自然不孕和健康体检的育龄妇女孕前TORCH感染状况的比较分析*

王万海，张一帆，常谦，孟宪春，魏高辉，李阳，明亮(郑州大学第一附属医院检验科 河南省检验医学重点实验室，郑州 450052)

弓形虫(Toxoplasmagondii, Tox)、风疹病毒(rubella virus, RV)、巨细胞病毒(cytomegalovirus, CMV)和单纯疱疹病毒Ⅰ/Ⅱ型(herpes simplex virus Ⅰ/Ⅱ,HSV Ⅰ/Ⅱ)是一组可导致先天性宫内感染的病原体，合称为TORCH，所引起的感染称之为TORCH感染[1-2]。人群普遍对TORCH病原体易感，而成人感染后临床表现一般较轻，可表现为一过性发热、乏力、皮疹，大部分无特异性临床表现或临床症状轻微，容易忽视，但孕妇感染后病原体可通过胎盘或产道感染胎儿或者新生儿，可能导致流产、早产、畸胎、死胎、宫内发育迟缓、新生儿多器官损害等不良预后[3]。对于多数孕期TORCH感染，目前尚缺乏有效的治疗手段，因此，加强孕前、产前TORCH感染监测至关重要，有助于避免相关不良妊娠结局的发生，提高出生人口素质。本研究将对婚后拟生育中的自然不孕接受医学干预受孕和健康体检的育龄妇女孕前TORCH感染状况进行分析，以了解本区域育龄期妇女感染情况及两人群中TORCH感染的特点和差异。

1 资料与方法

1.1研究对象 收集2018年12月—2019年11月因自然不孕(夫妇正常同居1年，未采取过避孕措施而未妊娠者，为自然不孕者)来郑州大学第一附属医院生殖医学中心进行医学干预受孕的育龄妇女11 597名，年龄(31.5±5.3)岁，年龄范围20～49岁。另收集同期来我院孕前咨询健康体检的育龄妇女1 547名，年龄(29.4±4.6)岁，年龄范围20～48岁。孕前咨询健康体检育龄妇女群体年龄整体偏小，与自然不孕育龄妇女相比，年龄差异具有统计学意义(t=15.19，P<0.000 1)。

1.2试剂和仪器 肝素锂抗凝负压真空采血管(美国BD公司)，TORCH各病原体IgM抗体和IgG抗体检测试剂盒(意大利ADALTIS公司)；Multiskan MK3型酶联仪(上海赛默飞世尔公司)。

1.3标本采集 清晨空腹(禁食8～12 h)状态，用肝素锂抗凝负压真空采血管采集外周静脉血2～3 mL，无溶血、胆红素血现象和脂血等不合格情况的标本。4 h内完成离心(3 000 r/min，离心10 min)，分离血浆后于12 h内分别完成TORCH各病原体IgM抗体和IgG抗体检测。

1.4试剂和仪器 采用ELISA测定，TORCH各病原体IgM抗体的检测采用捕获法，IgG抗体采用双抗体夹心法，在Multiskan MK3型酶联仪上进行检测。操作步骤和结果判断按试剂盒说明书进行。

2 结果

2.1TORCH检测结果 11 597名自然不孕育龄妇女TORCH IgM抗体总阳性率为2.42%，而1 547名孕前健康体检的育龄妇女TORCH IgM抗体总阳性率为2.26%，差异无统计学意义(χ2=0.15，P=0.70)。

2.2不同群体TORCH检测结果 自然不孕育龄妇女TORCH各病原体IgM抗体阳性率普遍稍高于孕前咨询健康体检育龄妇女(除RV-IgM抗体外)，但差异均无统计学意义，见表2。在自然不孕育龄妇女中，Tox-IgM抗体阳性率最高(0.99%)，RV-IgM抗体阳性率次之(0.67%)，而CMV-IgM抗体阳性率最低(0.20%)。在孕前咨询健康体检的育龄妇女RV-和Tox-IgM抗体阳性率较高(均为0.90%)，而CMV-IgM抗体阳性率最低(0.06%)。

在TORCH各病原体IgG抗体中，自然不孕育龄妇女的Tox-、RV-、CMV-、HSV Ⅰ-和HSV Ⅱ-IgG抗体阳性率均高于健康体检的育龄妇女，而且自然不孕育龄妇女与健康体检育龄妇女相比较差异均有统计学意义(除Tox-IgG抗体外)。见表1。

表1 自然不孕和健康体检育龄妇女中TORCH感染结果比较[n(%)]

2.3不同年龄段TORCH感染 按相同的年龄区间进行分组，20～35岁为低龄组，>35岁为高龄组。自然不孕育龄妇女低龄组9 013名(77.72%)，高龄组2 584名(22.28%)；健康体检育龄妇女低龄组1 328名(85.84%)，高龄组219名(14.16%)。自然不孕育龄妇女和健康体检育龄妇女年龄段间人群间比例差异有统计学意义(χ2=53.71，P<0.000 1)。

在TORCH各病原体IgM抗体阳性率方面，不管在自然不孕育龄妇女中，或是在健康体检育龄妇女中，其低龄组和高龄组间差异均无统计学意义。而在TORCH各病原体IgG抗体阳性率方面，其高龄组的Tox-、CMV-、HSV Ⅰ-和HSV Ⅱ-IgG抗体阳性率普遍高于低龄组，其中在健康体检育龄妇女的高龄组中HSV Ⅰ-IgG抗体阳性率高于低龄组(χ2=4.15，P=0.042)，在自然不孕育龄妇女的高龄组中HSV Ⅰ-和HSV Ⅱ-IgG抗体阳性率均高于低龄组(χ2=9.82，P=0.001 7；χ2=50.59，P<0.000 1)；但RV-IgG抗体阳性率均为低龄组高于高龄组(自然不孕：χ2=19.52，P<0.000 1，健康体检：χ2=9.95，P=0.001 6)。

在低龄组，除RV-IgM抗体外，不管TORCH各病原体IgM抗体或者IgG抗体，自然不孕育龄妇女阳性率普遍高于健康体检育龄妇女，而且RV-、CMV-、HSV Ⅰ-和HSV Ⅱ-IgG抗体间的阳性率差异有统计学意义。见表2。

表2 自然不孕和健康体检育龄妇女中20～35岁年龄组间TORCH IgG抗体感染结果比较[n(%)]

在高龄组，Tox-IgM、RV-IgG、CMV-IgM和IgG抗体、HSV Ⅱ-IgM和IgG抗体的阳性率与其人群低龄组具有相同趋势，均表现为自然不孕育龄妇女普遍高于健康体检育龄妇女，而且RV-和HSV Ⅱ-IgG抗体间的阳性率差异有统计学意义。但Tox-IgG、RV-IgM、HSV Ⅰ-IgM和IgG抗体的阳性率抗体阳性率却为健康体检育龄妇女普遍高于自然不孕育龄妇女。见表3。

表3 自然不孕和健康体检育龄妇女中>35岁年龄组间TORCH IgG抗体感染结果比较[n(%)]

2.4不同季节TORCH IgM抗体阳性情况 对春季(3～5月)、夏季(6～8月)、秋季(9～11月)和冬季(2018年12月～2019年2月)中TORCH各病原体IgM抗体阳性率进行分析，仅自然不孕育龄妇女中Tox-和CMV-IgM抗体的阳性率在季节间差异有统计学意义；而RV-、HSV Ⅰ-和HSV Ⅱ-IgM抗体的阳性率在季节间差异无统计学意义。在季节间具有显著差异的Tox-IgM抗体的阳性率在夏季和秋季较高(分别为1.47%和1.69%)，CMV-IgM抗体阳性率在夏季较高(0.49%)。而在健康体检育龄妇女中，TORCH各病原体IgM抗体阳性率在季节间差异无统计学意义(见表4)。在自然不孕和健康体检育龄妇女两人群间进行季节间比较，其相同季节间差异均无统计学意义。

表4 自然不孕与健康体检育龄妇女季节间TORCH IgM抗体感染结果比较[n(%)]

3 讨论

TORCH感染具有隐匿性，母体感染时临床表现轻微，不易识别，易被忽略，严重危害母婴健康；而且育龄期妇女由于自身免疫功能的改变，易发生TORCH感染[4]。目前，TORCH诊断仍以实验室血清学体检为主要依据，主要检测血清中特异性IgM和IgG抗体。通常机体感染TORCH病原体后，3～7 d产生IgM抗体，1个月后逐渐转阴，约存在2～3个月，是近期感染或复发感染的指标。IgG抗体出现晚于IgM抗体，感染后约15 d出现，浓度逐渐上升，1～2个月可达高峰，以后逐渐下降，可维持终生，是既往感染的指标。本研究对婚后拟生育中的自然不孕接受医学干预受孕和健康体检的育龄妇女孕前TORCH感染状况及相关资料进行分析，从而为相关部门的干预工作提供参考依据，提高孕前优生优育健康体检服务的针对性。

本研究显示，自然不孕接受医学干预孕前育龄妇女的TORCH-IgM抗体总阳性率为2.42%，高于同时期健康体检的孕前育龄妇女总阳性率2.26%，其差异无统计学意义，但均低于国内流行病调查的正常育龄人群TORCH感染率(3.8%～17.2%)[1,5]。两人群中TORCH各病原体特异性IgM抗体检测阳性率从高到低分别是Tox-IgM(0.99%和0.90%)、RV-IgM(0.67%和0.90%)、HSV Ⅰ-IgM(0.34%和0.26%)、HSV Ⅱ-IgM(0.22%和0.13%)和CMV-IgM(0.20%和0.06%)，尽管自然不孕育龄妇女各病原体IgM抗体阳性率普遍稍高于孕前咨询健康体检育龄妇女，但其差异也均无统计学意义。而各病原体特异性IgG抗体检测阳性率从高到低分别是CMV-IgG(96.20%和93.47%)、HSV Ⅰ-IgG(93.39%和91.40%)、RV-IgG(90.87%和88.49%)、HSV Ⅱ-IgG(14.26%和9.18%)和Tox-IgG(4.44%和4.40%)，除Tox-IgG抗体外，两类育龄妇女人群间的TORCH IgG抗体阳性率差异均有统计学意义。这些结果不仅进一步验证了CMV、HSV Ⅰ和RV为常见感染病原体[5-8]，而且也表明两类人群中大部分育龄妇女对CMV、HSV Ⅰ和RV病原体有免疫力，但仍有少数人群属于易感人群。

Tox是一种常见的人畜共患病病原体，普遍存在于猫、狗等动物体内。其人与人之间可相互传染，食用被其感染的食物和水(主要传染源)或接触猫和狗粪等过程易被感染[9]。本研究中自然不孕和健康体检的孕前育龄妇女人群均存在较高的Tox感染，而且Tox-IgG阳性率高于全国平均水平3.04%[10]，这也可能与近年来家庭饲养宠物越来越多有关。在一年四季中，夏季和秋季表现为较高Tox-IgM抗体阳性率，而且自然不孕育龄妇女中差异具有统计学意义。这些说明天气炎热与生食食物等不良饮食习惯与Tox感染相关[11-12]。

RV为RNA病毒，主要通过呼吸道感染，后经淋巴蔓延至血液，人是其唯一宿主。RV易发生垂直感染，孕妇妊娠早期初次感染RV后，病毒可通过胎盘屏障进入胎儿，常可造成流产或死胎，还可导致胎儿发生先天性风疹综合征，引起胎儿畸形[8]。在TORCH各病原体IgM抗体阳性率中，两类人群中均存在较高的RV阳性率，而且孕前咨询健康体检育龄妇女普遍高于自然不孕育龄妇女(不论整体人群间还是年龄组间，但均无统计学差异)。在RV-IgG阳性率中，自然不孕育龄妇女显著性高于健康体检育龄妇女。在一年四季中，RV-IgM和RV-IgG抗体阳性率在两类人群中季节间差异也均无统计学意义。

CMV为线性双链DNA病毒，人是其唯一的自然宿主，主要通过接触被感染者的唾液、分泌物、尿液和乳汁等途径感染，也可经胎盘或输血、移植等发生医源性感染。孕妇感染CMV可引起新生儿宫内或围产期感染，病毒经胎盘进入胎儿体内，可导致胎儿出现智力低下、视力受损、听力丧失等症状[5-6]。两个人群间、年龄段间和季节间进行比较，仅CMV-IgM抗体阳性率在自然不孕育龄妇女中的四季间差异有统计学意义，而CMV-IgM抗体和CMV-IgG比较差异均无统计学意义。

HSV有2个血清型，即HSV Ⅰ和HSV Ⅱ。HSV Ⅰ主要经呼吸道、皮肤、黏膜等途径感染，引起口腔炎、角膜炎等。HSV Ⅱ主要通过性传播，是引起生殖器疱疹和新生儿疾病的主要病原体。孕妇在怀孕早期被感染，会引起胎儿先天性感染，导致流产、死胎等；后期感染在分娩时可经生殖道将病毒直接传染给胎儿[13]。本研究对此两类人群中HSV Ⅰ和HSV Ⅱ新近感染检测发现其IgM阳性率差异均无统计学意义(年龄段间和季节间)。但HSV Ⅰ-和HSV Ⅱ-IgG阳性率却为自然不孕育龄妇女显著性高于健康体检育龄妇女。

综上所述，自然不孕育龄妇女和健康体检育龄妇女中TORCH的近期感染没有显著性差异，均存在较高的Tox和RV病原体感染；而且两类人群中存在较高的CMV、HSV Ⅰ和RV病原体既往感染，自然不孕育龄妇女显著性高于健康体检育龄妇女。因此，在自然不孕和健康体检育龄妇女孕前仍需注重TORCH的预防措施，对处于易感因素条件下的备孕的育龄人群应加强TORCH筛查，做到早发现、早干预、早治疗，有效降低先天性新生儿出生缺陷率，将有助于提高整体人口素质。