幽门螺旋杆菌及CA724、CEA联检对胃癌早期筛查的价值

李茂林，臧 嘉，蒋瑶丽，蒋 皎

(1. 江苏省宜兴市肿瘤医院 检验科，江苏 宜兴，214200;2. 江苏省无锡市妇幼保健医院 检验科，江苏 无锡，214002)

胃癌属于一种胃黏膜上皮细胞癌症，是消化道常见的恶性肿瘤之一，具有临床发病率高、分布广泛、死亡率高的特点，在中国胃癌死亡率占恶性肿瘤的23%，居恶性肿瘤之首，其发病的原因和病情发展的过程是多种因素共同作用的结果[1]。目前胃镜是确诊胃癌的最好方法，但早期胃癌易发生漏诊。如何选择特异性的肿瘤标志物和相关指标早期筛查胃癌，避免延误病情，在临床尤为重要。本文通过对本院就诊的79例胃癌患者进行血清幽门螺旋杆菌及CA724、CEA的联合检测，并与健康体检者和胃良性病变者进行对照，评估单独及联检对胃癌早期筛查的应用价值，为临床早期诊断提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

79例胃癌患者为2011年12月—2013年12月在本院门诊及住院患者，均行电子胃镜检查并经病理确诊，其中男51例，女28例，平均54.5岁。选择同期门诊及住院的胃良性病变患者75例为胃良性病变组，其中男49例，女26例，平均55.2岁，其中慢性胃炎31例，胃溃疡23例，胃息肉21例。选取同期来本院进行体检的健康人群85例为对照组，男46例，女39例，平均53.8岁。经临床和实验室排除消化系统肿瘤及胃良性病变，所有实验对象未合并高血压和免疫系统疾病，且在近期无服药史，在年龄、性别等无显著差异，具有可比性。

1.2 幽门螺旋杆菌Hp检测

幽门螺旋杆菌(Hp)IgG抗体检测采用快速检测法(胶体金法)，试剂来自新加坡MP生物医学亚太私人有限公司，常规采用血清标本，操作之前对高脂、脂血、黄疸或受污染样本在使用前过滤(0.45 μm)或离心处理；在检测反应板上标上样本名称；加入25 μL的血清或血浆样本至Assure H.Pylori Rapid Test加样方孔；待样本前沿刚越过粉红色的质控线(A)时，即刻加入2滴缓冲液至椭圆孔，不能让样本过线太多，必须在样本前沿流出观察孔之前加入缓冲液；拉下标有Hp字样的分离片直到感觉有阻力，再加入1滴缓冲液于加样方孔，由于抗原抗体结合反应浓集于膜上可使标记物显红色，15 min后观察结果判读。

1.3 结果判读

阳性结果：质控线(A)，CIM(B)和测试线(C)均显示颜色条带，或质控线(A)和测试线(C)均显示颜色条带，仅有C线阳性提示曾经感染。不同颜色深度的条带都示为阳性反应。阴性结果：仅质控线(A)显示颜色条带。无效结果：质控线(A)未显示颜色条带或质控线(A)和CIM(B)皆显示条带而测试线(C)未有显现。若出现此情况，需要用新的检测反应板重新检测。

1.4 血清CEA 、CA724检测

仪器采用瑞士罗氏诊断公司生产E 170全自动电化学发光免疫自动分析仪；仪器校准：每批试剂盒必须用新鲜试剂和Cal 1，Cal 2定标1次；采用双抗体夹心法原理，整个过程18 min完成。CEA>3.4 ng/mL,CA724>6.9 IU/mL为阳性诊断界值。采用Elecsys肿瘤标志物质控品1和2 (PreciControl Tumor Marker)。质控品1和质控品2至少每24 h或每1次定标后测定1次。检测值应落在确定的范围内，如出现质控值落在范围以外，应采取校正措施。

2 结 果

2.1 胃癌、胃良性疾病患者及对照组Hp检出率与血清CEA 、CA724水平比较

胃癌组Hp检出率与血清CEA 、CA724水平与胃良性疾病患者及对照组比较均明显升高(P<0.05)，胃良性疾病患者与对照组Hp检出率有明显变化(P<0.05)而血清CEA 、CA724无明显变化(P>0.05)。见表1。

表1 各组Hp检出率与血清CEA 、CA724检测水平

2.2 胃癌、胃良性疾病患者及对照组Hp及CEA、CA724阳性检出率比较

胃癌组Hp及血清CEA 、CA724阳性检出率明显高于胃良性疾病组和对照组(P<0.05)，胃良性疾病组与对照组Hp阳性检出率有明显变化(P<0.05)，血清CEA 、CA724阳性检出率无明显变化(P>0.05)。见表2。

表2 各组Hp检出率与血清CEA、CA724阳性检出率比较 %

2.3 Hp、CEA、CA724及其联合检测在胃癌诊断中的评价

Hp、CEA、CA724联合检测的敏感性、特异性及准确性均明显高于单项检测(P<0.05)，见表3。

表3 Hp、CEA、CA724及其联合检测在胃癌诊断中的评价 %

3 讨 论

胃癌是常见的恶性肿瘤之一，因其发病率高，早诊断、早治疗显得尤为重要。目前临床及实验研究大都集中于几项比较敏感及特异的肿瘤标志物的联合检测上，而作为胃癌相关重要因素之一的Hp与胃癌相关肿瘤标志物的联合检测在胃癌早期诊断中的价值，目前研究较少。本实验重点探讨Hp及CA724、CEA联合检测的意义，评估单独及联检对胃癌早期筛查的应用价值，为临床早期诊断提供依据。

幽门螺旋杆菌与胃癌关系密切，其是一种单极、多鞭毛、末端钝圆、螺旋形弯曲的细菌，长2.5～4.0 mm，宽0.5～1.0 mm，革兰染色呈阴性，在胃黏膜上皮细胞表面常呈典型的螺旋状或弧形。流行病学调查显示，幽门螺杆菌感染与胃癌发生存在显著相关性，Hp感染后胃癌发生率增加4～9倍，且60%胃癌患者有Hp感染[2]。在20世纪90年代，国际癌症研究中心(IARc)已将幽门螺杆菌为人类胃癌的第一类致癌物。近年来，通过对幽门螺杆菌感染的大量研究[3-5]中提出了其致胃癌的可能性，机制如下: ① 细菌的代谢产物直接转化黏膜：释放的胞质毒素损伤胃黏膜的抗坏血酸分泌机制；Hp感染后所致的低胃酸导致细菌过度生长，亚硝酸盐化合物聚集诱导癌变的发生; ② 上皮细胞的增殖：Hp感染后所致的炎性免疫反应产生的细胞因子与细胞相互作用，促进细胞增生，细胞增生加速亦可能是细胞损伤的一种代偿反应，与生长因子活性及数量成正比，导致上皮细胞更新加速; ③ 基因的变异：幽门螺杆菌本身能诱发基因毒性作用，类同于病毒的致病机制，Hp-DNA的某些片段转入宿主细胞，引起转化，癌基因表达增多，与细胞生长因子特异性结合，参与肿瘤的发生与发展[6-7]。目前幽门螺旋杆菌Hp检测采用快速检测法(胶体金法)，灵敏度和特异性有一定局限性，阴性结果并不排除接触或受幽门螺旋杆菌感染的可能性，现症感染条带呈阴性并不排除目前受感染的可能性，因为不同区域人群的抗体对于现症感染条带抗体的反应普遍性存在差异，所以需要结合其他特异性指标来进行胃癌的早期筛查。

肿瘤标志物对肿瘤的诊断具有明确的临床价值，其可在影像学检查异常之前即有不同程度升高，故对早期诊断有重要价值[8]。理想的肿瘤标志物应具备特异性强及灵敏性高的特点，但肿瘤标志物是肿瘤发生和增殖中由肿瘤细胞生物合成释放的一类物质，是与肿瘤有关的抗原，而非肿瘤的特异性抗原。一种肿瘤可以出现多种肿瘤标志物，同一种肿瘤标志物可以出现在几种不同的肿瘤中[9]，这就降低肿瘤标志物灵敏性和特异性，在临床应用中有局限性，联合检测可弥补其局限性，提高肿瘤诊断的阳性率。癌胚抗原(CEA)是特异性的癌胚蛋白之一，正常CEA分泌进入胃肠道而癌细胞分泌CEA进入血液和淋巴，因此恶性肿瘤患者血中CEA增高。它主要是胃肠道肿瘤的标志物，具有免疫抑制，促进肿瘤转移的作用。TNM临床分期I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期患者血清CEA含量随着分期增加呈逐级递增趋势，其中Ⅳ期明显高于其他各期，提示CEA升高有助于胃癌患者的筛查诊断、临床分期、病情判断和预后评价。有研究亦表明CEA升高可以辅助早期诊断，在胃癌复发或转移的患者CEA升高较临床影像或胃镜提前2个月的时间[10]。高浓度CEA可干扰正常细胞黏附力，破坏上皮组织的完整性，有利于癌细胞黏附邻近组织，促进浸润与转移，提示CEA升高与癌转移密切相关[11]。

CA724是一种肿瘤相关糖蛋白，是诊断胃癌的可靠肿瘤标志物。TN M临床分期Ⅰ、 Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期患者血清CA724含量随着分期增加呈逐级递增趋势，提示血清CA724升高有助于胃癌的诊断、病情判断、预后评价[12]。有研究表明CA724对胃癌诊断的阳性率要优于其他肿瘤标志物，是检测胃癌进程和治疗效果的有用标志物，其含量与胃癌分期、肿瘤大小、淋巴结受累及浸润转移等生物学行为关系密切。各种肿瘤标志物在不同病理类型的肿瘤有不同检出率，单项肿瘤标志物在肿瘤中的检出率及灵敏度有一定局限性，联合检测可以提高肿瘤的检出率[13]。

检测胃癌患者血清Hp、CEA与CA724有助于胃癌的早期诊断，其检测方法简单，临床应用方便。本实验采用的胶体金血清标本Hp检测，不同于以往的胃组织标本Hp检测，无创、取样方便，与肿瘤标志物相比具有快捷、价格低、就诊患者容易接受等优点[14]，在对疑似胃癌或胃癌高危人群进行筛查时，可以考虑将其作为首选检查项目，但因在良性病变中阳性率也较高，所以需结合肿瘤标志物CEA、CA724三联检测，提高胃癌诊断的灵敏度，有效防止漏诊，为临床早期诊断胃癌提供重要依据。

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