复方黄连素片的溶出度试验

秦春怡

（河北省唐山市中医医院，河北 唐山 063000）

复方黄连素片是由白芍、木香、盐酸小檗碱等组方的碱性抗菌类中药[1]。本研究中运用高效液相色谱（HPLC）法对复方黄连素片进行溶出度检测，测定其所含盐酸小檗碱量，从而有效建立溶出度检查项目，为复方黄连素片的质量控制提供参考。

1 仪器与试药

SPD-6AV型紫外检测器；LC-6A型高效液相色谱仪（日本岛津公司）；ZRS-8型智能溶出试验仪（天津大学无线电厂）。盐酸小檗碱（中国药品生物制品检定所，批号为110724-200922）；复方黄连素片（江西新赣江药业有限公司，批号为080727，081218，090214）；纯化水、乙腈和其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2．1 溶出方法选择

参考2005年版《中国药典（二部）》[2]附录中的溶出度测定法——篮法。选取复方黄连素片6片，分别放于6个转篮中。以人工配置的0．1 mol／L盐酸溶液1 000 mL作为溶出介质，转速为120 r／min，温度为 37 ℃ ，依法操作。

2．2 溶液制备

选取25 mg盐酸小檗碱对照品，精密称定，置250 mL烧杯中，加入约150 mL沸水使其溶解。待溶液稍微变冷后，加入3 mL稀盐酸，搅匀，放冷，并移至250 mL容量瓶中，加水至刻度，摇匀，精密量取2 mL溶液，单独置25 mL的容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，即得 8．00 μg ／mL 的盐酸小檗碱[3]，作为对照品溶液。选取20片复方黄连素片，去除糖衣，精密称定质量，研细，并取出1片的质量置250 mL烧杯中。加入约150 mL沸水溶解，待溶液稍冷后，加入3 mL稀盐酸，搅匀，放冷，并移至250 mL容量瓶中，加水至刻度。以 4 000 r／min的速率离心，精密取上清液 2 mL，置25 mL容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。选取不含盐酸小檗碱的阴性复方黄连素片样品，按供试品溶液制备方法制备阴性对照品溶液。

2．3 色谱条件

色谱柱：Lichrospher ODS 柱（250 mm ×4．6 mm，5 μm）；流动相：0．033 mol／L 的乙腈 - 磷酸二氢钾溶液（40 ∶60）；检测波长：265 nm；进样量：10 μL；盐酸小檗碱的理论板数不低于3 000。

2．4 线性关系考察

通过精密仪器称取盐酸小檗碱对照品10．76 mg，将其放置在250 mL的烧杯中，加入约150 mL的沸水使其溶解，稍微放冷后将3 mL的稀盐酸加入，搅匀放冷后将其移植250 mL的容量杯中，加水到刻度并摇匀，便得到对照品的贮备液。

2．5 溶出度测定

溶出方式确定：选取1 000 mL经过脱气的0．1 mol／L盐酸溶液，放置温度为 36．5～37．5 ℃ ，以 120 r／min 的速率离心。然后选取 6片复方黄连素片，照 2．1项下方法操作，在 45 min时取10 mL溶出液进行过滤，精密量取2 mL置10 mL容量瓶中，加入0．1 mol／L盐酸溶液至刻度，摇匀后用滤膜过滤，按拟订方法进行各样品的溶出量测定。

空白辅料干扰试验：选取空白辅料片6片，按2．1项下方法操作。按照处方比例，将空白辅料置100 mL容量瓶中，加入流动相稀释至刻度，按拟订色谱条件测定。试验结果表明，空白辅料对试验无干扰。

回收率试验：分别精密选取8，10，12 mg盐酸小檗碱对照品，置100 mL容量瓶中。按处方量加入辅料，并用流动相稀释至刻度，配置成浓度分别为80%，100%，120%的样品溶液。按拟订色谱条件测定，计算回收率。结果见表1。

表1 回收率试验结果（n＝6）

样品溶出度测定：取出3批样品，每批为6片复方黄连素片，分别计算每批样品的平均溶出度和每片样品的溶出量。结果批号分别为 080727，081218，090214的 3批样品的平均溶出量为92．9% ，98．4% ，91．8% 。3 批样品测定的结果大致一致，且 3 批样品在45 min时的溶出度均超过标示量的90%，见图1。

图1 3批样品溶出曲线图

2．6 样品含量测定

选取对照品溶液和供试品溶液各10 μL，按拟订色谱条件测定，按外标法计算样品含量，结果见表2。

3 讨论

黄连素为一种重要的生物碱，可从三颗针、黄连等中提取，抑菌效果较显著，常用的盐酸黄连素又叫盐酸小檗碱，对多种细菌如痢疾杆菌、结核杆菌、肺炎球菌、伤寒杆菌及白喉杆菌等都有抑制作用，对痢疾杆菌作用最强，常用来治疗细菌性胃肠炎、痢疾等消化道疾病，不良反应较小[4]。但黄连素也可使患者胃酸增多、便秘，大量应用后偶有恶心、呕吐、皮疹及发热，甚至可能导致横纹肌溶解症及乳酸中毒症，服黄连素也可能会导致B族维生素吸收障碍，出现周围神经炎。

表2 样品含量测定结果

本试验中主要选取复方黄连素片和盐酸小檗碱片为样品，采用HPLC法测定盐酸小檗碱的溶出度。选取1 000 mL纯化水为溶剂，在溶剂中加入少量盐酸，有助于供试品的过滤。本试验结果显示，该方法简便、可靠，可为复方黄连素片的质量控制提供有效参考。

[1]乔德水，林 彬，梅 丽．不同厂家格列美脲片的溶出行为比较[J]．中国药业，2010，19(10):221-222．

[2]张根长．硫糖铝联用黄连素治疗慢性顽固性胃炎94例[J]．中国药业，2012，21(4):378-379．

[3]李兴德，田 静，周国勇．两种伊曲康唑胶囊溶出度的比较[J]．中国药业，2011，20(11):77-78．

[4]谢元超，巩丽萍，徐晓洁，等．自身对照法测定复方黄连素片溶出度[J]．药物分析杂志，2012，32(8):175-176．