食管癌疫苗临床应用分析*

刘东红 朱丽华 张庆波 曹秀华 石恩富 丁贺田

食管癌疫苗临床应用分析*

刘东红①②朱丽华①张庆波①曹秀华②石恩富②丁贺田③

目的：对食管癌疫苗在临床应用效果进行分析，以期为临床应用提供参考。方法：从食管癌术后肿瘤组织标本中提取其可溶性抗原成分和超抗原SEC构建成肿瘤疫苗，对食管癌术后328例患者进行临床应用（观察组），并以常规治疗326例患者作为对照组，观察并分析临床应用效果和5年随访结果。结果：观察组5年生存率为49.71%（173/328），对照组5年生存率为20.55%（67/326），经统计学处理有显著性差异（P＜0.05）；女性生存率为51.22%（84/164），男性生存率为45.12%（74/164），女性生存率显著高于男性（P＜0.05）。观察组中低分化患者的生存率（61.90%）显著高于高分化患者的生存率（41.61%），差异具有统计学意义（P＜0.05）；而对照组低分化患者生存率（10.75%）显著低于高分化患者的生存率（31.34%），差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论：该疫苗能有效防止食管癌术后患者的复发和肿瘤转移，提高生存率，特别是对女性患者和恶性程度高的患者效果更佳。

肿瘤疫苗 食管癌 肿瘤可溶性抗原 超抗原SEC 生物治疗

食管癌是常见的上消化道肿瘤，严重威胁着人类的生命健康，全世界每年约有30万人死于食管癌，我国食管癌病死率为15.02/10万［1］，其死亡率仅次于胃癌、肝癌、肺癌，位居我国居恶性肿瘤第四位［2］。食管癌切除术后总体5年生存率仍然停留在20%～30%的水平［3］，提高食管癌术后生存率是目前临床亟待解决的问题。为此，本研究从食管癌切除术后的临床组织标本中提取可溶性抗原成分，与金葡菌超抗原一起构建成为肿瘤疫苗，进行临床应用。

1 材料与方法

1.1 临床资料

自2007年3月至2009年3月选择河北联合大学附属医院、唐山市人民医院、唐山市工人医院、秦皇岛市人民医院、遵化市人民医院等单位的食管癌术后患者654例。入组标准：1）经病理检查证实均为鳞癌，无高血压、糖尿病、心脑血管疾病及其他合并症等；2）术前1周和疫苗应用后1周分别做OT试验，由弱阳性转为阳性或由阳性转为强阳性，表明细胞免疫功能增强，治疗有效；3）病理分期：T3期或以下，M0、N期无要求。愿意接受食管癌疫苗治疗的设为观察组，同期符合上述要求未接受疫苗治疗者为对照组。观察组328例，男性164例（高分化68例、中分化52例、低分化44例），年龄42～68岁，女性164例（高分化69例、中分化55例、低分化40例），年龄44～69岁；对照组326例，男性165例（高分化68例、中分化54例、低分化44例），年龄41～70岁，女性161例（高分化66例、中分化51例、低分化49例），年龄40～67岁，2组患者性别、年龄和肿瘤恶性程度比较无显著性差异（P＞0.05），具有可比性。本研究经医院伦理委员会批准，患者及家属知情同意并签署协议书。

1.2 方法

1.2.1 食管癌疫苗构建 取手术切除的食管癌组织标本，提取其可溶性抗原成分［4］。选取最佳浓度的TSA（50 μg/mL）和SEC（0.1 ng/mL）混合成为肿瘤疫苗。

1.2.2 接种方法 对照组术后进行常规治疗和处理。观察组在常规治疗的基础上加用肿瘤疫苗皮内注射：于双前臂掌侧，每侧注射0.1 mL，用药前后1 d和用药当天，每天静脉滴注IL-2 20万单位。首次于术后第7天应用，间隔7天再进行第2次接种，共接种2次。

1.2.3 接种效果判定 于第2次接种后48 h观察局部接种反应。阳性：局部红肿或有硬结；阴性：局部无红肿或硬结。结果阳性为接种有效。

1.2.4 观测内容 观察组患者注射疫苗后，观测接种部位的局部反应和全身反应，全部接种者无发热及过敏现象发生，并对接种者进行定期5年生存率随访。

1.2.5 疗效判断 对观察组、对照组患者进行5年生存率随访，生存时间延长为治疗有效。

1.3 统计学分析

应用SPSS 16.0软件对数据进行统计学处理。计量资料以±s表示，多组间数据两两比较采用q检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 总生存率和性别与生存率的相关性分析

观察组总生存率和男女生存率均高于对照组（P＜0.05，表1）。

2.2 肿瘤分化程度与生存率的相关性分析

观察组低分化癌患者生存率显著高于高分化癌患者（P＜0.05，表2），而对照组低分化癌患者生存率显著低于高分化癌患者（P＜0.05，表2）。

2.3 低分化癌和高分化癌抗原对PBMC增值活性的影响

各观察组对细胞增殖活性的影响均高于对照组（P＜0.05，表3）。

表1 观察组和对照组5年生存情况比较 例（%）Table 1 Comparison of five-year survival rate between treatment and control groups[case(%)]

表2 肿瘤分化程度与生存率的卡方分析 例（%）Table 2 Analysis between the degree of tumor differentiation and the survival rate[case(%)]

3 讨论

本文5五年随访结果显示的两个突出的问题：一是女性患者生存率显著高于男性，可能是由于女性患者机体的免疫力高于男性；二是恶性程度低的患者生存率高于恶性程度高者，可能是由于恶性程度低的肿瘤组织抗原其免疫原性强，能诱导产生更强的免疫反应。提取肿瘤组织细胞可溶性抗原，可避免细胞抗原的各种弊端，保存抗原的特异性，加入葡萄球菌肠毒素（超抗原）可诱导T细胞增殖［5］，提高其免疫原性。金葡菌肠毒素（SE）是一种具有高度生物活性的蛋白质，是目前研究较多的细菌性超抗原，对肿瘤细胞产生直接和间接的杀伤和抑制作用［6］。由肿瘤可溶性抗原和金葡菌超抗原构建的肿瘤疫苗，可诱导人外周血单个核细胞产生细胞毒性T细胞，这种效应细胞对抗原来源的肿瘤细胞具有选择性杀伤活性，其机理为效应细胞诱导靶细胞凋亡［7-9］。

表3 不同分化程度的肿瘤抗原对PBMC增殖活性影响的比较 （OD值±s）Table 3 Peripheral blood mononuclear cell proliferation stimulated by the tumor antigen of different groups（OD value，±s）

表3 不同分化程度的肿瘤抗原对PBMC增殖活性影响的比较 （OD值±s）Table 3 Peripheral blood mononuclear cell proliferation stimulated by the tumor antigen of different groups（OD value，±s）

Note：Control group(A),high-differentiation group(B),moderate-differentiation group(C),and low-differentiation group(D);PB-A=0.000,PC-A= 0.000,PD-A=0.000(P＜0.05,statistically significant)

Group High differentiation Moderate differentiation Low differentiation Control group P The third day 0.279±0.007* 0.369±0.008* 0.585±0.011* 0.166±0.007 0 The sixth day 0.330±0.012* 0.487±0.009* 0.796±0.008* 0.279±0.009

由于肿瘤细胞在长期的生长演变过程中，形成了逃避机体免疫系统攻击杀伤的机制，肿瘤细胞可通过多种方式来逃避免疫监视，目前已经认识到的肿瘤免疫逃逸的相关机制可能包括以下几个方面［10-12］：1）肿瘤抗原表达缺陷或抗原调变，异质性大；2）肿瘤细胞MHC-Ⅱ类分子表达不同程度的下降、缺如，且分化能力差的肿瘤细胞HLA表达更弱，大多数实体肿瘤不表达HLA-Ⅱ分子抗原；3）肿瘤细胞产生的细胞因子的负性调节作用；4）Fas/FasL在肿瘤免疫逃逸中的作用，表达FasL的肿瘤细胞能诱导表达Fas的淋巴细胞发生凋亡，又由于瘤细胞本身表达的下调，使淋巴细胞促肿瘤细胞凋亡的作用处于弱势；5）黏附分子/共刺激分子缺陷，使得T细胞在活化过程中缺乏第二信号而不能被有效的激活，不能激发起有效的抗肿瘤免疫应答；6）抑制性免疫细胞亚群的作用。这些方面作用导致了机体无法对肿瘤细胞进行有效的识别和杀伤。大多数肿瘤抗原的免疫原性很弱，且宿主对肿瘤抗原的免疫应答导致肿瘤细胞表面抗原减少或丢失，从而使肿瘤细胞不被免疫系统识别，不能诱发有效的抗肿瘤免疫应答作用。基于这个认识，需要运用增强肿瘤抗原的免疫原性的基本方法，诱发机体的抗肿瘤免疫应答，以达到缩小和消除肿瘤的目的。

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4 Ma SQ,Zheng QH,Zhang QB,et al.Anticancer mechanism of esophagus cancer vaccine[J].Chin J Clin Oncol,2012,39(24)：2066-2069.[马淑芹,郑全辉,张庆波,等.食管癌疫苗抗癌机理研究[J].中国肿瘤临床,2012,39(24)：2066-2069.]

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（2014-07-14收稿）

（2014-10-19修回）

（本文编辑：周晓颖）

Analysis of the effect of clinical application of vaccine for esophageal cancer

Donghong LIU1,2,Lihua ZHU1,Qingbo ZHANG1,Xiuhua CAO2,Enfu SHI2,Hetian DING3

Lihua ZHU;E-mail:zhulihua1972@163.com
1Department of Pathogenic Organism and Immunology,Hebei United University,Tangshan 063000,China;2Department of Surgical Oncology,Zunhua No.2 Hospital,Zunhua 064200,China;3Department of Surgical Oncology,Zunhua National Hospital,Zunhua 064206,China
This work was supported by The Science and Technology Support Program of Hebei Province(No.09276418D-18 and 132777138)

Objective:To analyze the effects of the clinical applications of vaccine for esophageal cancer to provide treatment basis.Methods:Tumor-soluble antigen was extracted from clinical samples of esophageal cancer tissue.Vaccine for esophageal cancer was prepared using antigen and superantigen staphylococcal enterotoxin C(SEC).One group of patients with esophageal cancer was treated with vaccine after surgery(treatment group).Another group of patients with esophageal cancer was treated using routine methods(control group).After five years,the patients were followed up to analyze survival.Results:After five years of follow up,the survival rates of treatment and control groups were 173/328(49.71%)and 67/326(20.55%),respectively.Survival rates significantly differed between the two groups(P＜0.05).Furthermore,the survival rates of the female patients were higher than those of the male patients(P＜0.05).In the treatment group,the survival rates of patients with low-differentiation cancer were higher than those of patients with high-differentiation cancer(P＜0.05).In the control group,the survival rates of patients with low-differentiation cancer were lower than those of patients with high-differentiation cancer(P＜0.05).Conclusion:Tumor vaccine prepared with esophageal cancer antigen and superantigen SEC could increase the survival rate of patients with esophageal cancer,particularly female patients and those with low-differentiation cancer.

tumor vaccine,esophageal cancer,tumor-soluble antigen,superantigen SEC,tumor biotherapy

10.3969/j.issn.1000-8179.20141175

①河北联合大学基础医学院病原生物与免疫学学科（河北省唐山市063000）；②遵化市第二医院外科；③遵化市民族医院肿瘤外科

*本文课题受河北省科学技术厅项目（编号：132777138）和唐山市科技计划指令项目（编号：13130263z）资助

朱丽华 zhulihua1972@163.com

刘东红 专业方向为肿瘤免疫及生物治疗。

E-mail：zqb1955@163.com