胃腺癌组织中白细胞分化抗原147和Furin的表达对血管生成的作用

才保加 祁玉娟 周 为 王晓龙 马玉斌 马晓明

(青海大学附属医院胃肠外科，青海 西宁 810001)

胃腺癌病变发生和进展中肿瘤间质的血管生成明显增多，对供应营养和氧有重要价值〔1〕。白细胞分化抗原(CD)31是临床标记血管的重要标志物，对新生血管内皮细胞的标记特异性强〔2〕。CD147是免疫球蛋白家族的成员之一，在细胞表面发挥作用时具有多项生物学功能〔3,4〕。近来人们关注CD147在肿瘤中的作用，认为其类似癌基因的作用〔5〕。弗林蛋白酶(Furin)是最早发现的哺乳动物前体蛋白加工酶，底物非常广泛，包括多种凝血因子、激素、生长因子和基质金属蛋白酶等〔6〕。近来学者研究认为Furin的异常表达对肿瘤的发生和进展有一定关系〔7〕。本实验对胃腺癌术后组织中CD147、Furin和CD31的表达进行检测，关注其临床意义。

1 材料与方法

1.1一般资料 我院诊断为胃腺癌并进行根治手术的患者95例作为研究组，均经病理医师确诊，并符合WHO中的诊断标准。年龄56～78岁，平均66.8岁；男51例，女44例。术前均未进行放疗和化疗。62例不典型增生的胃黏膜组织作为对照组，年龄53～77岁，平均65.4岁；男32例，女30例。收集距肿物边缘>5 cm的正常胃黏膜组织作为正常对照组，年龄57～76岁，平均64.5岁；男33例，女29例。3组一般临床资料无差别，具有可比性。

1.23组中CD147、Furin和CD31蛋白的表达 选择CD147、Furin和CD31的浓缩液，试剂均购自北京博奥森生物技术公司。正式检测前进行预实验，选择染色强度最理想、背景最干净的配比浓度进行正式实验。CD147、Furin和CD34的检测应用免疫组化二步法，DAB染色。严格实验步骤，严格质量控制。

1.3CD147、Furin和CD34蛋白表达的判定 CD31以间质中血管内皮的细胞质染成棕黄色为阳性，选择连续的内皮细胞丛或分支判定为新生血管，选择10个密度最高的区域(400倍)进行计数，取平均值计为微血管密度(MVD)。CD147和Furin均以细胞质中染成棕黄色为阳性，均计数10个400倍上皮细胞集中的区域，计算阳性率。CD147和Furin以阳性细胞≥5％为阳性，以<5％为阴性。

1.4统计学方法 应用SAS6.12软件进行χ2检验和线性相关分析。

2 结 果

2.1研究组中CD147、Furin和MVD与临床特征的关系 研究组中CD147、Furin和MVD的表达均与肿瘤最大径、浸润深度、脉管侵犯和淋巴结转移相关。见表1。

表1 研究组中CD147、Furin阳性表达和MVD与临床特征的关系〔n(％)〕

2.23组中CD147、Furin和MVD的比较 3组中CD147、Furin的阳性率、MVD值的差别均有统计学意义。见表2。

2.3研究组中CD147、Furin和MVD相关性 CD147和MVD(r=0.47,P=0.027 4)、Furin和MVD(r=0.48,P=0.025 0)均具有正相关性。

表2 3组中CD147、Furin阳性表达和MVD比较〔n(％)〕

3 讨 论

胃腺癌的生长及进展与血管生成相关，此时肿瘤中癌基因和血管生成对促进肿瘤进展有重要价值〔8〕。CD31是临床病理中最常用的血管内皮细胞标志物，其标记的特异性强，尤其是对肿瘤新生的内皮细胞更明显。血管的生成使机体可以为肿瘤细胞提供更加丰富的营养和氧气，肿瘤的营养丰富，氧供丰富，肿瘤生成和代谢快，侵袭能力增加，转移潜能增强〔9〕。CD147是作为一种基质金属蛋白酶的诱导剂而发现的，是一种细胞表面的黏附分子，介导多种生物学功能〔10,11〕。研究认为CD147具有调节单羧酸转运蛋白的活性，对免疫应答、生殖等生理过程均有一定的调节作用，在此过程中可以直接影响上皮细胞的功能〔12,13〕。CD147与肿瘤的进展密切相关，可通过增加透明质烷的分泌量来促进肿瘤细胞的增长，通过诱导血管内皮生长因子的产生来促进肿瘤间质的血管新生〔14〕。CD147可以影响肿瘤的微环境，导致肿瘤细胞向临床浸润及向远处进行转移〔15〕。Furin在机体中的功能也具有多样性，如参与多肽与蛋白质激素的合成与分泌、膜受体的成熟过程及血浆蛋白前体的激活等〔16,17〕。近来研究显示Furin可以调节细胞的恶性转化及过程，同时加速肿瘤细胞的侵袭和播散，在此过程中，针对血管生成的作用更为引人关注〔18,19〕。

本研究结果提示CD147和Furin在肿瘤癌变过程中发挥明显的促进作用，同时MVD也随着肿瘤的恶变逐渐增多。CD147、Furin不仅是促进胃腺癌发生的重要因子，也是促进肿瘤血管生成的重要因子。CD147的跨膜区域具有亮氨酸拉链的结构特点，跨膜区域含有3个亮氨酸和1个苯丙氨酸，在细胞膜的疏水性环境中，电荷氨基酸是一个不稳定因素〔20〕，这提示CD147的跨膜区域可能会通过与其他蛋白相互作用引起蛋白的不稳定，CD31正是此种结构蛋白中的一员，二者易发生作用，影响肿瘤的间质结构。Furin可以引起肿瘤细胞分泌多种血管生成信号，肿瘤血管可以由周围正常组织的固有血管向肿瘤组织内部延伸而成〔21〕，也可以通过内皮细胞前体细胞分化后形成内皮依赖性血管〔22〕，此时血管生成，肿瘤细胞生长加速，肿瘤体积增大。因此Furin对胃腺癌的调节作用更明显。也有观点认为CD147对血管生成的作用可能对VEGF的影响更直接〔23〕，因此CD147可能促进肿瘤局部VEGF升高，进而VEGF诱导CD31阳性的血管生成，形成级联性反应。本文提示CD147、CD31、MVD三者均与肿瘤的进展有关。因此三者可能对判断预后有一定价值。

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