HCG/LH与获卵率对临床结局的影响

孔祥敏??杨爱军??曹井贺??刘庄

[摘要] 目的 探讨注射HCG次日，血清HCG/LH比值的高低对获卵率的影响，并确定合适的临床参数。方法 通过对本中心194例体外受精-胚胎移植超促排卵患者的数据分析，比较了HCG次日HCG/LH比值水平，并取比值1.0为界分为两组，分别比较两组获卵率和可利用胚胎率。结果 通过对两组数据的分析，从总体的临床结局上看，两者无明显差异，但是从获得的卵子数上来讲，1组（HCG/LH≤1.0）获卵率要高于2组（HCG/LH>1.0）（84.49%vs71.35%），可利用胚胎率分别为84.00%和71.30%。两者有明显的统计学差异。结论 在促排卵周期中，HCG/LH水平相对越低，也就是说，LH水平较高时，所获得的卵子数是较高的，这也完全符合临床，虽然我们的临床结局没有差异，但是相对来讲，获卵率的提高，对临床妊娠率也是一种帮助。

[关键词] HCG/LH；获卵率；临床妊娠率

[中图分类号] R714.8 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2014）04-07-05

Effects of HCG/LH ratio on oocyte rate and clinical outcomes

KONG Xiangmin YANG Aijun CAO Jinghe LIU Zhuang

Department of Reproductive Medicine，Affiliated Hospital of Jining Medical College，Jining 272009，China

[Abstract] Objective To determine the effect of HCG/LH on occytes and clinical outcomes. Methods Patients in an in vitro fertilization-embryo transfer （IVF-ET） programme were treated with controlled ovarian hyperstimulation（COH）.The HCG and LH level were detected after 24 hours.Then oocyte rate and available embryo for IVF-ET were analyzed between two HCG/LH ratio groups. Results The result of clinical outcomes has no statistical significance. However significant difference were noted for the number of oocytes（84.49% vs 71.35%） as well as available embryos rate（84.00% vs 71.30%） between the two groups with HCG/LH ratio≤1.0 and HCG/LH>1.0. Conclusion In the process of ovulation induction，with lower level of HCG/LH ratio or in other words with relative higher LH level the number of embryos would be achieved. Although has no statistical significance for clinical outcomes，higher vailable embryo rate would be helpful for pregnancy rate in IVF-ET.

[Key words] HCG/LH；The rate of oocytes；The rate of clinical pregnancy

随着生活质量的提高，人类对战胜疾病的渴望也随之上升，但是，人类的不孕不育率却在下降。导致不孕的因素有很多，环境因素、自身压力过大、药物滥用等。辅助生殖技术已经成为不孕患者求子的良药。在辅助生殖技术中，限制其发展的主要瓶颈是如何提高临床妊娠率。迄今为止，大部分中心的临床妊娠率为50%左右，很难突破。我们认为，是否可以提高其他的参数来获得相当的临床妊娠率呢？获卵率的高低或许可以相对的反应临床妊娠率的高低。

在控制性超促排卵（controlled ovarian hyperstimulation，COH）过程中，越来越多的人更加关注人体生殖相关内分泌水平的变化，以及对助孕

结局产生的影响。同时，卵子质量和子宫内膜的容受性与内分泌水平的变化密切相关。妊娠率的高低更加期待于如何获得高质量优质胚胎及改善子宫内膜的同步性问题。注射人绒毛膜促性腺激素（human chorionic gonadotrophin，HCG）次日，血清HCG/LH（luteinizing hormone）比值水平与获卵率的关系还有待商榷。该研究回顾性分析了接受IVF/ICSI助孕的患者资料，并进行了大量的数据统计，探讨HCG次日HCG/LH比值水平对临床妊娠结局的影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2011年1月～2013年7月济宁医学院附属医院生殖中心的240个取卵周期的229例运用辅助生殖技术治疗的患者。年龄25～35岁，平均（30.0±5.7）岁，平均体重（52.0±10.8）kg。分析了新鲜移植周期的184例患者，根据临床妊娠结局分为两组，妊娠组90周期，未妊娠组94周期，比较两组注射HCG次日主要的激素水平。所有患者均符合国家辅助生殖技术规范的要求。两组患者的年龄、体重等方面无统计学差异（P>0.05）。根据注射HCG次日HCG/LH比值分为≤1.0及>1.0组，比较两组间的各个激素指标的差异。endprint

1.2 方法

1.2.1 治疗方法 根据患者的年龄、基础内分泌水平、体重等分别采用长方案、微刺激方案进行促排卵。同时，通过经阴道B超检查及激素水平测定监测卵泡发育情况，当经阴道B超监测卵巢内有2个及以上的卵泡直径达18mm时，当晚肌注HCG。注射HCG次日，我们通过贝克曼DIX-800查E2、LH、P、HCG水平。HCG日36～38h后取卵，对穿刺卵泡数计数，并计数获卵个数。取卵当天开始给予黄体支持（40mg黄体酮，一日2次）。取卵后4～6h进行体外授精，包括（常规体外受精（IVF）或卵胞浆内单精子注射（ICSI），取卵第1天观察并记录受精情况，取卵第2天和第3天分别观察胚胎发育情况；并移植第3天的胚胎到子宫，移植2个胚胎；移植（ET）14d后，测血HCG水平，阳性者（HCG≥5.0）诊断为生化妊娠，ET 28d后进行B超检查，宫内有妊娠囊则确定临床妊娠，随后电话随访确定妊娠结局。通过生殖病历系统，调取每例患者的促性腺激素（Gn）使用天数、Gn用量、HCG日子宫内膜厚度、HCG次日测定LH、E2、P值，移植日内膜，妊娠结局，并做进一步分析。

1.2.2 实验室指标 （1）获卵数；（2）获卵率=获卵数/穿刺卵泡数×100%；（3）2原核胚胎数（2PN数）；（4）正常受精数；（5）正常受精率=2PN数/获卵数×100%；（6）正常卵裂数；（7）正常卵裂率=正常卵裂数/2PN胚胎数×100%；（8）优质胚胎数：采用4级胚胎分级法分为Ⅰ、Ⅱ级的胚胎数，即第3天胚胎发育为8细胞，均匀，碎片小于5%为Ⅰ级；第3天胚胎发育为8细胞，均匀，碎片在5%～20%为Ⅱ级；第3天胚胎发育为8细胞，不均匀，碎片在20%～50%为Ⅲ级；第3天胚胎发育为8细胞，不均匀，碎片大于50%为Ⅳ级。

1.3 统计学处理

采用SPSS13.0软件包行统计分析，统计方法采用t检验，分析数据采用x2检验。

2 结果

2.1 HCG次日血清激素水平与妊娠结局

将完成移植的患者按妊娠结局分为妊娠组与未妊娠组，两组间HCG次日 LH、E2、HCG水平无统计学差异。见表1。

2.2 HCG次日HCG/LH比值水平与助孕结局关系

以HCG次日血HCG/LH比值水平1.0为界进行分为两组，两组患者体重、年龄、基础水平的内分泌水平及促排卵药物用量无统计学差异，但HCG/LH≤1.0组获胚率、正常受精率、可利用胚胎率、优质胚胎率均明显高于HCG/LH>1.0组（P<0.05）。见表2～3。

3 讨论

随着生活节奏的加快、工作压力增大、以及不良的生活方式等因素的影响，近年来不孕症的发病率不断增加[1-2]，已成为继癌症之后的又一重大疾病。研究表明，在已婚夫妇中有超过15%的人患有不孕症，给自身带来痛苦的同时，也给家庭带来了极大的经济负担[3]。自从第1例试管婴儿诞生以来，

辅助生殖技术（ART）蓬勃发展，为不孕症患者带来了曙光。

然而，任何技术都会受到限制，ART的瓶颈在于临床妊娠率的提高，如何在现有的基础上提高临床妊娠率，正是临床上亟待解决的问题。

体外受精-胚胎移植（IVF-ET）周期通常进行人工超促排卵，其目的是为了刺激多个始基卵泡同步发育，来获取较多优质卵细胞，以便获得优质胚胎来选择移植，最终提高临床妊娠率。然而，精子与卵细胞结合形成受精卵的过程非常复杂，调控非常精细，任何一个环节出现异常均会导致受精失败或异常受精，包括精子顶体异常、精子穿透障碍、精卵膜融合障碍、卵母细胞激活受阻、原核形成障碍以及原核融合障碍等[4]；卵细胞的优劣是决定受精与否的最主要因素。通常情况下，体外受精失败的主要原因之一为卵子成熟度（不熟或过熟都会影响受精），而胚胎质量差大部分的原因是卵源性因素[5]。保证正常受精、胚胎质量的前提是获得优质的卵细胞。本文通过对两组患者的卵子受精率分析发现，1组受精率明显高于2组（79.80% vs 60.10%），差异具有统计学意义。我们认为其原因可能与1组患者HCG次日，HCG/LH比值相对较低，卵泡平均径线较大，成熟度更好有关。我们知道，IVF-ET周期中，卵子的成熟与年龄、卵巢反应性（Gn量）、HCG注射时机、HCG日血清E2水平等多种因素有关。Ectors等[6]研究表明，IVF-ET周期获得的优质卵母细胞的个数与卵泡大小有直接关系，同时与HCG注射的时间有关。在IVF周期中，只有处于MII期（成熟卵细胞）的卵细胞才有可能受精，不熟或是过熟的卵子均不能受精。Ectors等研究表明，如果穿刺卵泡直径缩小，获得MII期卵子的数量会随之降低，其受精率也随之下降。卵子的发育成熟度与促排卵时间及血清E2水平等亦存在相关性。正常情况下，每个成熟卵子对应的E2水平在300～400ng/L，体内E2水平与卵泡生长呈正相关，促排卵周期中也是如此。原因可能是卵泡的直径越大，其中的卵泡液越多，所含的颗粒细胞也越多，这就为卵子的发育提供了最优的保障，保证了更高的受精率和卵裂率[7]。其次，HCG的注射时机对卵子的成熟度至关重要。在IVF-ET中，如何控制注射促性腺激素（Gn）的量及何时停止注射，以达到一个较满意的获卵率和妊娠率，目前国内外各个医疗机构也没有一个统一的标准，一般都固定为≥14mm。但是人为因素和机器的系统误差也使得各个生殖中心的标准有一定的差异。HCG注射时间过早，卵泡上的颗粒细胞的LH受体不足，对HCG反应不足，获卵率降低；注射HCG过晚，卵泡可能已渡过了最恰当的排卵时机，此时，外源性促性腺激素继续作用，促使卵泡继续发育而分泌更多的雌激素，诱发内源性的LH峰的发生，卵泡黄素化，也会降低获卵率。再者卵泡直径的增大可使得卵子发育过于成熟，有可能导致卵母细胞超微结构异常，可能与卵子内出现一种退化的细胞器即滑面内质网（sERCs）[8]有关。要获得高质量的卵子，HCG的剂量及HCG次日患者体内的血清HCG含量有一定的关系。HCG次日，我们通常测定患者体内的HCG含量，通过我们的临床观察，一般HCG剂量很低的情况下，获卵率不高。有可能患者对HCG抵抗，此时HCG无法发挥扳机的作用促进排卵。因此，对这部分人群，有必要给予补充HCG。我们知道，此时也有内源性的LH来促进排卵的发生，但是通常情况下，LH是不足的，此时给予HCG，能发挥双扳机的作用，来获得高质量的卵细胞。endprint

我们知道，HCG在辅助生殖中的作用相当明显，调节卵子成熟、诱发排卵等等。研究表明，HCG的用量影响获卵数，低剂量的获卵数明显要低于高剂量的[9]。徐凤琴、张云山等研究表明，HCG的用量并不影响获卵率，但高剂量的HCG诱发排卵容易导致卵巢过度刺激综合征（OHSS）[10-11]。我们认为，在IVF周期中，针对不同的人群，寻找一个合适的HCG剂量是必要的。在节省患者花费的同时，也为我们临床降低了风险。与此同时，黄体生成素（LH）是排卵的重要指标。一般情况下，LH值上升到基础值得3倍以上时，12～24h后会发生排卵。因此，在HCG次日，LH的值都相当偏高，这样会获得比较理想的卵子质量和个数。然而，也有一部分人群，在HCG次日，LH的值却降低，一方面的原因是拮抗剂发挥作用，抑制了体内的LH峰的出现；另一方面，该患者本身基础的LH比较低，注射HCG后，诱发了部分卵泡的提早排出，导致LH降低[12]。总之，LH降低预示着获得卵子数的减少。

在辅助生殖技术中，临床妊娠率是任何一个中心所要突破的关键。高的获卵率和优胚率是增加临床妊娠率的一个因素。正常子宫内膜随月经周期而消长，子宫仅有一个极短的时期允许胚胎着床即窗口期，雌激素和孕激素的水平可能会影响子宫内膜的容受性[13-14]。雌孕激素直接作用于子宫内膜[15]。研究表明，HCG可以影响子宫内膜的容受性[16]。研究表明，在IVF-ET中，胚胎移植前宫腔内灌注hCG可以提高种植率和妊娠率[17]。鉴于此，我们可以试图在移植前，常规进行HCG宫腔灌注，结合理论来观察临床效果。

到目前为止，仍没有一种可靠的方式或手段来提高临床妊娠率，我们也只是在理论上讨论一些可行的办法来辅助临床。临床妊娠率的提高还有待我们进一步的研究和实践。

[参考文献]

[1] 李美.HCG和子宫内膜类型及厚度和血清孕酮值对IVF-ET治疗结局的影响[J].国际检验医学杂志，2013，34（3）：313-316.

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（收稿日期：2013-11-16）endprint

我们知道，HCG在辅助生殖中的作用相当明显，调节卵子成熟、诱发排卵等等。研究表明，HCG的用量影响获卵数，低剂量的获卵数明显要低于高剂量的[9]。徐凤琴、张云山等研究表明，HCG的用量并不影响获卵率，但高剂量的HCG诱发排卵容易导致卵巢过度刺激综合征（OHSS）[10-11]。我们认为，在IVF周期中，针对不同的人群，寻找一个合适的HCG剂量是必要的。在节省患者花费的同时，也为我们临床降低了风险。与此同时，黄体生成素（LH）是排卵的重要指标。一般情况下，LH值上升到基础值得3倍以上时，12～24h后会发生排卵。因此，在HCG次日，LH的值都相当偏高，这样会获得比较理想的卵子质量和个数。然而，也有一部分人群，在HCG次日，LH的值却降低，一方面的原因是拮抗剂发挥作用，抑制了体内的LH峰的出现；另一方面，该患者本身基础的LH比较低，注射HCG后，诱发了部分卵泡的提早排出，导致LH降低[12]。总之，LH降低预示着获得卵子数的减少。

在辅助生殖技术中，临床妊娠率是任何一个中心所要突破的关键。高的获卵率和优胚率是增加临床妊娠率的一个因素。正常子宫内膜随月经周期而消长，子宫仅有一个极短的时期允许胚胎着床即窗口期，雌激素和孕激素的水平可能会影响子宫内膜的容受性[13-14]。雌孕激素直接作用于子宫内膜[15]。研究表明，HCG可以影响子宫内膜的容受性[16]。研究表明，在IVF-ET中，胚胎移植前宫腔内灌注hCG可以提高种植率和妊娠率[17]。鉴于此，我们可以试图在移植前，常规进行HCG宫腔灌注，结合理论来观察临床效果。

到目前为止，仍没有一种可靠的方式或手段来提高临床妊娠率，我们也只是在理论上讨论一些可行的办法来辅助临床。临床妊娠率的提高还有待我们进一步的研究和实践。

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我们知道，HCG在辅助生殖中的作用相当明显，调节卵子成熟、诱发排卵等等。研究表明，HCG的用量影响获卵数，低剂量的获卵数明显要低于高剂量的[9]。徐凤琴、张云山等研究表明，HCG的用量并不影响获卵率，但高剂量的HCG诱发排卵容易导致卵巢过度刺激综合征（OHSS）[10-11]。我们认为，在IVF周期中，针对不同的人群，寻找一个合适的HCG剂量是必要的。在节省患者花费的同时，也为我们临床降低了风险。与此同时，黄体生成素（LH）是排卵的重要指标。一般情况下，LH值上升到基础值得3倍以上时，12～24h后会发生排卵。因此，在HCG次日，LH的值都相当偏高，这样会获得比较理想的卵子质量和个数。然而，也有一部分人群，在HCG次日，LH的值却降低，一方面的原因是拮抗剂发挥作用，抑制了体内的LH峰的出现；另一方面，该患者本身基础的LH比较低，注射HCG后，诱发了部分卵泡的提早排出，导致LH降低[12]。总之，LH降低预示着获得卵子数的减少。

在辅助生殖技术中，临床妊娠率是任何一个中心所要突破的关键。高的获卵率和优胚率是增加临床妊娠率的一个因素。正常子宫内膜随月经周期而消长，子宫仅有一个极短的时期允许胚胎着床即窗口期，雌激素和孕激素的水平可能会影响子宫内膜的容受性[13-14]。雌孕激素直接作用于子宫内膜[15]。研究表明，HCG可以影响子宫内膜的容受性[16]。研究表明，在IVF-ET中，胚胎移植前宫腔内灌注hCG可以提高种植率和妊娠率[17]。鉴于此，我们可以试图在移植前，常规进行HCG宫腔灌注，结合理论来观察临床效果。

到目前为止，仍没有一种可靠的方式或手段来提高临床妊娠率，我们也只是在理论上讨论一些可行的办法来辅助临床。临床妊娠率的提高还有待我们进一步的研究和实践。

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[16] Singh N，Bahadur A，Mittal S.Coparatibe analysis of endometrial blood flow on the day of HCG by 2D Doppler in two groups of women with or without genital tuberculosis undergoing IVF-ET in a debeloping country[J].Arch Gynecol Obstet，2010，283（1）：115-120.

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