自体外周血干细胞移植治疗急性心肌梗死的随访观察

崔丽杰，李占全，朱芳，段娜

论著·临床

自体外周血干细胞移植治疗急性心肌梗死的随访观察

崔丽杰，李占全，朱芳，段娜

目的观察经皮经腔冠状动脉内移植自体外周血干细胞(PBSC)治疗急性心肌梗死(AMI)的随访情况。方法AMI患者70例，分为干细胞移植组和对照组各35例，干细胞移植组在常规急性心肌梗死治疗(药物与介入治疗)基础上加用粒细胞集落刺激因子(G-CSF)皮下注射动员自体骨髄干细胞，连续5 d，第6天分离外周血干细胞悬液，将采集后的干细胞悬液经overthe wire球囊导管中心腔注入梗死相关动脉(IRA),进行外周血干细胞移植；对照组反给予常规方法(药物与介入)治疗。2组患者在移植前及移植后5.2年(4.8～5.5年)应用超声心动图评价左室形态及心功能变化、室壁节段性运动积分、生存率及心脏事件发生率，并进行比较。结果随访5.2年，干细胞移植组完成随访30例，对照组28例。2组均无死亡病例，对照组因急性左心衰住院6例(21.4%)，高于移植组1例(3.3%)(P<0.05)。干细胞移植组左室射血分数(LVEF)由(50.0±8.2)%升高至(56.0±8.9)%(P<0.05)，左室壁节段性运动积分指数WMSI由(1.219±0.190)下降至(1.111±0.108)(P<0.05)，左室收缩末容积(LVESV)由(63.8±24.9)ml减少至(53.1±24.6)ml(P<0.05)，左室舒张末容积(LVEDV)无显著性变化，由(134.2±36.7)ml降至(119.2±30.3)ml(P>0.05) 。对照组介入术前及术后5.2年LVEF、WMSI、EDV及ESV均无显著性变化。结论经皮经腔冠状动脉内移植自体外周血干细胞治疗AMI可减轻左室重构，改善心功能。

心肌梗死，急性；外周血干细胞；心功能；移植

急性心肌梗死(AMI)是严重危害人类健康的一类疾病，对该疾病的治疗，现有的治疗手段相对有限，无法从根本上恢复心肌细胞数量，进而心肌梗死后心功能不全成为困扰人们的一大难题，因此干细胞移植治疗逐渐成为心血管领域治疗领域探索的热点[1]。本文对早期自体外周血干细胞移植患者进行长期随访观察，探索其长期疗效。

1 资料与方法

1.1 临床资料 我院2003年11月—2005年1月收治疗AMI患者70例，AMI的诊断标准：必须至少具备下列3条标准中的2条：(1)缺血性胸痛的临床病史：胸痛时间≥30 min；(2)心电图的动态演变：相关导联ST段抬高≥0.05 mv；(3)心肌坏死的血清心肌标志物浓度的动态改变：肌酸激酶同工酶(CK-MB)及肌钙蛋白(T或I)升高。入选标准：(1)年龄<75岁；(2)心肌梗死时间<30 d；(3)患者知情同意。排除标准：(1)不能行经皮经腔冠状动脉血管成形术；(2)既往或当前的肿瘤病史或其他可能影响短期存活的致死性疾病；(3)年龄≥75岁；(4)贫血及凝血功能障碍；(5)活动性感染；(6)骨组织接受过异常射线照射；(7)原发性溶血性疾病；(8)当时存在血流动力学不稳定、休克；(9)调查者判断患者处于危险状态。70例患者随机分成自体外周血干细胞移植组35例和常规治疗组(对照组)35例。2组基线资料情况差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性，见表1。本研究结果经辽宁省人民医院伦理委员会批准，全部患者均签署知情同意书。

表1 2组之间基线情况比较

1.2 治疗方法 (1)对照组：给予常规治疗方法，药物治疗包括阿司匹林、氯吡格雷、硝酸酯类药物、β-受体阻滞剂、血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)或血管紧张素II受体阻滞剂(ARB)以及他汀类调脂药物。介入治疗：冠状动脉造影术或支架植入术。(2)移植组：给予常规治疗及自体外周血干细胞移植治疗。干细胞动员及采集方法：入选后给予包涵体G-CSF(麒麟鲲鹏生物制药有限公司生产，300 μg/支)，300～600 μg/d

1.3 检测指标 应用PHILIPsonos-7500彩色多普勒超声仪,探头频率2～4 Hz，于干细胞移植术前及术后4.8～5.5年检查，以评价左室形态、心功能、室壁节段性运动积分的改变。包括左室舒张末期容积(LVEDV)、左室收缩末期容积(LVESV)、左室射血分数(LVEF)及室壁运动积分(WMSI)。所有测量指标均取3个连续心动周期的平均值，LVEF测量采用双平面Simpson法，并观察心脏不良事件发生情况。

1.4 统计学方法 应用SPSS 15.0统计软件进行分析。计量资料以均数±标准差表示，组内治疗前后比较采用配对t检验，组间分析采用t检验，计数资料以率表示，采用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 随访情况 2组随访4.8～5.5年，移植组完成随访30人，对照组完成随访28人，失访患者均因电话及信函联系不到而失访。无死亡病例发生，心脏事件发生情况。见表2。

表2 2组5.2年随访发生心脏事件比较 [例(%)]

注：与对照组比较，aP<0.05

2.2 心脏超声心动图比较 随访5.2年，移植组LVEF显著提高，WMSI及ESV明显降低， EDV无显著变化。对照组EF、WMSI、EDV及ESV均无显著性变化，见表3。

3 讨 论

传统观念认为心肌细胞缺乏增殖分化能力,心肌梗死后细胞不能再生,只能由成纤维细胞填充，最终为瘢痕组织替代，并逐渐发生左室重构，进而发生顽固性心衰而死亡，这也是困扰心血管领域AMI治疗的一大难题。Orlic等[2]于2001年首次将自体骨髄干细胞用于小鼠急性心肌梗死和心力衰竭的治疗，证实骨髄干细胞可促进心肌再生，改善血供和心功能，降低病死率。此后更多动物试验及临床研究显示了干细胞移植在心血管领域独特的优势。近10余年来动物及人类心脏的临床研究发现应用干细胞移植可能促进心肌再生及建立新的血管来改善血供，改善心功能[3～5]，从而干细胞移植治疗AMI成为AMI领域探索的热点。

表3 不同阶段超声检测指标的比较

注：与治疗前比较，aP<0.05；与对照组治疗后比较，bP<0.05

近年来仍不断有研究证实自体干细胞，包括自体骨髓干细胞及自体外周血干细胞移植治疗AMI的有效性及安全性。Wang等[6]对小型猪急性心肌梗死模型后经导管行多潜能祖细胞(MPC)移植后，发现心肌内皮细胞生长因子增加，抗缺氧能力增强。Lee等[7]对AMI患者急性期行骨髓干细胞移植，发现急性心肌梗死急性期自体骨髓干细胞移植是安全的，且随访6个月发现左室射血分数提高，心功能改善。近年来，在干细胞移植治疗AMI方面的长期随访结果也有报道。Assmus等[8]对101例AMI患者行自体骨髓干细胞移植，一共随访5年，发现心脏事件显著减少，心脏射血分数提高，而作为心力衰竭的血浆标记物，脑利钠肽(BNP)值监测，在移植组较对照组有显著差异，移植组BNP值显著降低，也间接说明干细胞移植组心功能的改善。Wöhrle等[9]对42例AMI患者1周后行骨髓干细胞移植，随访3年发现左室射血分数较对照组明显升高。本试验经过5年随访，治疗前后比较，发现移植组ESV降低，WMSI降低，LVEF升高，因心力衰竭再住院率也显著降低，而对照组无上述显著改变，这也说明对急性心肌梗死患者，自行外周血干细胞移植后心功能显著改善，左室重构减轻，也与其他临床试验[10]报道相符合。因此，上述研究的长期随访结果更进一步支持干细胞移植在急性心肌梗死治疗领域具有广泛的前景。

临床研究证实冠状动脉内移植自体干细胞移植治疗AMI是安全的，无论短期随访还是长期观察，并且移植组较对照组均有显著的临床获益，心脏不良事件减少，左室重构减轻，心功能改善，但对其移植后的机制还没有确切的结论，还需要更进一步的基础研究验证其具体作用机制，为干细胞移植治疗心血管领域疾病提供理论支持。

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2 Orlic D,Kajstura J,Chimenti S,et al.Mobilized bone marrow cells repair the infracted heart,improving function and survival[J].Proc Natl Acad Sci USA,2001,98(8):10344-10349.

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9 Wöhrle J，von Scheidt F,Schauwecker P，et al.Impact of cell number and microvascular obstruction in patients with bone-marrow derived cell therapy:final results from the randomized,double-blind,placebo controlled intracoronary stem cell therapy in patients with acute myocardial infarction(SCAMI)trial[J].Clin Res Cardiol,2013,102(10):765-770.

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Thelongperiodobservationofautologousperipheralbloodstemcelltransplantationbyintracoronaryinfusioninpatientswithacutemyocardialinfarction

CUILijie,LIZhanquan,ZHUFang,DUANNa.

DepartmentofCardiology,Liao-ningProvincePeople'sHospital，Shenyang110016,China

ObjectiveTo observe the effect of percutaneous intracoronary transplantation of autologous peripheral blood stem cell (PBSC) on treatment of acute myocardial infarction (AMI).MethodsSeventy cases of AMI were divided into transplantation group and control group with 35 cases in each group, stem cell transplantation group underwent the conventional therapy for acute myocardial infarction (drug and interventional therapy) combined with granulocyte colony-stimulating factor (G-CSF) subcutaneous injection of mobilization of autologous bone marrow stem cells last for 5 days, suspense separated peripheral blood stem cells at the sixth days, over the wire balloon catheter center cavity, stem cell suspension was injected into the infarct related artery (IRA), peripheral blood stem cell transplantation were performed; the control group treated with routine method (anti-drug and interventional) treatment. During 5.2 years before and after transplantation (4.8-5.5 years), echocardiography was performed to evaluate left ventricular configuration and function of segmental ventricular wall motion score, survival rate and cardiac events between the 2 groups of patients.ResultsFollow-up was last for 5.2 years, stem cell transplantation group were 30 cases, 28 cases in the control group. The 2 groups had no death cases, the control group had 6 cases (21.4%) of acute left heart failure, higher than the transplantation group of 1 cases (3.3%,P<0.05). Stem cell transplantation group’s left ventricular ejection fraction (LVEF) was increased from (50.0±8.2)% to (56.0±8.9)% (P<0.05), left ventricular wall motion score index(WMSI) was decreased from (1.219±0.190) to (1.111±0.108) (P<0.05). End systolic volume (LVESV) was decreased from (63.8±24.9) ml to (53.1±24.6) ml (P<0.05), End diastolic volume (LVEDV) had no significant change from (134.2±36.7) ml to (119.2±30.3) ml (P>0.05). LVEF, WMSI, EDV and ESV showed no significant changes in the control group intervention before and after 5.2 years of follow-up.ConclusionIt demonstrated that the percutaneous intracoronary transplantation of autologous peripheral blood stem cell for the treatment of AMI can relieve ventricular remodeling and improve heart function.

Myocardial infarction,acute; Peripheral blood stem cell; Heart function; Transplantation

110016 辽宁省人民医院心内科

10.3969 / j.issn.1671-6450.2014.09.004

2014-07-14)