嗜热毛壳菌纤维酶对肉鸡消化道酶活性影响的研究

王爱娜 ，杨在宾

（1.潍坊工商职业学院，山东 诸城 262234；2.山东农业大学动物科技学院，山东 泰安 271018）

随着畜牧业快速发展，我国饲料资源严重不足，同时家禽饲料中含有非淀粉多糖等抗营养因子也影响动物的生产性能。解决该问题的有效方法是在饲粮中添加酶制剂。虽然酶制剂在畜牧生产中的应用取得了很大的成果，但其作用机理还不明了。因此，本试验通过研究在饲料中添加嗜热毛壳菌纤维酶对肉鸡消化酶活性影响来阐释酶制剂对肉鸡的促生长机理。

1 材料与方法

1.1 酶制剂

嗜热毛壳菌纤维酶（其中纤维素酶、木聚糖酶和β-葡聚糖酶活性分别为2 231.64、794.31和3 480.07U · g-1）。

1.2 日粮组成及营养水平

试验基础日粮参考NRC肉鸡饲养标准（1994）配制，饲粮组成及营养水平见表1。

表1 饲粮组成及营养水平

1.3 试验设计

试验选用1日龄健康AA肉仔鸡120只，随机分为4组，分别为对照组和试验1、2、3组，每组3个重复，每个重复10只。各组饲喂基础日粮，同时分别添加嗜热毛壳菌纤维酶0、0.05%、0.15%和0.25%。试验鸡网上饲养，自由采食和饮水。

1.4 试验方法

分别在14、35和49日龄，每个重复选取体重接近的试验鸡2只，空腹称重，颈静脉放血、扭断颈椎，致其快速死亡。屠宰前禁食12 h。试验鸡屠宰后，迅速剖开腹腔，取胃、十二指肠和空肠食糜及胰脏，然后置液氮中保存。

1.5 测定指标和方法

1.5.1 酶活性测定前的预处理

先将样品在室温下解冻，称取0.2 g，加入0.15mol·L-1的生理盐水5mL，在冰水浴中匀浆2min，然后4℃，12 000 rpm，离心10min，取上清液用于酶活性的测定。

1.5.2 消化酶活性的测定

胰蛋白酶和α-淀粉酶活性测定按照孙洪新的方法完成[1]。脂肪酶和胃蛋白酶活性的测定采用试剂盒法，试剂盒购于南京建成生物工程公司。

1.6 统计分析

试验数据采用SPSS软件进行单因素方差分析，Duncan's法进行多重比较。结果以“平均值±标准误”表示。

2 结果与分析

2.1 对肉鸡淀粉酶活性的影响

嗜热毛壳菌纤维酶对其胃肠道淀粉酶活性的影响见表2。

表2 嗜热毛壳菌纤维酶对其胃肠道淀粉酶活性的影响U·g-1

由表2可见，添加嗜热毛壳菌纤维酶可以提高肉鸡十二指肠、空肠、胰脏淀粉酶的活性，但差异不显著（P＞0.05）。

程志斌等试验结果表明，日粮中添加非淀粉多糖酶制剂（含木聚糖酶、葡聚糖酶和纤维素酶），可使21日龄罗斯肉鸡空肠内容物的淀粉酶活性显著提高（P＜0.05）[2]。Ritz等研究表明，在玉米-豆粕型日粮中添加淀粉酶对小火鸡胰腺组织生长无显著影响（P＞0.05），对胰腺淀粉酶活性也无显著影响（P＞0.05），但外源淀粉酶的添加对肠道淀粉酶活性影响效果不一致[3]。由此可见，外源酶对淀粉酶活性影响的报道差异较大，这是由于酶活测定方法无统一的国家标准所造成的。

2.2 对肉鸡胰蛋白酶活性的影响

嗜热毛壳菌纤维酶对肉鸡胰蛋白酶活性的影响见表3。

表3 嗜热毛壳菌纤维酶对肉鸡胰蛋白酶活性的影响U·g-1

由表3可见，添加嗜热毛壳菌纤维酶0.15%显著和极显著提高了14日龄肉鸡十二指肠和空肠胰蛋白酶活性（P＜0.05和P＜0.01），胰脏中胰蛋白酶活性虽也有所提高，但差异不显著（P＞0.05）；对于35日龄肉鸡，与对照组相比，添加嗜热毛壳菌纤维酶0.15%可显著提高十二指肠胰蛋白酶的活性（P＜0.05），但添加嗜热毛壳菌纤维酶的3组间无显著差异（P＞0.05），且对空肠胰蛋白酶活性的影响不显著（P＞0.05）；添加嗜热毛壳菌纤维酶0.15%可极显著提高胰脏胰蛋白酶的活性（P＜0.01）；49日龄时，添加嗜热毛壳菌纤维酶0.15%可显著提高十二指肠和胰脏的胰蛋白酶活性（P＜0.05），但与其他两个试验组相比，差异不显著（P＞0.05）。

外源酶对肉仔鸡内源性胰蛋白酶活性影响的报道较多。本试验结果表明，添加嗜热毛壳菌纤维酶0.15%显著提高了各阶段肉鸡十二指肠胰蛋白酶的活性（P＜0.05），极显著提高空肠胰蛋白酶的活性（P＜0.01），但对其他阶段空肠的胰蛋白酶活性无显著影响（P＞0.05）。王明海等研究发现，在玉米-豆粕型日粮中添加复合酶能提高20日龄肉鸡蛋白酶的活性[4]。但徐昌领等研究结果表明，日粮中添加酶制剂降低21日龄肉鸡胰蛋白酶分泌水平[5]。外源酶的添加对胰蛋白酶活性影响报道不尽相同，主要由日粮和试验鸡影响所致。日粮不同，所含的抗营养因子（酶作用的底物）不同，如果日粮中可溶性非淀粉多糖（SNSP）的含量过高，那么外源酶就会对内源酶的分泌产生抑制效应。从本试验的结果可以看出，添加酶制剂0.15%能显著提高肉中鸡和肉大鸡胰蛋白酶的活性（P＜0.05），对于肉仔鸡，虽然胰蛋白酶的活性有所提高，但差异不显著（P＞0.05）。

2.3 对肉鸡胃蛋白酶活性的影响

嗜热毛壳菌纤维酶对肉鸡胃蛋白酶活性的影响见表4。

表4 嗜热毛壳菌纤维酶对肉鸡胃蛋白酶活性的影响U·g-1

由表4可知，添加嗜热毛壳菌纤维酶0.05%和0.15%可极显著提高胃蛋白酶活性（P＜0.01），且试验2组胃蛋白酶的活性最高。张芹等报道，玉米-豆粕型日粮中添加木聚糖酶，可提高42日龄肉鸡胃蛋白酶的活性[6]。对于肉鸡来讲，胃蛋白酶在蛋白质的消化过程中意义不大，相关报道也不多，有限报道表明，外源酶可促进家禽腺胃胃蛋白酶分泌。但是通过直接水解底物而表现出胃蛋白酶活性增强，还是真正起到促进鸡自身内源性胃蛋白酶的分泌尚不明确。因此，胃蛋白酶活性测定值的升高并不等同于促进内源酶的分泌。

2.4 对肉鸡脂肪酶活性的影响

嗜热毛壳菌纤维酶对肉鸡脂肪酶活性的影响见表5。

表5 嗜热毛壳菌纤维酶对肉鸡胰脂肪酶活性的影响U·g-1

由表5可知，与对照组相比，添加嗜热毛壳菌纤维酶0.15%可显著提高14日龄肉鸡十二指肠和胰脏脂肪酶活性（P＜0.05）；但与试验3组相比，差异不显著（P＞0.05）；添加酶制剂对空肠脂肪酶活性无显著影响（P＞0.05）。35日龄时，与对照组相比，添加嗜热毛壳菌纤维酶0.15%显著提高十二指肠、空肠和胰脏脂肪酶活性（P＜0.05）。49日龄时，与对照组相比，添加嗜热毛壳菌纤维酶0.15%显著提高胰脏脂肪酶活性（P＜0.05）；但与其他各组相比差异不显著（P＞0.05）。Engberg等试验表明，在整粒大麦日粮中添加木聚糖酶，可显著提高糜蛋白酶和脂肪酶活性[7]。王鹏宇等试验表明，在日粮中添加木聚糖酶500、1 000、1 500 U·kg-1能显著提高十二指肠和空肠脂肪酶活性[8]。本试验结果同上述报道基本一致。

3 结 论

在本试验条件下，添加嗜热毛壳菌纤维复合酶能显著提高小肠和胰脏中蛋白酶和脂肪酶活性，对淀粉酶活性几乎无影响。

[1]孙洪新.羔羊小肠消化酶活性变化规律研究[D].保定:河北农业大学，2003.

[2]程志斌，张红兵，黄遵锡，等.几种商业非淀粉多糖酶制剂对肉鸡肠道及内容物消化酶的影响[J].家畜生态学报，2011，32（2）:64-68.

[3]Ritz CW，Hulet RM，Self B B，etal.Endogenous amylase levels and response to supplemental feed enzymes in male turkeys from hatch to eightweeds of age[J].Poultry Sci，1995，74（8）:1 317-1 322.

[4]王明海，高峰.复合酶制剂对肉仔鸡消化酶活性和代谢的影响[J].中国家禽，2008，30（11）:23-26.

[5]徐昌领，左建军，冯定远.组合型木聚糖酶对21日龄黄羽肉鸡器官指数、内源消化酶活性以及肠道吸收功能的影响[J].饲料工业，2011（1）:49-53.

[6]张芹，毛胜勇，朱伟云，等.玉米-豆粕型日粮中添加木聚糖酶对肉鸡生产性能和内源酶活性的影响[J].畜牧与兽医，2007，39（8）:5-7.

[7]Engberg R M，Hedemann M S，Jensen B B，et al.Influence of whole wheat and xylanase on broiler performance and microbial composition and activity in the digestive tract[J].Poultry Sci，2004，83:925-938.

[8]王鹏宇，龚月生，张磊，等.木聚糖酶对肉鸡生产性能和肠道内源酶活性的影响[J].中国家禽，2010（9）:11-14.