川崎病患儿血清IL-10、IL-18和TNF-α与冠状动脉损伤的关系

刘 霞，王 鹰，何 睛

（桂林市人民医院检验科，广西 桂林 541002）

川崎病患儿血清IL-10、IL-18和TNF-α与冠状动脉损伤的关系

刘 霞，王 鹰，何 睛

（桂林市人民医院检验科，广西 桂林 541002）

目的探讨川崎病(KD)患儿外周血血清白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-18(IL-18)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的动态改变及其与冠脉损伤的关系。方法选取我院2009年1月至2012年12月期间住院的KD患儿73例，根据冠状动脉损伤情况分为无冠状动脉损伤组(NCAL组)和伴冠状动脉损伤组(CAL组)，以同期门诊体检健康儿童30例作为正常对照。采用ELISA法检测患儿血清IL-10、IL-18和TNF-α水平，并与正常对照组进行比较分析，其中KD患儿分别于急性期和亚急性期各检测一次。结果KD患儿急性期和亚急性期的血清IL-10、IL-18和TNF-α水平均显著高于对照组，KD急性期的IL-10、IL-18和TNF-α水平均显著高于其亚急性期(P＜0.01)。IL-10水平在NCAL组显著高于CAL组，CAL组显著高于对照组；CAL组的IL-18和TNF-α水平显著高于NCAL组，NCAL组显著高于对照组(P＜0.01)。结论IL-10、IL-18和TNF-α可作为KD早期诊断的重要指标，动态观察其浓度变化具有预测冠状动脉损伤的价值。

川崎病；白细胞介素-10；白细胞介素-18；肿瘤坏死因子-α；冠状动脉损伤

川崎病(KD)又称皮肤黏膜淋巴结综合征，是一种急性发热性系统性血管炎综合征，冠脉损伤是最严重的并发症，其发病机制较复杂，免疫系统的高度活化和免疫损伤性血管炎是KD的显著性特征。本研究旨在探讨白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-18 (IL-18)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在KD患儿血清中的变化及与冠状动脉病变的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2009年1月至2012年12月在本院儿科住院的73例川崎病患儿(KD组)，36例为无冠状动脉损伤组(NCAL组)，37例为伴冠状动脉损伤组(CAL组)，诊断及冠状动脉损伤符合《诸福棠实用儿科学》(第7版)的诊断标准[1]。其中男性39例，女性34例，发病时平均年龄为(42±10)个月。选取同期门诊体检健康儿童30例作为正常对照组，其中男性16例，女性14例，平均年龄(40±9)个月。两组儿童在年龄、性别方面差异均无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 标本采集 KD患儿于急性期(0～2周)与亚急性期(2～4周)和正常对照组体检时采集静脉血3 ml，以3 000 r/min离心10 min，分离血清置-20℃冰箱保存备用。

1.3 检测方法 采用ELISA方法检测，IL-10、IL-18和TNF-α检测试剂盒由深圳晶美生物工程有限公司提供，其中IL-10试剂批号为20130306，IL-18试剂批号为20130327，TNF-α试剂批号为20130424，严格按说明书进行操作。酶标仪为芬兰Labsystem公司Multiskan MK3型。

1.4 统计学方法 应用SPSS13.0统计学软件进行数据分析，检测结果以均数±标准差()表示，组间分析采用t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组血清IL-10、IL-18和TNF-α水平比较 KD急性期三个指标显著高于KD亚急性期，KD亚急性期三个指标显著高于正常对照组(P＜0.01)，见表1。

表1 三组血清IL-10、IL-18和TNF-α水平比较（，pg/ml）

表1 三组血清IL-10、IL-18和TNF-α水平比较（，pg/ml）

注：KD急性期与KD亚急性期比较，aP＜0.01，KD亚急性期与对照组比较，bP＜0.01。

KD组急性期亚急性期正常对照组73 73 30 28.6±7.1a15.3±4.9b6.5±1.8 170.2±51.3a94.5±31.6b 58.2±15.4 15.2±4.6a9.8±2.7b5.9±1.5

2.2 CAL组、NCAL组急性期和正常对照组血清IL-10、IL-18和TNF-α水平比较 IL-10水平NCAL组显著高于CAL组、CAL组显著高于正常对照组；IL-18和TNF-α水平CAL组显著高于NCAL组、NCAL组显著高于正常对照组(P＜0.01)，见表2。

表2 CAL组、NCAL组急性期和正常对照组血清IL-10、IL-18和TNF-α水平比较（，pg/ml）

表2 CAL组、NCAL组急性期和正常对照组血清IL-10、IL-18和TNF-α水平比较（，pg/ml）

注：CAL组与无CAL组比较，aP＜0.01；NCAL组与对照组比较，bP＜0.01。

组别CAL组NCAL组正常对照组例数37 36 30 IL-10(pg/ml) 22.4±3.6a34.1±7.7b6.5±1.8 IL-18(pg/ml) 232.8±62.5a124.0±37.3b58.2±15.4 TNF-α(pg/ml) 22.7±5.8a10.5±3.0b5.9±1.5

3 讨 论

KD是一种以全身血管炎为主要病变的儿童急性发热、出疹性疾病，它常导致发病患儿冠状动脉炎、冠状动脉瘤及血栓形成等临床表现，对发病患儿的远期生存质量有着显著的影响[2]。KD发病机理较为复杂，免疫反应及其产生的细胞因子活性在川崎病的发生、发展和冠状动脉损伤起着关键性作用。近年来，KD的发病率有逐年上升趋势，是儿童后天获得性心脏病最常病因之一，因此，临床对KD的关注度越来越高。研究表明，IL-10、IL-18和TNF-α等细胞因子浓度的变化与KD发生和发展相关。

IL-18是近几年来新发现的一种分子量为18～19 KD的多肽类物质，其来源主要由单核-巨噬细胞产生，其生物学效应为促进T淋巴细胞增殖及增强CD8+T细胞和NK细胞的细胞毒性作用，同时还具有强大诱生TNF-α和IFN-γ等细胞因子的能力，导致其在介导细胞浸润、炎性反应和组织器官损伤中起到非常重要的作用，因此IL-18是多种免疫性疾病的重要细胞因子。IL-18在KD发病机制中所起作用可能是在感染病原体的诱发下，激活的炎症细胞分泌包括IL-18在内的多种活性递质，此时若易感染个体出现异常的免疫级联反应，IL-18过度分泌，并诱导产生大量IFN-γ和TNF-α等细胞因子，从而造成血管免疫炎性反应，最终导致KD的发生[3]。IL-18在KD急性期水平显著高于其亚急性期，CAL组水平显著高于NCAL组(P＜0.01)，证实其与KD的发生及冠脉的损伤成正相关，这与张本山等[4]的报道一致。

TNF-α是一种具有广泛生物活性的多肽调节因子，主要由单核-巨噬细胞产生，参与机体多种炎性反应。它的主要生物学效应为作用于血管内皮细胞，导致血小板活化因子及IL-1的释放，对炎性细胞粘附、浸润及中性粒细胞脱颗粒，促凝血，在血栓形成、动脉粥样硬化和DIC等疾病发病机制中有一定意义[5]。血液循环系统中持续释放的高浓度TNF-α对血管内皮细胞有直接的毒性作用，其机制为通过增强内皮细胞和白细胞上的粘附分子表达，使血液中白细胞与血管内皮细胞之间的粘附作用增强，诱发机体凝血机制，经一系列连锁反应，产生血栓并阻塞血管，引起血管损伤[6]。麦惠玲[7]研究认为，TNF-α作为一种主要促炎细胞因子，参与了川崎病炎症和免疫反应发生和发展过程，并与冠状动脉损伤呈正相关，在川崎病致冠状动脉损伤的防治并对病情的预后作科学的评估中具有重要循证医学依据。

IL-10是由Th2细胞分泌的细胞因子合成抑制因子，其来源主要为单核/巨噬细胞、B细胞，其功能为主要调节T、B细胞、NK细胞等的产生，抑制多种免疫活性细胞细胞因子的表达，阻止炎性细胞因子的分泌，还能抑制细胞粘附分子的产生，防止血栓形成等，防止心肌缺血、缺血再灌注损伤，保护心肌，对免疫细胞和免疫分子有双向调节作用[8]。本研究中KD急性期IL-10水平显著高于其亚急性期、KD亚急性期水平显著高于正常对照组(P＜0.01)，并且NCAL组水平显著高于CAL组(P＜0.01)，表明IL-10分泌是机体免疫系统的一种代偿性反应，在KD全身免疫系统过度活化中起重要的负反馈调节作用，对KD炎性细胞因子所介导的内皮细胞损伤具有保护作用。若循环系统中IL-10水平偏低，其浓度不足以拮抗IL-18、TNF-α等炎性因子的作用而引起冠状动脉损伤，因此血清中IL-10水平可能与KD是否发生冠状动脉损伤或损伤的严重程度有关[9]。

KD血管损伤的机制较复杂，有许多重要理论和学说，免疫炎症因子是其重要原因之一。血管内皮细胞与血液循环系统中免疫活性细胞间相互粘附和聚集是导致炎症反应向血管深层浸润的初始因素，提示血液粘附分子可能介导KD全身循环中的免疫效应细胞向血管局部浸润，在血管损伤的病理生理发生机制中起重要作用[10-11]。

总之，IL-10、IL-18和TNF-α可作为KD早期诊断的重要实验室指标，作为循证医学证据，在KD致CAL的预测和预后评估中具有重要的临床价值。

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Association among serum IL-10,IL-18 and TNF-α levels in children with Kawasaki disease and coronary artery lesion.

LIU Xia,WANG Ying,HE Jing.
Department of Clinical Laboratory,People's Hospital of Guilin,Guilin 541002,Guangxi,CHINA

ObjectiveTo explore the changes in serum levels of IL-10、IL-18 and TNF-α in children with Kawasaki disease(KD)and its association with coronary artery lesion.MethodsSerum samples were collected from 73 children with KD from Jan 2009 to Dec 2012,which were divided into non-coronary artery lesion group(NCAL) and coronary artery lesion group(CAL)according to the coronary artery damage.Thirty healthy children underwentoutpatient medical examination at the same period were selected as controls.The levels of serum IL-10,IL-18 and TNF-α were detected by ELISA,and then the results were compared.ResultsThe levels of IL-10,IL-18 and TNF-α in children with acute KD and subacute KD were higher than those in the control group;and those with acute KD were higher in than those with subacute KD(P＜0.01).The level of IL-10 in NCAL group was higher than that in CAL group,which in CAL group was also higher than that in the control group.The levels of IL-18 and TNF-α in CAL group were higher than those in NCAL group,which in NCAL group were higher than that in the control group (P＜0.01).Conclusion IL-10、IL-18 and TNF-α could be important indexes for early diagnosis of KD,and the dynamic observation of their changes could predict the coronary artery lesion.

Kawasaki disease(KD);IL-10;IL-18;TNF-α;Coronary artery lesion

R725.9

A

1003—6350（2014）14—2095—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2014.14.0811

2013-12-27)

刘 霞。E-mail：zhaoxia1008@163.com