育龄妇女红细胞叶酸水平的检测分析

冯月华 吴小璐 梁法亮

（江门市妇幼保健院，广东 江门 529000）

育龄妇女红细胞叶酸水平的检测分析

冯月华 吴小璐 梁法亮

（江门市妇幼保健院，广东 江门 529000）

目的检测本地区育龄妇女红细胞叶酸水平，分析其影响因素，为本地区制定育龄及孕期妇女增补叶酸预防NTDs的方案提供依据。方法募集53例健康育龄妇女志愿者，抽取静脉血4 mL，化学发光免疫分析仪检测红细胞叶酸水平。结果53例育龄妇女的平均红细胞叶酸水平为（788.6±204.0）nmol/L，有32例浓度低于预防NTDs的最低水平906 nmol/L，占总例数的60.4%。文化程度高者，其浓度低于预防NTDs的最低水平的人群比例渐降。结论本地区育龄妇女红细胞叶酸水平大多低于预防NTDs的最低水平，应加强对孕前增补叶酸相关知识的宣教。

叶酸；育龄妇女；红细胞叶酸水平；神经管畸形

叶酸是一种广泛存在于绿色蔬菜中的水溶性B族维生素，对细胞的分裂生长及核酸、氨基酸、蛋白质的合成起着重要的作用[1]。胎儿神经管畸形（neural tube defects，NTDs）是一组严重影响胎儿大脑和脊髓发育的先天畸性，可能的病因主要包括叶酸缺乏、叶酸代谢路径发生异常等[2]。研究表明，育龄妇女孕前增补叶酸对NTDs具有很好的预防作用[3，4]。但叶酸水平的个体差异大，各地妇女红细胞叶酸水平现状不一。本文通过检测本地区53例育龄妇女的红细胞叶酸水平，观察其低于预防NTDs最低水平（906 nmol/L）的人群比例，分析影响个体红细胞叶酸水平的因素，为江门地区育龄妇女叶酸水平调查，以及制定育龄及孕期妇女增补叶酸预防NTDs等出生缺陷的方案提供依据。

1 对象与方法

1.1 研究对象

募集53例健康育龄妇女志愿者，纳入标准为：①于江门地区工作生活达2年或以上；②年龄20～35岁；③体质量40～62 kg；④无吸烟、酗酒史；⑤无服食精神类药物史；⑥无慢性肝、肾疾病及血液病等；⑦治疗期间保证不服食其他药物。对研究对象的资料保密，并签署书面知情同意书。

1.2 检测方法

①仪器与试剂：DPC Immulite 2000全自动化学发光免疫分析仪（德国Siemens），全自动血细胞分析仪（法国Horiba ABX），叶酸测定试剂盒（化学发光法，包括检测试剂、叶酸定标品、冲洗缓冲液、红细胞缓冲液、底物和质控品）（美国Beckman）。②样品收集与处理：使用肝素抗凝真空管采集空腹静脉血4 mL，溶血前取适量于全自动血细胞分析仪检测红细胞比容（HCT/%）并记录。全血样本溶血检测前可于2～8 ℃最多保存4 h。将红细胞叶酸溶血剂用25 mL去离子水复溶，放置至少40 min，直到完全溶解。慢慢的颠倒混匀全血标本数次以确定完全混匀后，吸取50 μL全血加入到1 mL溶血剂中进行溶血。慢慢的颠倒混匀数次并在室温下避光保存至少90 min以使其稳定，此溶血液可在3 h内使用全自动化学发光免疫分析仪检测叶酸含量或在-20 ℃下保存30 d。③检测方法：准备叶酸定标品S0、S1、S2、S3、S4和S5，浓度分别约为0、2.3、5.7、11.3、22.7和45.3 nmol/L，根据说明书进行设置定标、定标要求的输入和回顾定标数据等内容，检测各定标品的光量子值，根据光量子值和已知浓度之间的数学关系建立定标曲线。叶酸检测试剂于2～10 ℃下保存2 h后才置于仪器使用，每个血液样品设置3个复孔，根据仪器操作指南设置参数，检测各样品孔的光量子值，并根据存储的定标曲线自动计算叶酸含量。

表1 不同年龄组育龄妇女红细胞叶酸水平

表2 不同居住地育龄妇女红细胞叶酸水平

表3 不同文化程度育龄妇女红细胞叶酸水平

红细胞叶酸含量（RBC Folate/nmol/L）：检测结果乘以溶血液制备时的稀释倍数21，将此结果除以该样品的红细胞比容。

1.3 统计学方法

用SPSS13.0统计软件进行统计学的分析；计量资料用均值±标准差（x¯±s）表示，组间比较用t检验，数据处理前经正态性检验及方差齐性检验，显著性水平定为双侧P ＜ 0.05。

2 结 果

2.1 不同年龄组育龄妇女红细胞叶酸水平

53例育龄妇女中，年龄组20～30岁有34例，年龄超过30岁的有19例，两年龄组的红细胞叶酸含量相比没有显著性差异。年龄组20～30岁的34例中，有21例浓度低于预防胎儿神经管畸形的最低水平906 nmol/L，比例为61.8%。年龄超过30岁的19例中，有11例浓度低于906 nmol/L，比例为57.9%。见表1。

2.2 不同居住地育龄妇女红细胞叶酸水平

53例育龄妇女中，20例居住地为农村，33例居住地为城市，两组的红细胞叶酸含量相比没有显著性差异。但农村组中红细胞叶酸含量低于906 nmol/L的有13例，比例为65.0%，明显高于城市组的57.6%。见表2。

2.3 不同文化程度育龄妇女红细胞叶酸水平

文化程度在初中及以下的育龄妇女有12例，高中组的有20例，两组的红细胞叶酸含量没有显著性差异，大专及以上组的平均红细胞叶酸含量比前两组高，具有显著性差异（P＜0.05）。三组中红细胞叶酸含量低于906 nmol/L的比例分别为66.7%、60.0%和57.1%，文化程度高者，其比例渐降。见表3。

3 讨 论

我市出生缺陷发生率近几年也居高不下，据市新筛中心对新生婴儿的筛查，我市2007年的出生缺陷发生率为111.6/万，2008年为112.6/万，2009年为143.2/万。因此，实施出生缺陷“三级干预措施”，加强叶酸增补预防NTDs的宣教，将优生知识普及到基层迫在眉睫。

本研究53例育龄妇女的平均红细胞叶酸水平为（788.6± 204.0）nmol/L，有32例浓度低于预防NTDs的最低水平906 nmol/L，占总例数的60.4%。不同年龄组和不同居住地组的红细胞叶酸水平没有明显差异，但30岁以上者和居住在城市的育龄妇女中浓度低于预防NTDs的最低水平的比例相对较低，这一方面可能是由于本研究中的19例30岁以上者和33例居住于城市的多为学历较高，对增补叶酸的认知程度深；另一方面可能是膳食结构、生活习惯以及对保健知识的认知程度等的不同而导致。文化程度越高，红细胞叶酸水平越高，浓度达到906 nmol/L的比例数也越高，其中农村育龄妇女的文化程度较低者居多，主要原因可能是不同文化程度妇女的保健知识水平、来源途径不同，从而对叶酸知识的掌握程度不同。此外，本文所检测的例数较少，难以形成大样本的统计数据以作影响因素分析，后续研究中可考虑抽区江门市三区四辖市的育龄及孕期妇女做研究样本，对其红细胞叶酸水平以及增补叶酸预防胎儿NTDs的知晓率以及态度、行为的基础数据进行收集统计，为实施增补叶酸预防NTDs的干预措施提供科学依据，指导增补叶酸预防NTDs的方案制定。

食物中叶酸分布广泛，以肝脏、绿叶蔬菜、豆类及水果含量最丰富，但叶酸极易被光、热破坏，在食物贮存加工过程中损失率达80%，且生物利用率仅为45%左右，因此烹调不当、贮存损失等会导致叶酸利用率低[5]。我国于2009年发布的《增补叶酸预防神经管缺陷项目管理方案》中提出，一般待孕妇女从怀孕前3个月至怀孕后3个月以0.4 mg/d的剂量增补叶酸。因此，育龄妇女在计划怀孕时，除了日常生活注重膳食结构外，还须通过口服叶酸制剂，体内的红细胞叶酸水平才可达到预防NTDs的最低水平。

[1] Czeizel AE,Dudas I,Vereczkey A,et al.Folate deficiency and folic acid supplementation: the prevention of neural-tube defects and congenital heart defects[J].Nutrients,2013,5(11):4760-4775.

[2] 谭春英,王燕,楚严,等.孕妇红细胞叶酸水平与胎儿出生缺陷发病关系的研究[J].中国优生与遗传杂志,2011,19(8):81-83.

[3] 王珊,潘新娟,余增丽.妊早期妇女血清叶酸水平与胎儿出生缺陷发病关系的队列研究[J].中国妇幼保健,2012,27(33):5266-5268.

[4] 沈佩芳,胡惠敏.叶酸预防胎儿神经管缺陷的效果观察[J].中国药业,2011,20(11): 67-68.

[5] Osterhues A,Ali NS,Michels KB.The role of folic acid fortif i cation in neural tube defects: a review[J].Crit Rev Food Sci Nutr,2013,53(11): 1180-1190.

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1671-8194（2014）21-0194-03