王瑾 王光磊 王宫
·实验研究·
牛樟芝缓解体力疲劳作用的实验研究
王瑾 王光磊 王宫
目的 研究牛樟芝缓解体力疲劳的作用。方法 小鼠随机分成空白组和牛樟芝低、中、高剂量组 , 进行负重游泳实验、血清尿素氮测定、肝糖元测定和全血乳酸测定。结果 牛樟芝中、高剂量组能明显延长小鼠负重游泳时间 , 并降低小鼠运动后血清尿素氮含量 ;牛樟芝低、中、高剂量组均能提高给药后小鼠肝糖原储备 , 减少小鼠运动后乳酸的产生。结论 牛樟芝具有缓解体力疲劳作用。
牛樟芝 ;体力疲劳 ;血清尿素氮 ;肝糖原 ;全血乳酸
牛樟芝 (antrodia camphorata) 又名牛樟菇、樟窟内菇、红樟芝 , 是一种原产于我国台湾省的珍稀药用菌 ,主要分布在台湾省的桃园、苗栗、南投、高雄及屏东等地海拔 1000 m以上的深山密林中 , 通常腐生牛樟树 (cinnamomum kanehirae hayata)上百年的树干空洞内。现代研究表明[1], 牛樟芝含有多糖 (β-D- 葡聚糖 )、三帖类化合物、超氧化物歧化酶 (SOD)、腺苷、小分子蛋白质 (含免疫蛋白 )、维生素、固醇类、木质素、不饱和长链脂肪酸、麦角甾醇、微量元素锗等、凝集素、氨基酸、薄孔菌酸 (antrodiaacid)等多种生理活性物质;具有益胃整肠、镇痛抗菌、强化免疫、抗过敏、抗癌等多种功效 , 但对其缓解体力疲劳作用的报告还较少。
1. 1 样品 牛樟芝微粉 (台湾亚新生物科技股份有限公司 ,性状为土黄色粉末 , 不溶于水 ;人体推荐量为 12 g/60 kg Bw/d)。
1. 2 实 验 动 物 雄 性 清 洁 级 KM种 小 鼠 , 体 重 18~22 g[ 由 上 海 斯 莱 克 实 验 动 物 有 限 责 任 公 司 提 供 , 许可证号 :SCXK(沪 ) 2007-0005, 合格证编号 :2007000526592]。
1. 3 仪器与试剂 日立 KY2000半自动生化分析仪 ;血清尿素氮、肝糖原、全血乳酸试剂盒 (南京建成生物工程研究所 ,批号 :20111125);CMC-Na(国药集团化学试剂有限公司 , 批号 :F20110523);游泳箱 (尺寸 60 cm×50 cm×40 cm)
2. 1 分组与给药 小鼠随机分成四组 , 每组 10只。牛樟芝微粉按照人体推荐量的 5、10、30倍 , 即 1、2、6 g/kg的剂量设低、中、高剂量组 , 用 0.4%CMC-Na溶液配置成混悬液 ,灌胃给药 ;空白组按 0.2 ml/10 g剂量灌胃给予 0.4%CMC-Na溶液 ;1次 /d, 动物每周称重 2次 , 按体重调整给药剂量。
2. 2 负重游泳实验 连续给药 30 d, 于实验第 30天 , 灌胃给予受试物 30 min后 , 各组小鼠负重 5%铅皮 , 置于尺寸 60 cm×50 cm×40 cm, 水深 30 cm, 水温 25℃的游泳箱中游泳 ,记录小鼠自游泳开始至死亡的时间。
2. 3 血清尿素氮测定 连续给药 30 d, 于实验第 30天 , 灌胃给予受试物 30 min后 , 将小鼠置于尺寸 60 cm×50 cm×40 cm, 水深 30 cm, 水温 30℃的游泳箱中不负重游泳 90 min,运动后休息 60 min, 眼眶静脉丛采血 , 按试剂盒方法测定血清中尿素氮含量。
2. 4 肝糖元测定 连续给药 45 d, 于实验第 45天 , 灌胃给予受试物 30 min后 , 取肝脏 , 按试剂盒方法测定肝糖原含量。
2. 5 全血乳酸测定 连续给药 40 d, 于实验第 40天 , 灌胃给予受试物 30 min后 , 眼眶采血 , 后负重 4%在水温 30℃水箱中游泳 10 min后第 2次采血 , 休息 20 min后第 3次采血 ,每次采血量为 50 μl, 按试剂盒方法测定全血乳酸含量。
2. 6 统计学方法 实验数据用 SPSS19.0软件进行方差分析 ,方差齐时 , 采用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计分析 ;方差不齐时 , 改用秩和检验进行统计。P<0.05表示差异有统计学意义。
3. 1 牛樟芝对小鼠负重游泳时间的影响 牛樟芝中、高剂量组的负重游泳时间明显高于空白对照组 , 差异有统计学意义 (P<0.05);表明牛樟芝明显延长小鼠负重游泳时间。
表1 牛樟芝对小鼠负重游泳时间的影响
表1 牛樟芝对小鼠负重游泳时间的影响
注 :与空白对照组比较 ,aP<0.05
组别 剂量 ( g / k g ) 动物数 (只 ) 游泳时间 ( s )空白组低剂量组中剂量组高剂量组4 2 4 . 3 0 ± 2 2 7 . 2 6 6 2 1 . 6 0 ± 2 7 9 . 3 6 6 5 2 . 3 0 ± 2 1 6 . 5 9a9 6 3 . 5 5 ± 6 0 1 . 0 3a0 1 2 6 1 0 1 0 1 0 1 0
3. 2 牛樟芝对小鼠运动时血清尿素氮的影响 牛樟芝中、高剂量组游泳后血清尿素氮含量明显低于空白对照组 , 差异有统计学意义 (P<0.05);表明牛樟芝能明显降低小鼠运动后血清尿素氮含量。
3. 3 牛樟芝对小鼠运动时肝糖元含量的影响 牛樟芝低、中、高剂量组给予受试物后肝糖原含量明显高于空白对照组 ,差异有统计学意义 (P<0.05或 P<0.01);表明牛樟芝能明显提高给药后小鼠肝糖原储备。
3. 4 牛樟芝对小鼠运动后全血乳酸含量的影响 运动后 0 min牛樟芝低、高剂量组血乳酸含量明显低于空白对照组 , 差异有统计学意义 (P<0.05);小鼠休息 20 min后 , 牛樟芝中剂量组血乳酸含量明显低于空白对照组 , 差异有统计学意义(P<0.01);运动后牛樟芝低、中、高剂量组血乳酸产生量显著低于空白对照组 , 差异有统计学意义 (P<0.01);通过计算血乳酸曲线下面积 , 牛樟芝低、中、高剂量组血乳酸曲线下面积明显小于空白对照组 , 差异有统计学意义 (P<0.05);表明牛樟芝能明显减少小鼠运动后乳酸的产生。
本实验研究表明 , 牛樟芝微粉能明显延长小鼠负重游泳时间 , 降低小鼠运动后血清尿素氮含量 , 提高给药后小鼠肝糖原储备 , 减少小鼠运动后乳酸的产生[2]。因此 , 牛樟芝微粉具有缓解体力疲劳作用。
[1]张奉苏 ,陈菲 ,傅兴圣 ,等 .高效毛细管电泳法同时测定牛樟芝中 5 种核苷类成分的含量 . 中国药学杂志 , 2013,48(12):1018-1021.
[2]孙海凤 .从牛樟芝菌丝体分离的中性多糖对疮疱丙酸杆菌 - 脂多糖诱导的小鼠肝损伤的肝保护作用 .国外医药 (植物药分册 ), 2007,22(3):121.
2014-04-14]
350003 福建福州 , 福建省中医药研究院
王宫