酵母细胞壁多糖对异育银鲫生长、免疫和抗应激能力的影响

杨 凡， 聂 琴， 陈昌福， 李 彪

（1.安琪酵母股份有限公司，湖北宜昌 443003；2.华中农业大学水产学院，湖北武汉 430070）

应激反应是鱼体对各种环境因子的超常刺激所产生的一种非特异性生理反应。过度的应激不仅影响鱼类的生产性能，还会诱发多种疾病，甚至造成死亡。酵母菌细胞壁多糖作为一种良好的非特异性免疫增强剂，其主要功能性成分是β-葡聚糖、甘露寡糖等（朱红梅，2013）。研究表明，酵母细胞壁多糖应用于水产动物养殖，具有促进机体免疫功能、增强机体抗病能力与应激能力等（丁卓莹和洪徐鹏，2013；曹俊明等，2013）。本试验以酵母细胞壁多糖为试验材料，以异育银鲫（Carassius auratus gibelio）为试验对象，旨在研究酵母细胞壁多糖对养殖异育银鲫免疫能力和抗应激能力的影响。

1 材料与方法

1.1 试验用鱼及饲养条件 异育银鲫由武汉九州神农赛科公司提供，选择体色、体况、体长基本一致，平均体重为（214.0±21.0）g的异育银鲫作为试验对象，随机分为4组，分别在面积约为1.33万m2养殖池塘进行饲养。

1.2 试验饲料的制作与投喂 对照组投喂基础饲料，试验组分别投喂添加0.5‰、1‰、2‰酵母细胞壁多糖 （由安琪酵母股份有限公司提供）的饲料，所有饲料均制成颗粒料，每日投饵量均为体重的2%（随鱼的进食情况作适当变化），每天早、晚各投喂1次，连续投喂55 d。试验结束后进行后续测定分析。

1.3 生长性能的测定 试验开始前和结束后，分别对各组鱼进行抽样（20尾）称重。试验期间，记录每日投喂饲料量。生长性能用增重量和增重率来衡量。

增重率/%=（试验末期均重－试验初期均重）/试验初期均重×100。

1.4 免疫指标的检测 分别在试验的第 10、25、40、55天，每组取鱼10尾，尾静脉采血，将全血样本分为2份，一份自然凝固，以制备血清，另一份用肝素抗凝，用于白细胞吞噬活性的检测。溶菌酶活性的检测采用刘洪梅等（2010）的方法，白细胞吞噬活性的检测采用陈昌福等（1995）的方法。

1.5 抗应激效果测定 抗应激能力的比较，根据聂琴等（2014）的方法操作，比较试验组和对照组鱼的耐低氧、运输和抗干旱能力差异。

1.6 数据分析 试验数据采用SPSS 13.0软件进行统计分析，先用ANOVA进行单因素方差分析，显著差异（P ＜ 0.05），进行 Duncan’s多重比较分析。数据以平均数±标准误表示。

2 结果

2.1 酵母细胞壁多糖对异育银鲫生长性能的影响 从表1可知，在基础饲料中添加不同比例酵母细胞壁多糖均能有效改善异育银鲫的生长效果，其中添加0.5‰、1‰、2‰多糖组增重率分别较对照组提高 51.14%（P ＜ 0.01）、9.69%（P ＞0.05）、15.77%（P ＞ 0.05）。

表1 酵母细胞壁多糖对异育银鲫生长性能的影响

2.2 酵母细胞壁多糖对血清中溶菌酶活性的影响 由表2可知，添加酵母细胞壁多糖可提高血清中溶菌酶活性，但各组间无显著差异 （P>0.05）。第55天时酵母细胞壁多糖对血清中溶菌酶活性影响较小，可能是受到水温下降的影响。对比酵母细胞壁多糖不同添加比例下溶菌酶活性的变化情况，可以看出，添加0.5‰的酵母细胞壁多糖组提升溶菌酶活性效果相对较好。

表2 酵母细胞壁多糖对血清中溶菌酶活性的影响mg/mL

2.3 酵母细胞壁多糖对白细胞吞噬活性的影响从表3可知，在试验的第10天，试验组与对照组相比白细胞吞噬活性均无明显变化，第 25、40、55天，各试验组白细胞的吞噬百分比（PP）和吞噬指数（PI）均高于对照组，但均无显著差异（P＞0.05）；对比不同添加比例下吞噬活性的变化情况，可知，添加1‰的酵母细胞壁多糖组提升效果相对较好。

表3 酵母细胞壁多糖对白细胞吞噬活性的影响

2.4 酵母细胞壁多糖对异育银鲫抗应激能力的影响 由表4、5、6所示结果可知，与对照组相比，添加酵母细胞壁多糖各组异育银鲫在3种应激状态下的死亡率均略低于对照组，无显著差异（P＞0.05），但呈现出随多糖添加量的增加死亡率下降的趋势。

表4 酵母细胞壁多糖对异育银鲫抗低氧能力的影响

表5 酵母细胞壁多糖对异育银鲫抗运输能力的影响

表6 酵母细胞壁多糖对异育银鲫抗干旱能力的影响

3 讨论

本试验结果显示，添加酵母细胞壁多糖能够在一定程度上提高溶菌酶活性和白细胞吞噬活性，说明添加酵母细胞壁多糖可提高异育银鲫的非特异性免疫力。汪成竹等（2008）在饲料中添加酵母细胞壁多糖时，斑点叉尾鮰白细胞吞噬活性和溶菌酶的活性均显著高于空白对照组。刘勇等（2007）在饲料中添加酵母细胞壁多糖后，试验结果显示河鲫鱼血液中白细胞吞噬活性、血清和体表黏液的溶菌酶活性都有明显提高。严晶等（2009）在日粮添加酵母细胞壁多糖，结果显示添加酵母细胞壁多糖可促进斑点叉尾鮰免疫器官的发育，并通过提高白细胞吞噬活性来增强机体的非特异性免疫力。

本试验结果表明，在试验第10天，试验组和对照组的非特异性免疫机能无显著差异，第25天和第40天时试验组溶菌酶活性和白细胞吞噬活性有所提高。说明通过口服途径使用酵母细胞壁多糖需经过一段时间才能起到免疫刺激作用。这一试验结果与李桂峰等（2003）的研究结果一致。

试验中添加0.5‰的酵母细胞壁多糖能够显著促进异育银鲫的生长，同时随着添加量的增加，异育银鲫在低氧、长途运输和干旱条件下的死亡率也有所降低。酵母细胞壁多糖通过提高鱼类的免疫保护力，而增强机体抗应激能力，减少鱼类死亡率，继而提高鱼类存活率、生长速度及饲料效率。前人的研究报告中，刘倩等（2012）在凡纳滨对虾饲料中添加不同浓度的β-葡聚糖，结果显示各试验组特定生长率（SGR）均显著高于对照组。屈亮等（2012）在草鱼饲料中适当添加酵母细胞壁多糖，结果显示，试验组的饵料系数显著低于对照组，生长性能得到明显提高。李海燕等（2004）研究发现，在饲料中添加酵母细胞壁多糖对提高丰产鲫的体长和体重有比较显著的效果。

4 结论

酵母细胞壁多糖具有提高机体非特异性免疫力、抗应激能力和促进生长的作用，作为免疫增强剂，能够很好的改善水产品的健康养殖现状，在疾病高发、应激源多样化的现代水产养殖业中具有十分广阔的应用前景。

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