2010-2012年益阳市流感样病例和流感病原学监测

李宝林

【摘 要】 目的对益阳市2010年-2012年的流感样病例进行监测并及时对流感病毒行核酸检测和分型鉴定，为流感的预防控制及临床治疗提供依据和指导。方法采集2010年到2012年三年间益阳市疾病预防控制中心流感样病例标本共计1074份，回顾性分析流感样病例的基本资料及病原学检测结果，对检测结果进行分析。结果2010-2012年，1074份流感样病例标本中，核酸阳性样本153份，阳性检测率为14.24%，经RTPCT检测鉴定24例，经REAL-TIME RTPCR检测鉴定131例，其中2例经RTPCR和REAL-TIME RTPCR共同检测，检出B型、季H3型、新甲H1型流感病毒各86例、43例、24例。结论2010年到2012年的三年间，益阳市有B型、季H3型、新甲H1型流感病毒流行，且B型流感病毒是流行优势株，季H3型流感病毒和新甲H1型流感病毒交替流行，流感病毒的流行具有比较明显的季节特征，上半年2-5月是高发季节。

【关键词】 流感样病例；流感病原学；监测

【中图分类号】 R183【文献标识码】 B

本文就2010-2012年三年间益阳市疾病预防控制中心分离和鉴定的流感样病例标本和病原学检测结果作为研究对象，分析流感病毒优势株、高发季节等特征，为流感病毒的防控提供指导。具体报告如下。

1资料與方法

1.1一般资料以《全国流感人禽流感监测实施方案》中对流感样病例的定义（即：腋下温度在38摄氏度及以上，伴有咳嗽或者咽痛的临床症状，且无其他实验室确定诊断依据的病例）为标准[1]，按照《湖南省流感监测防控实施方案》中对于流感样病例监测的要求，1周内利用核酸检测方法对哨点医院送来的标本进行流感病毒亚型鉴定。医院向疾病预防控制中心送检的病理标本要求保存温度在4℃以下；48h内未能送至实验室的，应当置-70℃或以下保存，并保证采集的标本1周内送到市疾病预防控制中心，避免标本的反复冻融。

1.2检测方法RT-PCR检测：将哨点医院送来的待检样本进行总RNA的提取，然后对其进行RTPCR反应，严格按照核酸提取、反应体系配置的试剂盒上规定的操作步骤进行。扩增程序参数设定为：60℃10min，42℃10min，50℃30min，95℃15min，94℃30s，52℃30s，72℃1min，35个循环；72℃7min[2]。

REAL-TIME RTPCR检测方法：按照试剂盒说明书的操作步骤进行病毒核酸的提取和反应。扩增程度的参数设定为：50℃ 30min，95℃3min，95℃15s，50℃30s，72℃1min，5个循环；95℃10s，55℃40s，40个循环。55℃收集荧光。

RTPCT检测方法适用于甲型和乙型流感病毒、季节性H1和H3亚型流感病毒的检测；而REAL-TIME RTPCR检测方法则适用于甲型流感病毒检测呈阳性但季节性H1和H3亚型流感病毒检测呈阴性的标本。在阴阳对照和内对照均成立的前提下，REAL-TIME RTPCR检测的样本反应液阳性判断标准是CT值在37.0及以下。

1.3判断标准RTPCT检测方法适用于甲型和乙型流感病毒、季节性H1和H3亚型流感病毒的检测；而REAL-TIME RTPCR检测方法则适用于甲型流感病毒检测呈阳性但季节性H1和H3亚型流感病毒检测呈阴性的标本。在阴阳对照和内对照均成立的前提下，REAL-TIME RTPCR检测的样本反应液阳性判断标准是CT值在37.0及以下[3-4]。

1.4统计学方法本次实验数据采用SPSS19.0软件进行统计学分析，其中计量资料对比采用t检验，计数资料对比采用卡方检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2结果

2010年到2012年的三年间，益阳市疾病预防控制中心共检测流感样病例鼻咽拭子标本1074份，共检出核酸阳性样本153份，阳性检测率为14.24%，经RTPCT检测鉴定24例，经REAL-TIME RTPCR检测鉴定131例，（其中2010年2例新甲H1流感病毒经RTPCR和REAL-TIME RTPCR共同检测），检出B型、季H3型、新甲H1型流感病毒各86例、43例、24例。各年的具体统计结果如表1。

2010与2011年的B型病毒的检测阳性率比较，X2=0.00，P＞0.05；而2012年与2011年的比较，X2=8.93，P＜0.01。说明2012年在B型流感病毒的防控方面，重视程度有所下降，导致B型流感病毒的感染扩大化。比较2010年与2011年的新甲H1型病毒的检测阳性率，X2=14.84，P＜0.01；比较2010年与2012年的季H3型病毒的检测阳性率，X2=6.24，P＜0.05，比较均有显著差异，2010年，新甲H1型病毒和季H3型病毒的感染率都比较低，而之后的两年病毒感染率的升高提示对其的重视程度不够，防范意识差。

3讨论

流行性感冒是十分常见的一种传染性疾病，其发病诱因是流感病毒，主要临床表现为急性呼吸道疾病，具有传染率高、流行性广的特点，严重危害人们的身体健康[5]。但是由于流感病毒的变异性十分强，至今仍无法对其实现有效的控制，尤其是变异病毒，极容易造成人群的感染，甚至引发大规模的流行，威胁整个社会的稳定。因而对流感的监测对于流感的预防和控制、变异病毒的发现与疫情的预警有十分重要的意义[6，7]。

2010年到2012年的三年间，益阳市有B型、季H3型、新甲H1型流感病毒流行，且B型流感病毒是流行优势株，季H3型流感病毒和新甲H1型流感病毒交替流行，流感病毒的流行具有比较明显的季节特征，上半年2-5月是高发季节。

对不同的流感病毒核酸分型流行季节进行比较可见，新甲H1型流感病毒的感染时间集中在1-2月，季H3型流感病毒的感染时间集中在3月和8月，而B型流感病毒感染的时间跨度更大，流行范围更广，防控工作的重点应放在B型流感病毒上。新甲H1型病毒和季H3型病毒在10年的感染例数还较少，但11年和12年流行范围扩大，感染人数增加，也要对其重点防范，并对新的变异病毒类型加以防范，避免出现新病毒的扩散和传播，造成严重疫情。

参考文献

[1] 李婵媛.2009年-2011年铁岭市流感样病例病原学监测结果分析[J].中国卫生检验杂志,2011,21(10):2493-2494.

[2] 薛娜，韩志国，樊旭成，等.乌鲁木齐市2011-2012年度流感监测结果分析[J].医学动物防制,2013,29(7):736-737.

[3] 陈秀云，岑永庄，陈学琴，等.2009-2012年中山市流行性感冒监测结果分析[J].热带医学杂志,2013,13(5):649-650.

[4] 刘艳璋，钟新光，张巧利，等.东莞市2009年流感监测分析[J].现代预防医学,2011,38(7):1316-1317.

[5] 陆兵，钱燕华，石平，等.2005-2012年无锡市流感流行特征分析[J].中华疾病控制杂志,2013,17(8):655-656.

[6] 曹东晖.中山市2010-2011年流感监测分析[J].疾病监测与控制杂志,2013,7(3):742-743.