多年来,果蔬中农药残留超标的情况一直较为突出,农药中毒事件常有报道。究其原因,一是农户不按规定的用药量、次数、方法或安全间隔期施药,或施用不允许在蔬菜上使用的剧毒、高毒农药;二是现在标准施行的农药残留测定需要通过有机溶剂提取、净化和用大型分析仪器进行,无法对廉价的蔬菜进行随时随地或快速的检测而形成的监管不到位。加强对农户的宣传指导和建立适合我国国情的、规范化的农药残留快速检测方法,是解决问题的关键所在。
近日,美国《科学公共图书馆·综合》在线报道了乙酰胆碱酯酶酵母表面展示系统的构建及其在有机磷和氨基甲酸酯类农药残留快速检测中的应用。该成果由中科院上海生科院营养所王慧研究组完成,系统核心技术已获中国发明专利授权,研发的检测试剂盒即将在上海开展示范应用。
有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂是我国使用的主要农药品种之一,也是造成农产品污染最严重的农药品种之一。酶抑制法是有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂最常用的快检方法。目前主要使用的检测酶类为乙酰胆碱酯酶,但其稳定性不足且价格昂贵。
王慧研究组构建了乙酰胆碱酯酶的酵母表面展示系统。表达在酵母表面的重组乙酰胆碱酯酶表现出高活性,在酶抑制法检测分析中较市售乙酰胆碱酯酶的灵敏度更高。同时,用酵母细胞作为酶固定化载体,避免了游离酶性质不稳定、极易失活等缺点,也可使后续酶的分离纯化过程更为简易,显著降低成本。