高效液相法检测食品中黄曲霉毒素含量

李迎梅 孙晓红 刘彤 邓美荣 赵悦

随着社会的发展, 食品安全问题已成为全社会关注的热点。黄曲霉毒素作为一种致癌物, 已成为食品日常监测工作中的重点。在黄曲霉检测中, 多采用柱后衍生［1］, 而无需衍生的则采用超高效液相色谱［2］,本文采用高效液相色谱法测定食品中黄曲霉毒素的含量, 无需衍生, 操作更加简单。

1 材料与方法

1.1 仪器和试剂 Waters e2695高效液相色谱仪,2475荧光检测器, J2 正压固相萃取, AflaTest免疫亲和柱。黄曲霉毒素标准溶液：B1, G1：1.0 mg/L, B2, G2：0.3 mg/L。甲醇为色谱纯。

1.2 黄曲霉毒素的检测方法 色谱柱：Waters Xbridge C18柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm), 流动相：甲醇 -水(40+60)。流速 1ml/min, 柱温 35℃ , 进样量 10 μl, 运行时间30min。荧光检测器：激发波长：365 nm, 发射波长：455 nm。

1.3 样品前处理方法 称取25 g样品(精确至0.001 g)于250ml具塞锥形瓶中, 加入5 g氯化钠及125ml甲醇-水(7+3)混匀, 超声提取后进行过滤。取15ml滤液加入30ml去离子水稀释。准确吸稀释液15ml缓慢通过免疫亲和柱后, 用10ml去离子水淋洗, 弃去全部淋洗液后用1ml甲醇洗脱, 经0.22 μm滤膜过滤后上机分析。

1.4 色谱分析 分别吸取标准溶液及处理后的样品进行分析, 峰面积外标法定量, 计算样品中黄曲霉毒素的含量。

2 结果

2.1 黄曲霉毒素的色谱图 见图1。

2.2 方法的精密度和回收率 实验结果显示检测限为 B1、G1在 1.5 ng/ml, B2、G2在 0.5 ng/ml。对样品进行高、中、低三个浓度的加标实验, 其加标回收率在72.7%～98.7%之间, 相对标准偏差在5.52%～9.05%。

2.3 样品测定 采用本方法共测定食品100份, 四种黄曲霉毒素均未检出。

图1 标准色谱图

3 讨论

该方法建立了用HPLC检测四种黄曲霉毒素的含量, 该方法操作简单, 测定结果可靠, 能够完成对黄曲霉毒素的检测, 适用于食品中黄曲霉毒素的检测。色谱柱后衍生荧光检测花生中黄曲霉毒素B1, B2, G1,G2.色谱, 2004,22(6):658.

［1］于彦彬,万述伟.OASIS HLB固相萃取-高效液相

［2］蔡志斌,张英.无需衍生-超高效液相色谱法快速测定食品中黄曲霉毒素.中国卫生检验杂志, 2012,23(2):312-315.