邓常春
临床细菌感染是细菌与机体相互作用的一种主要形式,人体的免疫力是针对细菌致病力主要的抑制和抵抗因素,但有时也是机体组织损伤的原因之一。致病菌入侵机体后,主要会发生两种的反应,一种是在机体建立感染,另一种是激发宿主的免疫系统迅速的发生一系列免疫反应以对抗感染,在这个过程中,淋巴细胞是产生免疫应答的主要功能细胞,它在抵抗细菌感染中发挥了重要作用。从很大程度上来说,淋巴细胞的数量越多,机体的免疫功能就越强,因此淋巴细胞及其亚群的测定能够作为反映机体免疫功能状态的一个重要指标,为临床诊断和治疗提供一定的依据。为了对不同细菌种属感染患者机体内免疫功能的变化进行分析和探讨,本研究选择60 例细菌感染患者,回顾性分析其外周血的淋巴细胞亚群的测定情况,并通过分析找出不同细菌种属感染患者血液中淋巴细胞亚群的变化规律,以期为临床细菌感染的治疗提供可靠的参考和依据,现将具体临床研究报道如下。
1.1 一般资料 随机选取2012年8月~2013年3月在韶关市第一人民医院进行治疗的60 例细菌感染患者作为感染组,所有患者经检查均符合世界卫生组织WHO 诊断标准,确诊为病原菌感染者,其中男45 例,女15 例,年龄15~60 岁,平均年龄(38±21)岁。本组患者均为常见病毒感染,患者除感染外没有其它会对机体免疫功能产生影响的疾病,且患者的免疫学及基因诊断资料和淋巴细胞亚群检测资料都齐全。选择同期在本院进行体检的健康者400 例作为对照组,其中男296 例,女104 例,年龄14~61 岁,平均年龄(42±22)岁。2 组研究者在性别、年龄、体质量等方面比较差异无统计学意义,具有可比性。
1.2 主要仪器和试剂 本次研究的仪器采用由法国梅里埃提供的细菌鉴定/药敏分析仪V 1TE K 2.Com pact,并选择由美国贝克曼库尔特有限公司提供的流式细胞仪。试剂选择由法国梅里埃公司提供的革兰阴性菌鉴定卡GN 和革兰阳性菌鉴定卡GP,由中山大学达安基因股份有限公司提供的各类病毒DNA及RNA 测定试剂盒,还有由美国BECK-MAN-COULTER公司提供的同型对照抗体IgG 1-FITC/IgG 1-PE/IgG-PC 5,测定抗体CD 3-PC 5/CD 16/56-FITC、CD 3-FITC/CD 19-PE 还有CD 3-PC 5/CD 4-FITC/CD 8-PE,以及标本预处理试剂和Flow-Count 标准荧光微球等。
1.3 实验方法 在晨起后空腹对所有细菌感染患者抽取2 mL 静脉血液置于EDTA.K2 提前抗凝的试管中,然后采用美国贝克曼库尔特流式细胞仪对其进行ED-TA-K2抗凝,以参考文献[2-3]中的具体检测方法为参照进行操作。
1.4 统计学方法 采用SPSS 15.0 统计软件对统计所得的具体数据进行分析,所有正态计量资料用均t 检验,所有正态计量资料用“±s”表示,计数资料比较采用χ2检验,P<0.05 为差异有统计学意义。
2.1 2 组研究对象淋巴细胞亚群检测结果比较分析 对2组研究对象感染组淋巴细胞亚群检测结果进行比较,由表中数据可知,感染组患者的T 4 细胞、T 8 细胞均明显高于对照组,且2组相比差异具有显著性(P<0.01);而其T 4/T 8 值、DN-T 细胞数值也明显高于对照组,且2 组相比差异具有显著性(P<0.05);2 组研究对象的总T 细胞、DP-T 细胞、B 细胞还有NK 细胞进行比较差异无统计学意义(见表1)。
2.2 不同细菌种属感染患者淋巴细胞亚群检测结果 感染组患者淋巴细胞亚群检测结果见表2,由表中数据可知,本组30 例细菌感染患者中,葡萄球菌感染患者有10 例,链球菌感染患者有8 例,与对照组相比,感染组患者各淋巴细胞亚群间比较差异均无统计学意义;铜绿假单胞菌感染患者有6 例,与对照组相比,感染组患者的T 8 细胞、B 细胞水平较高,而T 4 细胞、T 4/T 8 值、NK 细胞数值则较低,且2 组相比差异具有显著性(P<0.05);不动杆菌感染患者有4 例,与对照组相比,感染组患者的T 8 细胞水平较高,T 4 细胞、T 4/T 8 值、NK 细胞数值则较低,且2 组相比差异具有显著性(P<0.05);克雷伯菌感染患者有12 例,肠杆菌感染患者有8 例,与对照组相比,感染组患者的T 8 细胞水平较高,T 4 细胞、T 4/T 8 值则较低,且2 组相比差异具有显著性(P<0.05);结核杆菌感染患者有12 例,与对照组相比,感染组患者的NK 细胞水平较高,T 4 细胞、T 4/T 8 值则较低,且2 组相比差异具有显著性(P<0.05)。
表1 淋巴细胞亚群检测结果
表2 不同细菌种属感染患者淋巴细胞亚群检测结果
在机体免疫功能系统中,淋巴细胞是最重要的一个细胞群,当人的身体状况处于正常水平的情况下,各种淋巴细胞亚群的数量和比例都会保持一定,并通过相互之间的作用进行调节和平衡,进而使机体能够维持正常的免疫功能。而如果机体的淋巴细胞亚群的数量或功能出现异常的改变的时候,机体的免疫功能就会受到影响,进而出现一系列的病理变化,在这种情况下就为细菌以及病毒等病原物质入侵机体创造了机会。
在本组研究中,60 例S 细菌感染患者中其中感染菌种最多的是克雷伯菌和结核杆菌,其次为葡萄球菌、肠杆菌。且患者的机体免疫功能在不同细菌种属感染下有着不同的反应表现。由表1我们可以看出,感染组T 4 细胞低于对照组,而T 8 细胞却高于对照组,T 8 细胞是Tc 细胞介导反应的效应细胞,它能够同时抑制B 细胞产生抗体以及Th 细胞产生IL-2,其数量的增多表示机体的免疫受到了抑制;另外,T 4/T 8 的比值所表示的是Th与Ts 之间功能的平衡状态,感染组与对照组相比有所下降,这又为机体免疫功能下降提供了一个依据,说明细菌感染会引起患者自身免疫功能的降低,影响患者的抵抗力。
DN-T 细胞和DP-T 细胞这两种细胞的作用就是对细菌感染后T 细胞分化发育及其细胞的功能状态进行体现和反映,在本组研究中,与对照组相比,不动杆菌感染者的DN-T 细胞和DP-T 细胞有所降低,提示感染组的T 细胞分化发育受到抑制,细胞功能障碍;另外,NK 细胞降低提示感染者非特异性免疫功能也有所降低。B 细胞不仅参与抗原提成和分泌细胞因子凋节免疫,同时还可以通过产生抗体作为体液免疫的介导,这有利于机体对胞外细菌感染的抵抗作用。在本组研究中,从表1 可以看出,感染组与对照组的B 细胞数相比无统计学意义,此现象可能与感染细菌种属较多有关;而在表2 中,我们可以看出,铜绿假单胞菌感染的患者其B 细胞明显高于对照组,且差异具有统计学意义(P<0.05),这说明感染铜绿假单胞菌的患者在受到细菌侵染后,机体内部体液免疫的功能有所增强。
NK 细胞属于固有免疫细胞,是抗肿瘤免疫的第一道防线,不需要抗原预先致敏就可以直接杀伤肿瘤细胞、病毒及寄生菌感染的靶细胞,并且还可以通过分泌IFN-γ 和TNF-α 等细胞因子促进机体的免疫调节作用,对于机体保持正常也起到了关键作用[5]。从表1 中我们可以看出,感染组患者NK 细胞水平与对照组相比无显著差异,这可能是因为本组患者均未发生病毒感染。刘艳华等[6]通过研究指出结核杆菌感染患者的NK 细胞水平会发生升高,这刚好与本次研究结果一致。究其原因,可能是因为结核杆菌属于胞内寄生菌,主要寄生在细胞的内部,因此会促使非特异性免疫相对提高,而体液免疫和细胞免疫都有所下降[7]。另外,通过研究我们还发现,机体在遭受大部分细菌的感染之后其免疫功能都或多或少的受到抑制,但是链球菌感染者和葡萄球菌感染者的各淋巴细胞亚群并没有受到很明显的影响,2 组比较差异无统计学意义,这可能是因为本次研究样本例数较少,建议选择更多的样本例数进入深入研究。
淋巴细胞是免疫功能细胞,在抗感染尤其是细菌感染中发挥了非常重要的作用。当机体处于正常状态时,体内的淋巴细胞亚群保持着一定的数量和比例,使机体的免疫功能得到平衡和稳定。但是在外源性病原微生物的侵袭下,机体的免疫平衡被打破,致使体内的各淋巴细胞亚群在数量和比例上出现异常,这就为临床提供了可靠的治疗依据。
[1]吴丽娟.临床流式细胞学检验技术[M].人民军医出版社,2010:81,86-87,121,126.
[2]莫杨,许小东.流式细胞术检测体液T 淋巴细胞亚群的临床应用[J].国际检验医学杂志,2010,31(11):50-51.
[3]王宏涛,张章,范萌,等.CD 112(Nectin 2/PRR 2)在结肠癌的表达及其临床意义[J].细胞与分子免疫学杂志,2010,26(9):477-479.
[4]Tupin E,KinjoY,Kronenberg M .The unique role of natural killer Tcells in the response to microorganisms[J].Natrue Rev Micro,2007,5(5):405-417.
[5]刘艳华,王心静,曹志红,等.结核病患者外周血iNKT 细胞的数量显著降低[J].细胞与分子免疫学杂志,2010,26(10):1017-1019.
[6]邹自英,朱冰,吴丽娟,等.不同种属细菌感染患者机体免疫功能变化的实验研究[J].实验与检验医学,2011,29(6):605-608.
[7]包东武.不同细菌种属感染患者机体免疫功能变化分析[J].中国实用医药,2013,8(11):107-108.