江苏省扬州地区适龄妇女生殖道B群链球菌感染情况

吴德群，陈 剑

(江苏省扬州市妇幼保健院 检验科，江苏 扬州，225002)

B群链球菌(GBS)又称为无乳链球菌，是一种寄生于妊娠期妇女下消化道及泌尿生殖道的细菌，新生儿可直接自母体，或分娩时由母体生殖道寄殖菌上行感染，是围产期母子严重感染性疾病的主要致病菌[1]。GBS感染的新生儿出生后可导致严重的并发症，死亡率极高，所以GBS感染一直是国际围产医学领域研究的热点问题。通过适龄妇女阴道及直肠GBS检验，可以监测妊娠前后妇女GBS感染情况，对预防与及时治疗提供方便。扬州市妇幼保健院近年来开展了适龄妇女的GBS检测，本文对扬州市2013年全年妇女GBS感染情况进行调研，分析不同年龄阶段、不同季节、受孕与否的适龄妇女GBS感染情况，以利于今后该地区的预防和治疗。

1 资料与方法

1.1 一般资料

以2013年1—12月在本院门诊或住院治疗的3303例适龄妇女为研究对象，年龄17～38岁,平均28.4岁。根据研究对象不同年龄阶段、是否怀孕情况及检测时间不同进行分组，其中年龄分为<20岁、20～25岁、26～30岁、31～35岁及>35岁5组；怀孕情况分为非妊娠及围产期2组；检测时间分为春(2～4月)、夏(5～7月)、秋(8～10月)、冬(11～1月)4组，分别对不同年龄、怀孕情况及检测时间生殖道B族链球菌感染阳性率差异进行分析。

1.2 研究方法

1.2.1 样本采集：具体方法参照2002年CDC推荐的取材方法[2]：先擦去外阴分泌物，将2根无菌棉拭子放入阴道1/3处，采取阴道分泌物；再将此棉拭子插入肛门，在肛门括约肌上约2～5 cm处取直肠分泌物，使棉拭子上兼有阴道与直肠分泌物。将棉拭子放入无菌套管中，密闭送检。

1.2.2 检测方法：采用实时荧光PCR检测法进行定性检测[3]: 在棉拭子管中加入1 mL灭菌清洗液，高速震荡2 min制成样本悬浮液；取出全部样品放入1.5 mL离心管中，13 000 r/min离心5 min后弃上清，加入1 mL灭菌清洗液震荡重悬，10 000 r/min离心5 min后弃上清，加入50 μL清洗液重悬。样品管内加入1管提取固形物，高速震荡5 min。制备阴、阳性对照样本，将待检样本、阴性、阳性对照瞬时离心后，加入10 μL内参照，95 ℃干浴2 min，立即冰浴2～5 min后13 000 r/min离心1 min，上清液用于PCR检测。B族链球菌核酸(荧光PCR法)检测试剂盒由泰普生物科学(中国)有限公司提供。检测设备为ABI5000荧光PCR仪。

1.2.3 结果判定：利用仪器相互配套软件进行自动分析，得到各样品Ct值。当样品Ct值≤23，且有较好的对数增长曲线，内参照Ct≤30时判定为阳性。

2 结 果

2.1 不同年龄组妇女生殖道GBS感染率比较

扬州市不同年龄组妇女生殖道GBS感染率比较见表1。

表1 各年龄组生殖道GBS感染率比较

表1结果表明：不同的年龄阶段妇女生殖道GBS感染存在显著差异，其中31～35岁GBS感染情况最为严重，感染率达到6.72%，21～25岁感染情况最轻，感染率为3.16%。<20岁、21～25岁、26～30岁及>35岁年龄组妇女GBS 感染率没有显著差异，而与31～35岁年龄组之间存在极显著差异，表明扬州地区适龄妇女GBS感染情况可能与年龄结构存在一定的关系。

2.2 不同怀孕情况妇女生殖道GBS感染率比较

扬州市适龄妇女不同怀孕情况生殖道GBS感染率比较见表2。

表2 不同怀孕情况生殖道GBS感染率比较

表2结果显示：围产期妇女GBS感染率略高于非妊娠妇女，但是不同怀孕情况适龄妇女生殖道GBS感染并不存在显著差异,表明怀孕与否对扬州地区适龄妇女生殖道GBS感染没有影响。

2.3 不同检测季节生殖道GBS感染

2013年不同检测时间扬州市适龄妇女生殖道GBS感染率比较见表3。

表3 2013年不同检测时间生殖道GBS感染率比较

表3结果表明: 2013年扬州市3033例适龄妇女生殖道GBS检测中，春季(2～4月)阳性检出率最低，为0.48%，与其他季节检测出阳性检出率存在极显著差异，而其他各季节之间没有显著差异。

3 讨 论

GBS属β溶血性链球菌的一种，为革兰阳性球菌，根据细胞壁具特异性的S物质，分为Ⅰa、Ⅰb、Ⅰc、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ等至少7个血清型。所有血清型中，a、Ⅲ及Ⅴ型最常见，占所有分离菌株的60%以上，其中Ⅰa型多见于育龄妇女。大量研究报道表明，GBS主要通过产道上行扩散感染子宫与胎膜，易造成胎儿在子宫内感染，严重者可导致胎儿窒息死亡，所以说主要与妊娠期妇女及新生儿感染有密切关系，已经成为围产期感染的重要致病菌之一[4]。近年来中国多个大中医院已将GBS检测列入妇女围产期筛查的重要内容，提高对其感染的预防与治疗，可极大地避免造成的不良后果。

GBS检测方法最先主要通过对妇女直肠、生殖道拭子或尿液进行细菌培养方法，临床实验表明，普通培养在检测GBS定植上假阴性率可高达50%，选择性培养基又存在着检测时间较长的问题[2，5]。各种GBS血清学检测方法，如乳胶凝集、酶联免疫吸附、协同凝集及对流免疫等，虽可以快速获得检测结果，但结果准确性不高，近年来临床应用已大为减少。荧光PCR检测技术利用荧光标记探针，检测临床标本中GBS的特定基因(CAMP)，从而判断GBS 的存在，不仅特异性高、灵敏性好，而且检测周期短，操作简便，已在国内各大中医院推广使用[3]。本研究所使用的检测方法就是选用荧光PCR检测技术，保证调查工作的准确性。

本次研究结果显示：扬州地区2013年妇女阴道GBS感染率为4.12%，与绍兴市4.6%[6]相仿，远低于北京市7.5%～15%[7-9]、沈阳市11.2%[10]、佛山市13.7%[11]及桂林市7.5%[12]，而美国孕妇GBS定植率更是高达40%～50%。是否不同地区存在着GBS感染的特异性，尚需要更多地区GBS感染率调查数据才能分析研究。美国哈佛大学Michael Wessels教授[1]认为，如果妊娠妇女GBS定植率很低(<5%)，由于成本效益的问题，常规复查的价值不大。从扬州市2013年数据看似乎在扬州市对GBS定植筛查的意义不明显，但可看到31～35岁年龄区GBS感染率仍超过6%，因此仍有必要对适龄孕妇GBS常规筛查。

本次研究结果显示：不同年龄组GBS感染情况存在显著差异(P<0.05)，扬州地区妇女31～35岁GBS感染的可能性最高，且与其他年龄组存在着显著差异(P<0.05)。除去<20岁年龄组因样本数较少(n=54)、感染人数也很少(2人)、

数据无统计学意义外，GBS 感染情况随着年龄增长而增加，直至35岁后出现明显回落。这一结果初步表明：扬州地区妇女31～35岁年龄段可能更易受GBS感染，因此更应注意对此类疾病的预防。

本研究结果显示：扬州市非妊娠及围产期妇女GBS感染率没有显著差异，与陈恒等[11]在佛山对不同怀孕情况各500例调研结果一致，充分说明GBS感染率高低与妇女是否怀孕无明显关联，妇女怀孕不是引起GBS感染的原因。而一般GBS带菌者多无特殊临床表现，只有分娩或生殖道手术进入生殖道上段或盆腔才会引起各类盆腔炎症。为防止GBS感染对新生儿的影响，适龄妇女应在怀孕前作GBS定植筛查。

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