滋阴补肾法治疗卵巢早衰大鼠性腺脏器和血清性激素水平变化

郭军鹏 于兰英 徐 婷 刘震坤

(长春中医药大学基础医学院,吉林 长春 130117)

卵巢早衰(POF)是指40岁之前卵巢功能衰竭所导致的闭经现象。临床统计其发病率为1%左右。因此，该病的防治已引起一些科研人员的关注。中医认为POF的主要机制是肾虚精亏，所以治疗以补肾填精为主〔1〕。本实验以滋阴补肾代表方剂六味地黄汤治疗POF，为该药临床应用提供理论基础。

1 材料与方法

1.1药品与试剂 雷公藤多甙：上海复旦复华药业有限公司；戊酸雌二醇(补佳乐)：拜耳医药保健有限公司广州分公司；雌二醇(E2)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)放免试剂盒：购买于北京北方生物技术研究所。六味地黄汤：熟地黄15 g、山萸肉12 g、山药12 g、泽泻10 g、丹皮10 g、茯苓10 g，购自长春中医药大学附属医院。取10倍体积清水浸泡30 min，煎煮2次后混合药液，浓缩，置冰箱备用。

1.2实验动物分组及给药 雌性SD大鼠，(180±20)g，30只，吉林大学白求恩医学院基础实验动物中心提供。大鼠经适应性饲养后，行阴道脱落细胞学检查，筛选出动情周期正常者为受试大鼠。随机选出9只为空白对照组，给予生理盐水(含0.05%羧甲基纤维素钠)。其余大鼠参照文献方法〔2〕以雷公藤多甙复制卵巢早衰大鼠病理模型，每日给予50 mg/kg 雷公藤多甙片悬浮液(含0.05%羧甲基纤维素钠)连续灌胃14 d造模。将造模成功后的大鼠随机分为模型组、六味地黄汤组。对照组和模型组灌胃给予生理盐水2 ml/d，六味地黄组给予六味地黄汤6.75 g(生药)·kg-1·d-1(相当于人用剂量的10倍)，连续灌胃给药持续21 d。

1.3检测指标

1.3.1POF大鼠卵巢、子宫和肾上腺脏器系数的检测 采用乙醚麻醉，称重，眼球取血。剖腹取双侧卵巢、子宫和肾上腺，称取脏器湿重，计算脏器系数。脏器系数=脏器湿重(mg)/体重(g)×100%

1.3.2POF大鼠血清性激素的检测 血液室温静置30 min后，3 000 r/min离心15 min，取血清，-20℃保存待测。采用放射免疫法测定血清中E2、LH和FSH的水平。

2 结 果

2.1六味地黄汤对POF大鼠卵巢、子宫、肾上腺脏器系数的影响 与空白对照组比较，模型组大鼠卵巢和肾上腺脏器系数明显下降(P<0.05)，子宫脏器系数有下降趋势；六味地黄汤组卵巢和肾上腺脏器系数略有增加，但无统计学意义。见表1。

表1 六味地黄汤对POF大鼠卵巢、子宫、肾上腺脏器系数的影响

2.2六味地黄汤对POF大鼠血清性激素的影响 与空白对照组比较，模型组雌激素明显升高，卵泡刺激素显著下降(P<0.05)；与模型组比较，六味地黄汤组能够升高恢复卵巢早衰大鼠黄体生成素水平(P<0.05)，而对雌激素和卵泡刺激素没有显著影响。见表2。

表2 经验方对POF大鼠血清性激素的影响

3 讨 论

中医学认为POF属“血枯”、“血隔”、“闭经”等范畴，其主要病机为肾虚，与肝郁血瘀等也密切相关。根据病机治疗常以滋阴补肾为主兼有活血、健脾、益气等〔3〕，单味中药有熟地、菟丝子、淫羊藿、肉苁蓉、黄芪、当归、川芎、山药、山茱萸等，常用的中药方剂有六味地黄丸、左归丸等〔4，5〕。

本实验结果证明六味地黄汤能够升高黄体生成素。黄体生成素在有卵泡刺激素存在下，与其协同作用刺激卵巢雌激素分泌，使卵泡成熟与排卵、破裂卵泡形成黄体并分泌雌激素和孕激素。本实验中六味地黄汤组大鼠雌激素升高的并不明显，且子宫脏器系数下降推测可能与雷公藤所致POF大鼠病理模型的卵巢损伤较重，或六味地黄汤给药时间和(或)给药剂量有一定关系。

综上，滋阴补肾对POF具有一定治疗效果，但临床上为达最佳治疗效果须根据病情给予方药加减和剂量的调整。

4 参考文献

1金 影，刘震坤.六味地黄汤治疗更年期综合征〔J〕.长春中医药大学学报，2010;26(5)：738-9.

2谌 婕，吴克明，王家葵，等.雷公藤多甙致雌性小鼠肾虚生殖功能低下动物模型的研究〔J〕.中药新药与临床药理，2007;18(3)：208-11.

3蔡品均，金 哲，黄文玲，等.补肾调肝法对治疗自身免疫性卵巢早衰小鼠的实验研究〔J〕.天津中医药，2010;7(1)：56-8.

4陶仕英，牛建昭，赵丕文，等.二仙汤及其组方中药对幼年大鼠子宫作用的研究〔J〕.中国实验方剂学杂志，2010;16(18)：118-21.

5朱 玲，罗颂平，许丽绵，等.左归丸对免疫性卵巢早衰小鼠卵巢Bcl-2、Bax蛋白表达的影响〔J〕.中药新药与临床药理，2012;23(4)：381-6.