振源胶囊中人参皂苷Re含量测定方法分析

赵艳峰

振源胶囊中人参皂苷Re含量测定方法分析

赵艳峰

目的探讨振源胶囊中人参皂苷Re含量的测定方法和结果。方法使用Lichrospher C18色谱柱进行人参皂苷Re含量的测定，以乙腈-0.05%磷酸为流动相，柱温为35℃，流速为1mL•min-1，检测波长为203nm。结果振源胶囊中人参皂苷Re含量范围在0.308～1.540µg，加样回收率约为97.5%。结论由本次医学研究结果可知，使用高效液相色谱法对振源胶囊中人参皂苷Re含量进行检测，具有较高的准确性，是一种较为高效的临床检测方法。

振源胶囊；人参皂苷；Re含量；测定方法

振源胶囊是一种人参果实提取物皂苷研制而成的胶囊剂，该药物具有改善心脏功能，增强心肌收缩能力，缓解植物神经和内分泌功能紊乱症状，增强人体免疫调节能力、益智安神、滋补强壮等功能，临床上主要适用于更年期综合症及冠心病等疾病的临床治疗[1]。药品中人参皂苷含量测定结果是现阶段临床统一应用的质量评定标准，常用检测方法为薄层-比色法，但该方法供试品溶液的制备比较繁琐，且薄层色谱会受多种因素的影响，导致检测结果存在较大误差。本次研究对振源胶囊中人参果实的主要成分有效人参皂苷Re的含量进行了检测，通过高效液相色谱法的建立，对其结果进行了准确检测，此检测技术与常规的薄层-比色法相比，检测准确性更高、灵敏度更好、可重复性更强，且操作方法更加简便，因而应用价值更高。

1 试药与仪器

所用设备包括Empore色谱处理软件、Waters717自动进样器、Waters 2487紫外检测器和Waters1525泵。所用试药包括纯化水、分析纯、色谱纯为乙腈、吉林集安益盛药业公司生产的振源胶囊以及中国药品生物制品检定所提供的人参皂苷Re（100%纯度，批号110754-200320）[2]。

2 方法与结果

2.1 对照品溶液的制备取7.70mg人参皂苷Re作为精密对照品，在10ml量瓶中留置备用，于量瓶中加入甲醇溶解进行稀释并摇匀至准确刻度后，在5ml量瓶中取1ml溶液，并加入一定量的甲醇，摇匀后作为对照品溶液[3]。

2.2 色谱条件选择乙腈-0.05%磷酸作为流动相，Lichrospher C18为色谱分析柱，检测进样量为5µl，流速为 1mL•min-1，波长为 203nm。人参皂苷 Re色谱峰保留时间为39.8min左右，与左右邻峰间的分离度在1.5以上，理论板数在14000以上，色谱图如图1所示。

图1 人参皂苷Re、人参皂苷Rg1的HPLC色谱图

2.3 制备供试品溶液取0.5g振源胶囊内容物，精确加入20ml水饱和正丁醇液，连续20min进行超声处理，过滤，将初滤液去除，取10ml续滤液，并使用10 ml氨试液进行洗涤。减压浓缩正丁醇液直至完全干燥，在残渣中加入适量的甲醇以稀释溶液，将其置于10ml量瓶中，将甲醇控制在刻度处，摇匀，通过微孔滤膜过滤，留取续滤液。

2.4 样品含量测定精密获取5µl供试品溶液和对照品溶液，根据色谱条件的检测结果，通过外标法对样品中人参皂苷Re的含量进行计算，如表1所示。

表1 样品含量检测结果

2.5 溶液稳定性测试取“2.4项”中所制备的溶液，在室温常规留置0、2、4、8、12h后，5次进样测试计算获得的RSD峰面积为1.1%，12h内稳定留置样品。

2.6 加样回收率测试在含量已知的样品中，加入0.8、1.0、1.2ml精确剂量的人参皂苷Re对照品溶液，待甲醇挥发干净后，根据“2.3项”中制作而成的溶液，按照色谱条件测定的相关规定，对加样回收率进行计算，如表2所示。

表2 加样回收率测试结果

2.7 线性关系测试精确量取 2、4、6、8、10µl人参皂苷 Re对照品溶液，将其分别置于液相色谱仪中，对色谱峰面积进行准确记录，计算出人参皂苷Re的回归方程为r=019999，Y=47201X-1525。在0.308～1.540µg范围内人参皂苷Re具有良好的线性关系。

3 讨论

根据目前临床上统一推行的质量标准，受到薄层-色谱法等因素的影响，振源胶囊中人参皂苷 Re不易被分离，因而需要对其含量进行测定。而常规的高氯酸溶液和香荚兰醛-冰醋酸显色剂，具有较大的检测误差，且溶液显色的稳定性较差。本研究结果证实，人参皂苷Re是人参果实中的主要有效成分，通过高效液相色谱法对振源胶囊人参皂苷Re含量进行测定，具有较高的应用价值。

[1] 祖双,李兴奎.人参发酵油软胶囊中人参总皂苷含量测量方法[C].2012年中国药学大会暨第十二届中国药师周论文集,2012.

[2] 吴越,魏晓姝,丁晴.HPLC法测定振源胶囊中人参皂苷Re的含量[J].药学与临床研究,2007,15(4):332-333.

[3] 易艳奎,邓红珠,李月辉,等.高效液相色谱法测定双参龙胶囊中人参皂苷Re含量的研究[J].时珍国医国药,2008,19(4):987-988.

R927.2

A

1673-5846(2014)01-0041-02

吉林省集安益盛药业，吉林通化 134200