四种乙型肝炎病毒表面抗体试剂盒检测人乙型肝炎病毒表面抗体效果比较

张小丽，王瑞玲，宋 娜，王文静，张 翠， 张学东，王冲冲，杨晓莉

四种乙型肝炎病毒表面抗体试剂盒检测人乙型肝炎病毒表面抗体效果比较

张小丽1，王瑞玲1，宋 娜1，王文静1，张 翠1， 张学东2，王冲冲2，杨晓莉1

目的 分析商品化试剂盒检测人乙型肝炎病毒(乙肝)表面抗体(抗-HBs)之间的差异。方法 本院实验标本252份，分别用雅培I2000定量试剂盒、罗氏e601定量试剂盒、安图Auto Lumo A2000定量检测试剂盒和国内主流酶联免疫法定性试剂盒(上海科华)检测人乙肝表面抗体，以假定金标准对各厂家的阴、阳性结果进行比对分析，并对3个定量检测系统进行量值相关性分析。结果 4种乙肝表面抗体试剂与假定金标准相比，灵敏度和特异性都达到了93%以上，其中安图和罗氏的灵敏度和特异性最高，达到了98%以上；罗氏试剂盒的跃登指数(灵敏度+特异性-100%)最高，为99.3%；与金标准比较，3种化学发光试剂盒检测结果无统计学差异(P>0.05)，而酶联免疫法定性试剂盒检测结果有统计学差异(P<0.05)。结论 主流乙肝表面抗体试剂盒在检验乙肝表面抗体时均存在一定的假阳性或假阴性，量值相关性较好，不影响临床应用分析。

表面抗体；金标准；灵敏度；特异性；量值相关性

乙型肝炎病毒表面抗体是由乙肝表面抗原诱导而产生的一种保护性抗体，是人体预防乙肝病毒入侵的有效屏障[1，2]。一般当机体内产生抗-HBs后，就会具有免疫力，不会再感染乙肝病毒[3]。但抗-HBs不会永久存在，而会随着时间等因素逐渐消失。检测抗-HBs主要是用于监测注射乙肝疫苗是否有效及体内抗-HBs含量，还可以作为医师对乙肝患者临床用药及病情的动态监测指标。目前，抗-HBs检测无确认方法，定量检测多采用化学发光法，定性检测多采用酶联免疫法[4]。但同一份标本不同厂家试剂盒检测会出现阴、阳性及量值方面的差异。为此，本研究旨在分析比较四种商品化试剂盒检测人乙肝病毒表面抗体之间的差异，为试剂盒选用提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 一般材料 本院门诊、住院患者的血液标本252份，含肝移植患者样本30份。

1.2 方法

1.2.1 仪器及试剂 分别采用雅培Architect I2000全自动化学发光仪及雅培抗-HBs试剂盒；罗氏生产的e601全自动电化学仪及罗氏抗-HBs试剂盒；安图生物Auto Lumo A2000全自动化学发光仪及安图抗-HBs试剂盒；上海科华酶联免疫乙肝表面抗体定性试剂盒及PHOMO酶免仪；以及各厂家配套的定标液和质控品。

1.2.2 数据分析比较方法 鉴于表面抗体无确认方法，目前采用多家试剂平行检测[5]，本次实验以通用的验证方法为标准：认定3家检测结果相同的为真阳性或真阴性，将其定义为金标准；2家试剂检测结果不同定为可疑，不参与结果统计。

1.3 统计学处理 采用SPSS18.0统计软件，阴、阳性结果分析进行χ2检验，量值相关性统计采用线性回归分析，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 样本检测结果 真阳性共145份，真阴性共104份，可疑样本共3份。

2.2 四种试剂盒的灵敏度、特异性及约登指数分析 雅培Architect I2000全自动化学发光仪抗-HBs试剂盒、罗氏e601全自动电化学仪抗-HBs试剂盒、安图Auto Lumo A2000全自动化学发光仪抗-HBs试剂盒检测结果与金标准比较，差异无统计学意义(P>0.05)；科华试剂盒检测结果与金标准比较，差异有统计学意义(P<0.05)。四种试剂盒与假定金标准检测抗-HBs的对比结果见表1。四种试剂盒的灵敏度、特异性及约登指数见表2。

表1 四种乙肝病毒检测试剂盒与假定金标准检测抗-HBs的对比结果

表2 四种乙肝病毒检测试剂盒的灵敏度、特异性及约登指数 (%)

2.3 量值相关性分析 罗氏检测结果与雅培检测结果的量值有相关性(r=0.8953，图1)；安图检测结果与雅培检测结果的量值有相关性(r=0.9007，图2)；安图检测结果与罗氏检测结果的量值有相关性(r=0.9098，图3)。

图1 罗氏检测结果与雅培检测结果的量值相关性分析

图2 安图检测结果与雅培检测结果的量值相关性分析

图3 安图检测结果与罗氏检测结果的量值相关性分析

3 讨 论

我国是乙肝大国。注射乙肝疫苗是预防乙肝和乙肝流行的重要手段，还可有效降低肝硬化和肝癌的发病率和病死率，因此准确检测乙肝表面抗体的浓度对评估注射疫苗后的免疫效果及临床治疗具有重要的意义。目前，临床上普遍应用化学发光检测系统及酶联免疫系统进行定量和定性分析，但结果在不同检测系统、不同实验室存在一定的差异，其可比性对于临床应用非常重要。

从本实验结果可以看出，4种商品化乙肝表面抗体试剂盒均存在一定差异，与金标准相比，三种化学发光法检测乙肝表面抗体无统计学差异，而酶联免疫法与金标准相比有统计学差异。差异产生的主要原因是不同厂家生产的抗原、抗体试剂的差异导致非特异性反应。化学发光法可通过不同浓度标准品来建立标准曲线，能精确地进行定性定量检测，线性范围宽[6]、灵敏度、特异性强，精密度和准确性均高于酶联免疫法，为接种乙肝疫苗后的机体免疫应答状况，以及乙肝患者治疗后HBsAb浓度动态观察提供可靠的依据。而酶联免疫法方法简单、费用低，但特异性、灵敏度不及化学发光法，无法定量，容易受到HBsAg的影响[7]，只能满足临床对单纯阳性、阴性结果的判断，更适合用于初筛实验。

本研究表明，三种化学发光定量检测试剂盒检测同一份样本量值均存在一定的偏差，与罗氏e601及安图A2000相比，雅培I2000灵敏度相对较低，主要出现在阴阳临界值及低浓度的标本，与文献[8]报道一致。分析导致结果不同的主要原因是，不同的化学发光免疫分析系统由于使用的抗原及抗体、校准品等不同，产生的 HBsAb类型可能有所不同，得到的结果有一定的偏差；笔者对三种化学发光定量检测在线性范围内的样本进行量值相关性分析发现，R均大于0.85，相关性较好，与文献[9]报道一致，不影响临床应用分析。其中国产化学发光试剂盒安图A2000在本次试验中显示出较高的灵敏度和特异性，其操作智能化程度高、线性范围宽、费用相对于进口试剂费用低，值得临床推广使用。对于本研究中出现的3份可疑样本，无法确认是真阳性还是假阳性，笔者认为主要与以下因素有关：首先是制备抗体试剂盒的活性材料来源于不同人种，存在抗原亚型方面的差异；其次，由于患者不同HBsAg亚型，其产生抗体与试剂盒的反应性强弱不同，另一方面由于不同厂家生产的疫苗也不同，其产生抗体与试剂盒的反应性强弱也不同。

本研究表明，无论是进口或国产的乙肝病毒表面抗体试剂盒，在检测乙肝表面抗体时均存在一定的假阳性和假阴性。4种商品化表面抗体检测试剂均存在一定比例的不符合样本，需要结合临床诊断及其余四项抗原、抗体结果进行综合分析。对于多家试剂量值差异的问题，除了厂家规范已有的溯源外，临床客户在使用时需要做好解释工作。对于定期监测乙肝表面抗体浓度的患者，建议采用相同的化学发光检测系统进行定量检测。

[1] 张学东,张 泉,谢惠波,等.不同厂家试剂盒检测人血清乙肝表面抗体浓度值相关性分析[J].科技信息，2009，7: 362-363.

[2] ZHANG J M，XU Y，WANG X Y，etal. Coexistence of hepatitis B surface antigen(HBsAg) and heterologous subtypespecific antibodies to HBsAg among patients with chronic hepatitis B virus infection[J].Clin Infect Dis，2007，44(9):1161-1169.

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[7] 赵秀英，陈俊梅，王文静，等.电化学发光法和ELISA法检测HBV表面抗体结果的比较与分析[J].北京医学，2011，33(6):461-463.

[8] 官燕飞，彭建明，陈艳玲，等. 2种全自动化学发光免疫检测系统低值乙肝表面抗体定量测定结果的比较[J]. 国际检验医学杂志，2013，34(13)：1740-1742.

[9] Yu Chen, Wei Wu, Lan-juan Li，etal.Comparison of the results for three automated immunoassay systems in determining serum HBV markers[J].Clinica Chimica Acta，2006,372: 129-133.

(2014-06-13收稿 2014-08-22修回)

(责任编辑 尤伟杰)

Comparison of four commercially available assays for antibody to hepatitis B virus surface antigen

ZHANG Xiaoli1，WANG Ruiling1，SONG Na1, WANG Wenjing1, ZHANG Cui1，ZHANG Xuedong2， WANG Chongchong2，and YANG Xiaoli1.

1.Clinical laboratory, General Hospital of Chinese People’s Armed Police Forces,Beijing 100039,China. 2. Autobio Diagnostics Co Ltd, Zhengzhou 450016, China

Objective To study four commercially available assays for antibody to hepatitis B virus surface antigen. Methods A total of 252 specimens were tested by Abbott i2000、Roche e601、Autobio AutoLumoA2000 and a ELISA kit, respectively,and the quantitative results and the performance characteristics of the different test systems were compared. Results The sensitivity and specificity of different manufacturer kits for Anti-HBs were beyond 93%. The detection rates of compared CLIA(Chemiluminescence Immunoassay) commercial Anti-HBs reagents had no significant difference (P>0.05). Conclusions The four commercial Anti-HBs reagents have false positive and false negative results; the correlation analysis for quantitative results is beyond 0.85.

antibody to hepatitis B surface antigen；gold standard；sensitivity；specificity；correlation analysis

张小丽，本科学历，技师，E-mail:zxl_5021@sina.com

1.100039北京，武警总医院检验科；2.450016，郑州安图生物工程股份有限公司

杨晓莉，E-mail:yangxiaolitwins@163.com

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