乳腺癌患者手术前后血清IL-6、IL-8和VEGF-A水平变化及临床意义

陈 坤, 王晓刚, 李狄航, 孔 勇

(广西壮族自治区桂东人民医院, 1. 腺体外科; 2. 检验科, 广西 梧州, 543001)

乳腺癌通常发生于乳腺腺上皮组织，是女性常见的恶性肿瘤之一。据世界卫生组织报道，2011年全球范围内因乳腺癌死亡病例约50万[1]。在中国，乳腺癌的发病率和死亡率呈逐年增长趋势，其中发病率城市地区年龄标化率(ASR)为每10万女性34.3例[2]。临床上治疗乳腺癌以手术为主，但由于乳腺癌癌细胞易脱落游离，随血液或淋巴液扩散至全身而形成远端转移，因此早期诊断对疾病预后尤为重要。近年来研究发现，白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)等炎症因子在肿瘤细胞形成和分化中扮演着重要作用[3]。另一方面，肿瘤标志物譬如血管内皮生长因子-A(VEGF-A)的高表达与肿瘤细胞的增殖和转移关系密切。本研究通过观察乳腺癌患者手术前后血清IL-6、IL-8和VEGF-A水平变化，探讨其临床意义，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2012年12月—2013年12月在本院就诊的乳腺癌患者42例为观察组，均为女性，年龄29～67岁，平均(51.5±10.6)岁。患者均经术前体格、影像学和术后组织病理学检查确定为乳腺癌，且就诊前未接受任何放、化疗或内分泌治疗。根据中国抗癌协会《乳腺癌诊治指南与规范(2011版)》[4]分类：原位癌2例，浸润性导管癌40例；根据国际抗癌联盟TNM分期: Ⅰ期10例, Ⅱ期18例, Ⅲ期14例；其中伴淋巴结转移18例，无转移24例。选取同期体检的健康女性30例为对照组，年龄28～65岁，平均(50.9±11.5)岁。2组年龄分布比较，差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2 方法

1.2.1 治疗方法：观察组患者经全面检查无手术禁忌证，均在气管插管全麻或高位硬膜外麻下实施改良乳腺癌根治术或者保乳手术，其中保乳手术患者的适应证包括: ① 单发肿瘤且直径≤3 cm; ② 肿瘤边缘距乳晕≥2 cm; ③ 腋窝未触及肿大淋巴结；患者术后均静脉置管以促进康复。

1.2.2 检测方法：抽取健康体检女性和乳腺癌患者术前3 d及术后7 d 时清晨空腹状态下静脉血3 mL置于洁净试管中, 3 000 r/min离心5～10 min, 取上层血清约1 mL, -70 ℃冰冻保存备检。运用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中IL-6和IL-8水平, ELISA试剂盒购自上海酶联生物科技有限公司；采用ELISA 检测VEGF-A水平，试剂盒购自上海依科赛生物制品有限公司，酶标仪购自美国MD公司。所有操作严格按照各自说明书进行，测定样品OD值并结合浓度曲线计算相应浓度。

1.3 观察指标

观察2组患者术前3 d和术后7 d 时血清IL-6、IL-8和VEGF-A水平。

2 结 果

2.1 观察组手术结果

42例患者中行改良乳腺癌根治术22例，保乳手术20例，包括象限切除术9例，区段切除术11例。35例行腋窝淋巴结清扫，清扫范围为Ⅰ、Ⅱ级水平淋巴结。2例乳腺导管内原位癌患者未进行淋巴结清扫。42例患者均成功完成手术治疗并接受术后康复治疗。

2.2 2组患者手术前后血清IL-6、IL-8和VEGF-A水平变化

不同分期乳腺癌患者手术前3 d血清IL-6、IL-8和VEGF-A水平均显著高于对照组相应指标水平(P<0.01); 手术后7 d, 不同分期乳腺癌患者血清IL-6、IL-8和VEGF-A水平较手术前3 d均显著下降(P<0.05或P<0.01)。不同组别间方差分析显示，不同分期乳腺癌患者血清IL-6、IL-8和VEGF-A水平差异均具有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 对照组和乳腺癌患者手术前后IL-6、IL-8和VEGF-A水平变化

与对照组比较，**P<0.01; 与同期患者术前比较，#P<0.05, ##P<0.01。

3 讨 论

乳腺癌形成过程相对复杂，其发生发展受多重因素影响，包括细胞增殖和凋亡紊乱，以及肿瘤周围微血管形成。有研究发现，肿瘤细胞增殖和凋亡与某些细胞因子关系密切。IL-6是一种多功能细胞因子，主要由淋巴细胞，激活的巨噬细胞和血管内皮细胞产生，能够调节T淋巴细胞、B淋巴细胞核、单核巨噬细胞的免疫活性，具有广泛的生物学活性[5]。在抗肿瘤生成方面, IL-6通过干预肿瘤细胞黏附和活动度、肿瘤特异性抗原表达和细胞增殖等，达到影响疾病进展的目的[6]。而IL-8作为一种趋化因子(CXC), 其通过与人CXC趋化因子受体1(CXCR1)和趋化因子受体2(CXCR2)结合来发挥生物学效应。相关研究[7]显示，受体CXCR1和CXCR2可能存在与某些癌细胞以及新生的血管内皮细胞中，当IL-8与该受体结合后，能促进癌细胞增殖和血管生长。因此，癌症患者体内IL-6 和IL-8表达升高，不但促进肿瘤细胞的增殖，还加剧了机体免疫功能的抑制，预示着肿瘤进展和转移。

本研究中，术前乳腺癌患者血清中IL-6和IL-8水平均较正常体检者显著增高，差异具有统计学意义(P<0.01), 而手术治疗后，各临床分期乳腺癌患者的IL-6和IL-8水平均显著下降(P<0.05或P<0.01)。同时，不同临床分期患者间比较, IL-6和IL-8水平均具有显著差异(P<0.05), 证实肿瘤疾病进展和转移与IL-6和IL-8表达上调之间关系密切。Dethlefsen等[8]通过研究发现, IL-6高表达往往预示着乳腺癌患者预后不良，李明等[9]也发现，乳腺癌患者临床分期与IL-6和IL-8水平呈正相关。此外，相关研究[10]还显示, IL-8高表达与乳腺癌转移能力呈正相关，可以加速临床进程，对乳腺癌复发患者具有独立预后意义。

除了免疫抑制，实体瘤发生、发展的另一关键步骤是血管和淋巴管新生，而VEGF与其关系密切。VEGF受体包括VEGF-1、VEGF-2和VEGF-3, VEGF-A则主要通过与VEGF-1和VEGF-2受体结合来促进血管新生和增加血管通透性[11-12]。张瑰红等[13]运用TaqMan realtime反转录聚合酶链反应分别检测乳腺癌和乳腺良性病变患者VEGF-A mRNA的表达，发现VEGF-A mRNA在乳腺癌高表达，这与本研究中各个分期乳腺癌患者VEGF-A水平较正常体检者显著增高的结论相似。此外，胡帅尔等[14]通过免疫组化的方法观察乳腺癌组织中VEGF-A与癌细胞增殖、微血管密度和淋巴结转移的关系，发现增殖细胞抗原表达和微血管密度随VEGF-A表达增强，肿瘤细胞增殖活性也随之增强。

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