自体骨髓干细胞移植治疗血栓闭塞性脉管炎效果观察

王茂华，孙 岩，吴学君，金 星，张精勇

血栓闭塞性脉管炎是血管外科难治疾病，可引发严重下肢缺血，最终导致截肢甚至威胁患者生命［1］。有研究证明自体骨髓干细胞移植术可促进局部血管形成，帮助侧支循环建立［2-3］。山东大学附属省立医院血管外科2004年9月—2012年12月采用自体骨髓干细胞移植治疗血栓闭塞性脉管炎9例，效果满意，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 本组9例，均为男性，年龄32～53岁，平均40岁;共9条患肢，其中左下肢4例，右下肢5例;病程1个月～9年。均采用Shionoya提出的临床标准［4］明确诊断。患者均伴疼痛，不伴高血压病、糖尿病及冠心病等疾病，均有吸烟史。术前间歇性跛行距离20～500(346±196)m，踝肱指数(ABI)0 ～0．51(0．27 ±0．20);伴足部溃疡 2 例，溃疡面积:1例 0．5 cm ×0．5 cm，另 1例 2．0 cm ×2．0 cm。术前均行彩色多普勒超声及螺旋CT动脉造影(CTA)检查，9条患肢动脉远端流出道条件均较差，药物治疗效果差［5］，且无法行介入及动脉旁路移植治疗。

1.2 自体骨髓干细胞的制备及移植 建立静脉通路，对患者严密监护，局部麻醉下经双侧髂后上棘穿刺抽取骨髓血250～400 ml，采用人淋巴细胞分离液经密度梯度离心法［6］提取出单个核细胞，用0．9%氯化钠注射液稀释成100～200 ml的悬液备用。在连续硬膜外麻醉或腰麻下，患肢缺血处肌内注射，将提取出的自体骨髓干细胞悬液沿下肢动脉走行进行多点注射，每针注射位置间隔1～2 cm，每次注射0.5～1．0 ml，注射深度根据皮下脂肪厚度决定，一般为1．0 ～1．5 cm。

1.3 观察指标 移植治疗3个月后观察以下指标的变化:①疼痛缓解情况:采用视觉模拟评分(visual analogue scale，VAS)法［7］进行评定;②间歇性跛行距离:为患者从开始行走至因肢体疼痛严重而无法行走的距离［8］;③溃疡愈合情况:比较术前、术后足部溃疡面积;④ABI:于25℃环境下休息30 min后采用无创血管检查仪(SciMed公司，美国)检测ABI。

1.4 统计学方法 应用SPSS 11．5软件进行统计学分析，试验数据以均数±标准差(±s)表示，采用t检验，α=0．05为检验水准。

2 结果

本组术后随诊6～24个月，平均12个月。移植治疗3个月后，疼痛缓解8例，9例VAS评分由术前(7．89 ±1．36)分降至(2．11 ±2．20)分，差异有统计学意义(P＜0．05);间歇性跛行距离为500～5000(2278±1460)m，较术前明显延长(P ＜0．05);ABI为0．30 ～0．92(0．63 ±0．21)，较术前明显升高(P ＜0．05);2例足部溃疡得到改善，1例溃疡完全愈合，另1例溃疡面积缩小至0．5 cm×0．5 cm。随访期间患者症状及ABI均无恶化，无不良反应发生。

3 讨论

血栓闭塞性脉管炎是一种累及中小血管的炎症性、闭塞性和周期发作的慢性病变，主要侵犯四肢远端的中小动静脉，目前认为吸烟与该病的发病密切相关［9-10］，但确切病因尚不清楚［11］。

血栓闭塞性脉管炎是一种难治性疾病，究其原因为肢体动脉闭塞位置多在动脉末端，动脉重建手术及介入治疗机会少［12］，并且仅靠药物来改善肢体血液循环效果不明显［13］。随着细胞生物学及分子生物学的发展，治疗性血管生成的概念应运而生。目前国内外已有大量应用自体骨髓干细胞移植治疗心肌梗死、中枢神经系统疾病的报道［14-15］，均获得满意效果。骨髓干细胞可分化为血管内皮细胞，并可进一步分化形成新生毛细血管［16］，自体骨髓干细胞移植正是利用这一原理将自体骨髓干细胞移植到缺血的肢体肌肉中，以达到恢复患肢血供的目的。骨髓干细胞也可分泌出一系列细胞因子等诱导其分化、形成新生毛细血管，改善和恢复缺血肢体的血流。

自体骨髓干细胞移植在临床应用中一定要严格无菌操作，否则不但会导致治疗无效，还会造成感染加重病情。对于一些适用于行介入及动脉旁路移植的患者，笔者认为应首选介入及手术治疗，因为这样能直接恢复血流。自体骨髓干细胞移植治疗血栓闭塞性脉管炎在短期内是有效的。本组4例术后第1天肢体疼痛即得到缓解，笔者认为此表现很可能系移植的骨髓干细胞对局部组织的早期反应所致，因为一般自体骨髓干细胞自分化、增殖至最后形成新生血管大约需要1个月，所以在此后进行疗效评定才具有临床意义。本研究术后3个月的观察指标显示，自体骨髓干细胞移植对于不适于行介入及动脉旁路移植治疗且药物治疗效果差的血栓闭塞性脉管炎患者，具有更重要的意义。

总之，自体骨髓干细胞移植对血栓闭塞性脉管炎是一种安全的治疗方法，并且操作简单，适于在基层医院推广。该方法近、中期疗效确切，能改善患肢症状及ABI，并可促进溃疡愈合，但远期疗效尚需更大样本量的研究观察。

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