双氯芬酸钾软膏的制备及其体外累积释药率的测定

王 兰， 顾 欣， 常相娜， 龚 频， 虢红梅， 王 雪

(1.陕西科技大学 生命科学与工程学院， 陕西 西安 710021； 2.陕西新药技术开发中心， 陕西 西安 710075)

0 引言

双氯芬酸钾(Diclofenac Potassium, DP)是一种新型强效非甾体抗炎药，其能有效抑制环氧合酶，具有解热、镇痛和抗炎等作用[1-5].该药物外用具有透皮吸收好、起效快和避免肝脏首过作用等优点[6]，本文拟采用乳化法制备双氯芬酸钾软膏，并考察了Franz扩散池的测定温度、接收介质和不同种类及浓度的促渗剂对药物体外累积释药率的影响.

1 材料

双氯芬酸钾，上海哈灵生物科技有限公司(批号：100880-200601)；白凡士林，南京金陵石油化工公司化工一厂；硬脂酸，天津市东丽区天大化学试剂厂；液体石蜡，天津市风船化学试剂有限公司；硬脂醇，天津市科密欧化学试剂有限公司；甘油，天津市天力化学试剂有限公司；丙二醇，西安化学试剂厂；吐温-80，西安化玻站化学厂；司盘-80，天津市河东区红岩试剂厂；Azone，天津市博迪化工有限公司；乙酸乙酯，天津市东丽区天大化学试剂厂；无水乙醇，天津市天力化学试剂有限公司.

9100型紫外可见分光光度计，国华电器有限公司；RYJ-6A型药物透皮扩散试验仪，上海黄海药检仪器厂.

昆明小鼠，购于第四军医大学实验动物中心.

2 方法与结果

2.1 软膏的制备[7-9]

按处方依次称取白凡士林、硬脂酸、液体石蜡、硬脂醇、吐温-80和司盘-80置于烧杯中，80 ℃下水浴加热使其完全熔融，再依次称取水、甘油和丙二醇置于另一个烧杯中80 ℃水浴下搅拌加入双氯芬酸钾使其完全溶解，最后将水相缓慢加入油相，边加边搅拌直至形成乳白色的半固体状软膏.

表1 双氯芬酸钾软膏的处方组成

2.2 体外累积释药率方法学的建立

2.2.1 波长选择[10]

(1)对照品溶液制备：精密称取双氯芬酸钾0.2 g，用适量的丙二醇溶解.(2)空白辅料溶液制备：精密称取软膏空白辅料0.2 g，其余操作同“对照品溶液制备”.将上述溶液分别在200～500 nm波长范围内扫描，结果表明，空白辅料在272 nm处无明显吸收，而对照品在此波长处有最大吸收.由此选定272 nm波长为含量测定波长.两种溶液的紫外扫描图谱如图1所示.

a:双氯芬酸钾对照品; b:空白辅料图1 紫外扫描图

精密称取双氯芬酸钾对照品10 mg，加无水乙醇溶解后定容于50 mL的容量瓶中，分别精密吸取该溶液0.50、0.75、1.00、1.25、1.50 mL置于10 mL的容量瓶中，加无水乙醇至刻度，以无水乙醇作为空白对照，在272 nm波长处测定吸收度.以吸收度(A)对浓度(C)进行回归得标准曲线方程为A=0.025 7C+0.023 2(r2=0.999 8).

2.2.2 体外累积释药率的测定

本次研究是应用Franz扩散池法测定双氯芬酸钾软膏的体外累积释药率，并依次测定在不同温度和接收介质下软膏的累积释药率.

(1)测定温度选择

皮肤准备：取新鲜的小鼠鼠皮，用8%左右的硫化钠浸泡脱毛，脱毛后将鼠皮裁剪成适宜大小备用.

分别称取0.05 g软膏均匀涂抹于鼠皮上，以生理盐水为接收介质，置于Franz扩散池中，依次在36 ℃、37 ℃和38 ℃下测定药物9 h的体外累积释药率.结果显示，药物在37 ℃时累积释药率达到最大值.由此确定37 ℃为药物体外释放实验的测定温度，不同测定温度下药物的累积释药率如表2所示.

表2 不同测定温度下药物的累积释药率

(2)接收介质选择

皮肤准备：取新鲜的鼠皮，用8%左右的硫化钠浸泡脱毛，脱毛后将鼠皮裁剪成适宜大小备用.

分别称取0.05 g软膏均匀涂抹于鼠皮上，应用Franz扩散池在37 ℃下分别以生理盐水和pH=7.0的磷酸盐缓冲液为接收介质，以9 h的累积释药率为指标.结果表明，以pH=7.0的磷酸盐缓冲液为接收介质时药物的累积释药率要稍高于以生理盐水为接收介质时药物的累积释药率，由此选定pH=7.0磷酸盐缓冲液为药物体外释药实验的接收介质.不同接收介质下药物的累积释药率如表3所示.

表3 不同接收介质下药物的累积释药率

2.2.3 促渗剂筛选[11]

在经皮给药制剂中常用的促渗剂可分为7类：(1)Azone及其类似物；(2)亚砜类；(3)萜烯类；(4)有机溶剂类；(5)吡咯烷酮类；(6)表面活性剂类；(7)胺及酰胺类，本次研究选用Azone、乙酸乙酯和乙醇作为皮肤渗透促进剂，并且依次考察了不同浓度下3种促渗剂对药物体外累积释药率的影响.

皮肤准备：取新鲜的鼠皮，用8%左右的硫化钠浸泡脱毛，脱毛后将鼠皮裁剪成适宜大小备用.

应用Franz扩散池，在鼠皮上均匀涂抹含不同促渗剂的双氯芬酸钾软膏约0.20 g.接收液为pH=7.0的磷酸盐缓冲液，测定温度为37 ℃.每隔1 h吸取1 mL接收介质，同时向接收池中补加等体积的接收介质，以接收介质自身作为空白对照，在272 nm处测定吸光度，代入相应的标准方程，计算每小时软膏中药物的经皮累积释药率，结果显示如图2所示.

以Q对t做线性回归，回归方程的斜率即为透皮速率J(μg·cm-2·h-1)，含促渗剂组与空白组的J值之比为增渗倍数(ER)，各透皮参数如表4所示.

表4 不同促渗剂对双氯芬酸钾软膏体外透皮参数的影响

(a)不同浓度Azone对累积释药率的影响

(b)不同浓度乙酸乙酯对累积释药率的影响

(c)不同浓度乙醇对累积释药率的影响图2 不同浓度Azone、乙酸乙酯和乙醇对药物累积释药率的影响

由表4和图2可知，三种促渗剂(除1%乙醇)均能不同程度的发挥提高双氯芬酸钾软膏经皮释药的作用；在不同浓度和种类的促渗剂中5%乙酸乙酯的促渗效果最佳，其累积释药率高达90%以上，透皮速率为2.08μg·cm-2·h-1.

2.3 质量控制[12-14]

2.3.1 性状

本品为均匀、细腻、黏稠适宜的乳白色软膏.

2.3.2 耐热耐寒试验

制得的双氯芬酸钾软膏分别置于55 ℃干燥恒温箱中6 h和-4 ℃冰箱中24 h，结果显示软膏色泽均一，未出现油水相分层现象.

2.3.3 检查

应符合《中华人民共和国药典》2010版第二部软膏剂项下的各项规定.

3 讨论

综上所述，双氯芬酸钾软膏的处方组成为：双氯芬酸钾、硬脂醇、硬脂酸、液体石蜡、吐温-80、司盘-80、白凡士林、水、甘油、丙二醇和5%的乙酸乙酯.经皮给药制剂的体外释药与促渗剂的种类及其浓度有一定关系，除了本文研究的Azone、乙酸乙酯和乙醇外，还可以尝试使用天然低毒的挥发油类促渗剂或将几种促渗剂联合使用.

另外，对于软膏等经皮给药制剂的体外释药评价尚不明确，体外释药实验方法还有待于进一步标准化和规范化.

总之，当测定温度为37 ℃、接收介质为磷酸盐缓冲液(pH=7.0)时软膏的累积释药率高达90%以上和透皮速率为2.08μg·cm-2·h-1，可以达到实验设计的目的.

[1] 武复荣,杨佩琨,王英杰,等.双氯芬酸钾抗炎镇痛作用研究[J].山东医药工业,2003,22(1):50-52.

[2] 施桂英.认识双氯芬酸钾[J].中华全科医师杂志,2006,5(3):166-167.

[3] 吕弘道,陈梅竹.双氯芬酸钾用于早孕药物流产镇痛的临床观察[J].中国血液流变学杂志,2008,18(4):578-579.

[4] 羊小华,谢忠罗,段玲玲,等.双氯芬酸钾与对乙酰氨基酚用于小儿高热的效果比较[J].中国基层医药,2010,17(18):2 537.

[5] 车 辉.双氯芬酸钾预防放置宫内节育器(IUD)所致疼痛的效果[J].当代医学,2013,19(8):138.

[6] 符旭东,李海萍,付晓琴.双氯芬酸钾的临床应用及制剂研究进展[J].中华临床医药,2002,1(3):58-59.

[7] 周学敏,徐群为,张爱华.双氯芬酸钾凝胶、软膏及制备方法[P].中国专利：98111524.1,2000-4-12.

[8] 崔福德.药剂学[M].北京:人民卫生出版社,2011:210-245.

[9] 崔福德,毕开顺.现代药物制剂技术丛书[M].北京:人民卫生出版社,2007:88-125.

[10] 林婉红,李帼蓉,陈依群.紫外分光光度法测定双氯芬酸钾片的含量[J].广东药学,2002,12(3):13-14.

[11] 胡 英,陈心舒.不同透皮促进剂对双氯芬酸钾凝胶体外透皮效果的影响研究[J].中国药房,2009,20(19):1 468-1 469.

[12] 丁雄芳.双氯芬酸钾水凝胶的制备和质量评价[J].海峡药学,2010,22(4):21-22.

[13] 王本杰,李 波,张丽萍.双氯芬酸钾片人体生物等效性研究[J].山东医科大学学报,2000,38(9):260-263.

[14] 祁 智,郭 敏,向 一,等.双氯芬酸钾壳聚糖凝胶剂的制备与质量控制[J].医药导报,2007,26(1):62-64.