性及降解动力学研究[J].时珍国医国药，2013，24(7)：1631-1633.

[3] 潘桂湘，乔延江，张伯礼，等.HPLC法测定复方丹参方中丹参3种脂溶性成分含量[J].北京中医药大学学报，2003，26(4)：61-62.

[4] 黄利，葛婷，夏蕴琼，等.HPLC-ELSD同时测定丹参注射液中4 种糖类成分的含量[J].中国现代中药，2013，15(6)：500-502.

[5] 郑俊修.丹参地上部分丹参酮ⅡA 及隐丹参酮的含量测定[J].华北国防医药，2006，18(1)：66-67.

[6] 杨黎彬，刘少静，魏彩霞，等.丹参地上部分脂溶性成分研究[J].儿科药学杂志，2011，17(4)：7-9.

[7] 蒋海强，于鹏飞，刘玉红.野生丹参地上部分化学成分提取分离与鉴定[J].山东中医药大学学报，2013，37(2)：166-167.

[8] Shao BM，Xu W，Dai H，etal.A study on the immune receptors for polysaccharides from the roots of Astragalusmembranaceus，a Chinese medicinal herb[J].Biochemical and biophysical research communications，2004，320(4)：1103-1111.

[9] 杨铁虹，贾敏，梅其炳.当归多糖组分促进淋巴细胞增殖及对IL-2和IFN-γ的诱生作用[J].中药材，2005，28(5)：405-407.

StudyonDynamicChangesofCarbohydrateComponentsintheAerialPartsofSalviamiltiorrhiza

GE Ting，ZHENGYunfeng*，CUIJian，XIAYanming，HUANGLi，PENGGuoping

(PharmacyCollegeofNanjingUniversityofTraditionalChineseMedicine，Nanjing210023，China)

Objective：To Study the carbohydrate components in the aerial parts ofSalviamiltiorrhizaand their dynamic changes.Mehtods：HPLC-ELSD method was used for analyzing contents of carbohydrate components in the aerial parts ofS.miltiorrhizarespectively.Results：Aerial parts ofS.miltiorrhizacontain glucose，maltose，stachyose，etc.In different growth period，the changes of carbohydrate components are regular the higher amount of total carbohydrate components is from October to December.Conclusion：Aerial parts ofS.miltiorrhizahave carbohydrate components，it provides a theoretical basis for the development and utilization of aerial parts ofS.miltiorrhiza.

Salviamiltiorrhiza；Aerial parts；Carbohydrate components；Dynamic change

2014-07-23)

江苏省自然科学基金(SBK201123752)；大学生实践创新训练项目(201310315037Z)

*

郑云枫，副研究员，研究方向：中药活性成分与质量评价；Tel：(025)86798186；E-mail：zyunfeng88@126.com

10.13313/j.issn.1673-4890.2014.12.006