不同组织学类型膀胱癌组织中HER2蛋白的表达

胡文晖，郝 斌#，李惠翔，张志臣

1)郑州大学第二附属医院泌尿外科 郑州 450014 2)郑州大学第一附属医院病理科 郑州 450052

不同组织学类型膀胱癌组织中HER2蛋白的表达

胡文晖1)，郝 斌1)#，李惠翔2)，张志臣1)

1)郑州大学第二附属医院泌尿外科 郑州 450014 2)郑州大学第一附属医院病理科 郑州 450052

#通讯作者,男,1956年11月生,博士,教授,主任医师,研究方向:泌尿外科疾病基础与临床,E-mail:binhao68@hotmail.com

膀胱肿瘤；HER2蛋白

目的：探讨不同组织学类型膀胱癌组织中HER2蛋白的表达及意义。方法采用免疫组化法检测73例不同组织学类型的膀胱癌组织中HER2蛋白的表达水平及其与临床分期、病理分级之间的关系。结果HER2蛋白在膀胱鳞状细胞癌(鳞癌)、腺癌和尿路上皮细胞癌组织的阳性表达率分别为88.9%(16/18)、88.2%(15/17)和57.9%(22/38)，差异有统计学意义(P=0.016)，鳞癌和腺癌两者之间的表达差异无统计学意义(P>0.999)，尿路上皮细胞癌组织中HER2的阳性表达率低于鳞癌和腺癌 (χ2=8.620，P=0.003)；膀胱癌组织中HER2蛋白的表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小无关(P>0.05)，而与肿瘤TNM分期、分化程度及淋巴结转移有关(χ2=7.980，11.559，11.934，P<0.05)。结论HER2蛋白可以作为鉴别不同组织学类型膀胱癌的潜在指标，并与膀胱癌的增殖、浸润、转移密切相关。

膀胱癌作为常见的恶性肿瘤，发病率及死亡率均居泌尿系统肿瘤的首位，其组织学类型以尿路上皮细胞癌最常见，鳞状细胞癌(鳞癌)与腺癌仅占5%左右。不同人群的膀胱癌组织学类型不同，在大多数国家中，以尿路上皮细胞癌为主，占90%以上，而非洲国家则以血吸虫感染所致的鳞癌为主，如在埃及，鳞癌约占膀胱癌的75%[1]。近年来，HER2蛋白作为判断一些肿瘤进展、预后的指标，受到广泛关注。国外学者[2]对HER2基因及其蛋白表达与膀胱癌的关系进行了研究，发现HER2蛋白在膀胱尿路上皮细胞癌组织中高表达，尤其在低分化和浸润性膀胱癌组织中。目前，国内的相关研究也主要集中在尿路上皮细胞癌。作者对不同组织学类型的膀胱癌组织中HER2蛋白进行检测，探讨其与膀胱癌临床病理参数之间的关系。

1 材料与方法

1.1标本来源收集2011年6月至2012年10月郑州大学第二附属医院泌尿外科及郑州大学第一附属医院泌尿外科住院的膀胱癌患者73例，术后病理证实均为原发性膀胱癌。男47例，女26例，年龄57～69(62.6±5.3)岁。其中尿路上皮细胞癌38例，鳞癌18例，腺癌17例；肿瘤分化程度采用WHO 2004分级：高分化36例，中分化21例，低分化16例；临床分期采用国际抗癌协会第7版分期标准：0、Ⅰ期15例，Ⅱ期33例，Ⅲ、Ⅳ期25例；有淋巴结转移42例，无淋巴结转移31例。

1.2HER2蛋白表达的免疫组化检测及结果判定

兔抗人HER2多克隆抗体购自Biolegend公司，SP9000试剂盒、抗原修复液和DAB显色试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。 所有石蜡包埋标本连续4 μm切片，进行SP免疫组化染色，具体操作步骤严格按试剂盒说明书操作。以已知阳性切片作阳性对照(试剂公司提供)，以PBS代替一抗作阴性对照。HER2蛋白表达定位于细胞膜，或伴有部分细胞质着色，仅胞质着色为非特异染色。结果判断标准：①按阳性细胞数计分，在高倍镜下选5个视野，共计数200个细胞，阳性细胞数<5%计为1分，5%～计为2分，25%～计为3分，50%～计为4分，≥75%计为5分。②按染色强弱分级，无染色计为0分，弱染色(淡黄)计为1分，中等强度染色(黄棕)计为2分，强阳性染色(棕色)计为3分。上述两种评分之和≥5分为阳性，<5分为阴性。

1.3统计学处理采用SPSS 17.0进行分析，应用χ2检验比较不同组织学类型膀胱癌组织中HER2蛋白表达的差异以及膀胱癌组织中HER2蛋白表达与临床病理参数的关系，检验水准α=0.05。

2 结果

2.1不同组织学类型膀胱癌组织中HER2蛋白的表达见图1。HER2蛋白在尿路上皮细胞癌、鳞癌和腺癌组织中的阳性表达率分别为57.9%(22/38)、88.9%(16/18)、88.2%(15/17)，差异有统计学意义(P=0.016)，在鳞癌与腺癌组织中HER2蛋白阳性表达率差异无统计学意义(P=0.999)。尿路上皮细胞癌中HER2蛋白阳性表达率低于鳞癌和腺癌(χ2=8.620，P=0.003)。

2.2膀胱癌组织中HER2蛋白表达与临床病理参数的关系见表1。膀胱癌组织中HER2蛋白的表达与患者的性别、年龄及肿瘤大小无关(P>0.05)，而与TNM分期、肿瘤分化程度及淋巴结转移有关(P<0.05)。

表1 HER2蛋白表达与膀胱癌临床病理参数的关系

3 讨论

HER2为人类表皮生长因子受体( human epidermal growth factor receptor,EGFR)家族的第2个成员，也称为C-erbB-2基因，其编码产物为具有酪氨酸酶活性的细胞跨膜糖蛋白，参与细胞生长、分化的调节。在正常情况下HER2处于非激活状态，当受到某些致癌因素作用后，主要以基因扩增和过度表达的形式被激活，转化为活化的癌基因，通过和EGFR之间的协同作用形成同源或异源二聚体，使ATP能更容易与受体分子结合，激活受体并作用于细胞核，使细胞增殖，抑制肿瘤细胞凋亡；上调血管内皮生长因子和血管通透性因子的表达，促进肿瘤新生血管生成，增强肿瘤细胞的侵袭能力，导致肿瘤细胞的过度增殖、浸润或转移[3-4]。

HER2基因的激活可使其蛋白表达增多,因此检测HER2蛋白的表达可间接反映基因状态。文献[5-7]表明HER2在乳癌、胃癌、子宫内膜癌、肝癌中均存在扩增和过度表达。在对不同组织学类型膀胱癌的研究[8-10]中发现，尿路上皮细胞癌中HER2蛋白阳性表达率为26%～80%，该实验结果为57.9%。

针对膀胱鳞癌、腺癌的研究较少，国外在对血吸虫所致的膀胱鳞癌的研究中发现，HER2蛋白在鳞癌组织中高表达[11]。该研究发现HER2蛋白在鳞癌和腺癌组织中阳性表达率分别为88.9%、88.2%，且HER2蛋白在尿路上皮细胞癌中的表达低于鳞癌及腺癌，而在鳞癌和腺癌两者之间的表达差异无统计学意义，提示检测HER2蛋白的表达可作为鉴别不同组织学类型膀胱癌的潜在指标，另外HER2蛋白在鳞癌和腺癌组织中高表达，可能是两者浸润、转移潜能强的原因之一。

大量研究证实HER2的过表达与肿瘤的组织分化、临床分期、淋巴结转移及生存率有一定相关性：Prati等[12]研究表明在乳癌中HER2蛋白的过表达与组织学分级、淋巴结转移密切相关，与肿瘤大小、临床分期无关；王辛等[13]发现乳癌的高腋窝淋巴结转移与HER高表达呈正相关；张红燕等[14]在研究不同分子亚型的浸润性乳癌临床病理特征中发现HER2阳性病例均为浸润性癌。该研究发现，TNM分期、分化程度及有无淋巴结转移与HER2蛋白的阳性表达有关，即随着膀胱癌恶性程度的增加和浸润深度的增加，HER2蛋白的阳性表达率增加。

总之，HER2蛋白可以作为鉴别不同组织学类型膀胱癌的潜在指标，并与膀胱癌的增殖、浸润、转移密切相关。

[1]Heyns CF，van der Merwe A.Bladder cancer in Africa[J].Can J Urol,2008,15(1):3899

[2]Alexa A,Baderca F,Zahoi DE,et al.Clinical significance of Her2/neu overexpression in urothelial carcinomas[J].Rom J Morphol Embryol,2010,51(2):277

[3]Artufel MV,Valero AC,Llado RR,et al.Molecular protocol for HER2/neu analysis in breast carcinoma[J].Clin Transl Oncol,2005,7(11):504

[4]Korkaya H,Paulson A,Iovino F,et al.HER2 regulates the mammary stem/progenitor cell population driving tumorigenesis and invasion[J].Oncogene,2008,27(47):6120

[5]Rastelli F,Crispino S.Factors predictive of response to hormone therapy in breast Cancer[J].Tumori,2008,94(3):370

[6]陈娟,李东石,余英豪,等.Her-2蛋白在胃癌中的表达及其临床意义[J].世界华人消化杂志,2010,18(13):1375

[7]Lae M,Couturier J,Oudard S,et al.Assessing HER2 gene amplification as a potential target for therapy in invasive urothelial bladder cancer with a standardized methodology: results in 1005 patients[J].Ann Oncol,2010,21(4):815

[8]Wulfing C,von Struensee D,Bierer S,et al.Expression of Her2/neu in locally advanced bladder cancer: implication for a molecular targeted therapy[J].Aktuelle Urol,2005,36(5):423

[9]Gardmark T,Wester K,De la Torre M,et al.Analysis of HER2 expression in primary urinary bladder careinoma and corresponding metastases[J].BJU Int,2005,95(7):982

[10]Hansel DE,Swain E,Dreicer R,et al.HER2 overexpression and amplification in urothelial carcinoma of the bladder is associated with MYC coamplification in a subset of cases[J].Am J Clin Pathol,2008,130(2):274

[11]Eissa S,Ali HS,Al Tonsi AH,et al.HER2/neu expression in bladder cancer: relationship to cell cycle kinetics[J].Clin Biochem,2005,38(2):142

[12]Prati R,Apple SK,He JB,et al.Histopathologic characteristics predicting HER-2/neu amplification in breast cancer[J].Breast J,2005,11(6):433

[13]王辛,赵彤,梁文颖,等.乳腺癌腋窝淋巴结转移与癌组织雌激素受体、黄体酮受体、Her-2表达的相关性分析[J].解放军医学杂志,2010,35(8):1010

[14]张红燕,刘宇琼,杨建萍,等.不同分子亚型的浸润性乳癌临床病理特征[J].郑州大学学报:医学版,2010,45(5):801

(2013-05-03 收稿 责任编辑 赵秋民)

Expression of HER2 protein in different histological types of bladder cancer

HUWenhui1)，HAOBin1)，LIHuixiang2)，ZHANGZhichen1)

1)DepartmentofUrology，theSecondAffiliatedHospital，ZhengzhouUniversity，Zhengzhou450014 2)DepartmentofPathology，theFirstAffiliatedHospital，ZhengzhouUniversity，Zhengzhou450052

bladder neoplasm；HER2 protein

Aim: To explore the expression and the significance of HER2 protein in different histological types of bladder cancers．Methods: The immunohistochemistry SP method was used to detect the expression of HER2 protein in 73 cases of different histological types of bladder cancers．Results: The positive expression rate of HER2 protein was 88.9%(16/18) in squamous cell cancer，88.2%(15/17) in adenocarcinoma and 57.9%(22/38) in urothelial cell carcinoma, there were statistical differences(P=0.016), there was no significant difference between squamous cell carcinoma and adenocarcinoma (P>0.999). The positive expression rate of HER2 in urothelial cell carcinoma were lower than those in squamous cell carcinoma and adenocarcinoma (χ2=8.620，P=0.003).The expression of HER2 protein in bladder cancer was not correlated with patient’s gender, age or tumor size(P>0.05),but correlated with the tumor TNM stage,differentiation degree and lymph node metastasis (χ2=7.980，11.559，11.934，P<0.05).Conclusion: HER2 protein can be used as potential indicators identifing different histological types of bladder cancer and closely related with bladder cancer’s proliferation, invasion and metastasis.

R737.14

10.3969/j.issn.1671-6825.2014.01.027