308 nm准分子激光治疗对白癜风患者外周血Th1及Th2细胞因子的影响※

李建英 刘津民 曹海育 张玉红 刘英权

(河北省石家庄市第一医院皮肤科，河北 石家庄 050011)

现代医药

308 nm准分子激光治疗对白癜风患者外周血Th1及Th2细胞因子的影响※

李建英 刘津民 曹海育 张玉红1刘英权

(河北省石家庄市第一医院皮肤科，河北 石家庄 050011)

目的研究308 nm准分子激光对白癜风患者外周血Th1型细胞因子干扰素γ(IFN-γ)和Th2型细胞因子白细胞介素-4(IL-4)水平的影响，探讨其可能的作用机制。方法50例白癜风患者均采用308 nm准分子激光治疗，每周2次共治疗24次。采用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测50例白癜风患者治疗前、后及20 例正常健康者外周血IFN-γ及IL-4的水平，并统计临床疗效。结果治疗组治疗前IFN-γ水平较正常对照组升高，比较差异有统计学意义(P<0.05)；治疗后较治疗前明显降低(P<0.05)，且与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组治疗前IL-4水平与正常对照组及本组治疗后比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论白癜风患者体内Th1型细胞因子占优势，308 nm准分子激光可恢复白癜风患者Th1及Th2的平衡状态。

白癜风；激光，准分子；干扰素Ⅱ型；白细胞介素 4

白癜风是以黑素细胞特异性损伤为病理特征的疾病，临床治疗较为困难，其发病机制尚不清楚，近年来认为白癜风色素脱失的机制与免疫异常有密切关系，认为是一种自身免疫疾病。308 nm 准分子激光是目前治疗白癜风较为有效的方法。本研究采用308 nm 准分子激光治疗50例白癜风，检测其对白癜风患者外周血Th1型细胞因子干扰素γ(IFN-γ)和Th2型细胞因子白细胞介素-4(IL-4)水平，以探讨其可能的作用机制。

1 资料与方法

1.1 一般资料 将50例2008—2012年于我院皮肤科科门诊就诊的寻常型进展期白癜风患者设为治疗组，男30例，女20例；年龄16～65岁，平均(39.2±6.5)岁；病程8 d～30年，平均(17.1±2.4)年；局限型20例，散发型12例，泛发型5例，肢端型13例；皮损分布于面、颈、肩、腰、背、腿、手足等部位。所有患者近1个月内未接受过皮质类固醇激素、紫外线、光感药物治疗，也未接受其他系统药物治疗。同时选择本院体检健康者20例为正常对照组，男12例，女8例；年龄16～62岁，平均(40.3±5.4)岁。2组年龄、性别比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 诊断标准 依据中国中西医结合学会皮肤性病专业委员会色素病学组2003年修订的“白癜风临床分型及疗效标准”[1]确诊。

1.3 治疗方法 所有白癜风患者均采用308 nm准分子激光(日本希兰，型号0755-21356707)治疗，初始剂量为100 mJ/cm2，首次治疗后根据皮肤反应调整剂量，308 nm 准分子激光最小红斑量(MED)测定及剂量选择按文献[2]进行，每周2次，共治疗24次。

1.4 检测指标及方法 所有患者均于治疗前、治疗结束当日晨8：00空腹采外周静脉血3 mL，静置2 h，分离血清，置于-70 ℃冰箱内备检。IFN-γ及IL-4试剂由美国TPI公司生产，购自北京晶美生物工程有限公司，采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定IFN-γ及IL-4，严格按照试剂盒说明步骤进行。用美国Bio-Rad公司550型450 nm波长酶标仪在450 nm处测定各标本光密度(OD)值。以OD值为纵坐标，以标准品浓度为横坐标，根据标准曲线测定各样品IL-4及IFN-γ含量。正常对照组于治疗前进行检测。

1.5 疗效标准 痊愈：白斑全部消退，恢复正常肤色；显效：白斑部分消退或缩小，恢复正常肤色的面积占皮损面积≥50%；好转：白斑部分消退或缩小；无效：白斑无色素再生或范围扩大[1]。

2 结 果

2.1 治疗组临床疗效 治疗组50例，痊愈8例，显效22例，好转20例，显效率60%，总有效率100%。

2.2 治疗组与正常对照组IFN-γ及IL-4水平比较 见表1。

表1 治疗组与正常对照组IFN-γ及

IL-4水平比较

治疗组(n=50)治疗前治疗后对照组(n=20)IFN-γ76．18±28．35133．18±26．14∗86．18±18．37△IL-485．23±13．1099．10±24．3594．89±22．89

与正常对照组比较，*P<0.05；与本组治疗前比较，△P<0.05

由表1可见，治疗组治疗前IFN-γ水平较正常对照组升高，比较差异有统计学意义(P<0.05)；治疗后较治疗前明显降低(P<0.05)，且与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组治疗前IL-4水平与正常对照组及治疗后比较差异均无统计学意义(P>0.05)。

3 讨 论

近年来更多研究表明，白癜风与自身免疫，尤其是细胞免疫功能紊乱密切相关[3]。不同的细胞因子、抗原呈递细胞及不同的抗原剂量等环境因素作用下，Th0细胞可分别向Th1或Th2细胞分化，Th1细胞和Th2细胞在行使功能时存在不均一性。Th1细胞主要分泌IL-2、IFN-γ、IL-12、肿瘤坏死因子(TNF)-α和TNF-β，称为Th1型细胞因子，并介导细胞免疫，如激活细胞毒性T细胞(CTL)和巨噬细胞，诱导迟发型超敏反应(DTH)，Th2细胞主要分泌IL-4、IL-5、IL-6、IL-9、IL-10和IL-13等，介导体液免疫，如激活B细胞和嗜酸性粒细胞[4]，在变态反应中起主要作用[5]。Th1细胞和Th2细胞的相互平衡与否直接影响机体的免疫功能，且与疾病状态密切相关。 本研究显示，白癜风患者IFN-γ水平较正常人升高(P<0.05)，IL-4水平正常(P>0.05)，说明其T细胞亚群失衡，细胞免疫功能异常可能参与了白癜风的发病过程。IFN-γ是最早发现的细胞因子，可加强黑素细胞细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达，ICAM-1可促进白细胞与黑素细胞黏附，进而引起黑素细胞的破坏。IFN-γ还是一种诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的诱导因子，其通过产生大量一氧化氮(NO)引起黑素细胞自身破坏并导致皮肤色素脱失。

308 nm准分子激光治疗白癜风机制尚不明了，推测可能为：①诱导皮损处病理性T淋巴细胞凋亡；②刺激黑素细胞增生，促进黑素生成。而前者被认为是最重要的治疗机制之一[5]。本研究发现，白癜风患者在进行308 nm准分子激光治疗后血清IFN-γ水平较治疗前明显降低(P<0.05)，说明308 nm准分子激光可通过降低血清IFN-γ水平调节白癜风患者的免疫反应，使黑素细胞能逐渐恢复，从而达到治疗的目的。

综上所述，白癜风患者Th1/Th2平衡被打破，Th1型细胞因子占优势，这说明Th1型细胞因子主要参与了白癜风的发病过程，而308 nm准分子激光治疗能使Th1/Th2恢复平衡状态，此结论为308 nm准分子激光治疗白癜风提供了新的证据。

[1] 中国中西医结合学会皮肤性病专业委员会色素病学组.白癜风临床分型及疗效标准(2003年修订稿)[J].中国中西医结合皮肤性病学杂志，2004，3(1)：65.

[2] 杨慧兰，刘仲荣，李雪梅，等.308nm准分子激光治疗白癜风临床研究[J].中华皮肤科杂志，2006，39(1)：35-37.

[3] Barona MI，Arrunátegui A，Falabella R.An epidemiologic case-control study in a population with vitiligo[J].J Am Acad Demar tol，1995，33(4)：621-625.

[4] Singh VK，Mehrotra S，Agarwal SS.The paradigm of Th1 and Th2 Cytokines：its relevance to autoimmunity and allergy[J].Immunol Res，1999，20(2)：147-161.

[5] Spencer JM，Nossa R，Ajmeri J.Treatment of vitiligo with the308-nm excimer laser：a pilot study[J].J Am Acad Dermatol，2002，46(5)：727-731.

(本文编辑：曹志娟)

Effectof308nmexcimerlasertherapyonTh1/Th2cytokinesinperipheralbloodofpatientswithvitiligo

LIJianying，LIUJinmin，CAOHaiyu，etal.

DepartmentofDermatology，TheFirstHospitalofShijiazhuanginHebeiProvince，Hebei，Shijiazhuang050000

ObjectiveTo study the level of Th1 cytokine(IFN-γ) and Th2 cytokine (IL-4) in peripheral blood of patients with vitiligo， and to explore the possible immune mechanism of 308nm excimer laser for vitiligo therapy.Methods50 cases of vitiligo were treated by 308nm excimer laser therapy， twice a week for 24 times.The level of IFN-γ and IL-4 in peripheral blood from 50 vitiligo patients before and after treatment and 20 healthy person in control group were measured by enzyme linked immunosorbent assay.ResultsThere was no difference between two groups on the level of IL-4 (P> 0.05).The level of IFN-γin vitiligo patients was higher than that in the control group (P<0.05); After 308nm excimer laser therapy the level of IFN-γ in vitiligo patients was discreased significanlty (P<0.05).There was no significant difference between two groups after treatment (P>0.05).ConclusionTh1 cytokine take advantage of vitiligo patients and involved in the pathogenesis of vitiligo.308nm excimer laser therapy can restore the Th1/Th2 balance.

Vitiligo; Laser; Excimer; Interferon-γ；Interleukin-4

※ 项目来源：2012年河北省科学技术研究与发展计划项目(编号：12277724)

1 河北省石家庄市第一医院理疗科，河北 石家庄 050011

李建英(1977—)，女，主治医师，硕士。从事皮肤科临床工作。

R758.410.5；R454.21

A

1002-2619(2014)03-0479-02

2013-08-09)