普萘洛尔治疗婴幼儿血管瘤研究进展

赵哲媛等

婴幼儿血管瘤（infantile hemangiomas，IH）是一种常见的良性、血管内皮细胞增生性肿瘤[1]。目前治疗血管瘤的方法有多种，常用的有冷冻治疗、激光治疗、药物治疗以及手术治疗等，但传统上首选全身性药物治疗。皮质类固醇激素、干扰素、长春新碱等都曾用于婴幼儿血管瘤的治疗，但这些药物存在着不同程度的并发症，限制了其在治疗婴幼儿血管瘤上的临床推广使用[2-3]。2008年，普萘洛尔被发现对婴幼儿血管瘤有效[4]，近年来，迅速发展成为治疗血管瘤的一线药物。但β受体阻滞剂诱导婴幼儿血管瘤消退的机制尚不完全清楚，现总结婴幼儿血管瘤发生、发展及消退的特点，并对β受体阻滞剂诱导血管瘤消退的机制综述如下。

1 婴幼儿血管瘤的发病特点

婴幼儿血管瘤好发于早产儿、女婴，在我国新生儿的发病率为l%～2% [5]，出生后1年，发病率增加到12%[6]。IH 大多于出生后1周发病，男女比例约为1：3。低出生体重是血管瘤发病的危险因素，体重低于1 000g 的早产儿，IH 发病率是正常婴儿的2倍，上升到22.9%[6]，婴儿体重每减少500g，患血管瘤的风险可增加40%[2]。婴幼儿血管瘤其自然病程可包括增殖期、消退期和消退完成期[7]。其区别于脉管畸形等其他血管病变的主要特征可总结为：出生时没有或很小，出生后2～4周被患儿家长发现，4周～1年内快速生长，1年后开始消退，80%的患者在7～12岁就基本或完全消退[8]。

婴幼儿血管瘤有两个典型的快速增殖期，第一个在出生后4～6周，第二个在4～5个月[9]。快速增殖期瘤体常表现为鲜红色，出现触痛、溃疡、出血等临床症状，该期血管瘤镜下常表现为血管内皮细胞增生，密集呈团状，细胞圆而大，细胞团内见微血管增生，管腔内无血细胞[10]。电镜下见内皮细胞有丝分裂活跃。消退期常于出生1年后出现，该期瘤体色泽渐转为灰暗，体积逐渐缩小，镜下可见大量肥大细胞，血管内皮细胞呈扁平状，逐渐失去增殖能力，大部分微血管闭塞消失，以纤维脂肪组织增多。消退完成期，大部分血管瘤消退完成，被纤维脂肪组织替代[11]。

婴幼儿血管瘤经过较长的消退期，可渐渐萎缩。研究发现，6岁前能消退的瘤体，62%能再消退后达到最佳美学效果，若6岁前不能消退，80%患者在消退后可能会出现皮肤过多、瘢痕、毛细血管扩张等现象。且婴幼儿血管瘤好发于头面部，位置特殊性，常累及重要器官。如在早期增生过程中不及时治疗，任其自然发展，可能会出现局部并发症，导致严重的功能障碍和（或）容貌破坏，因此，在增殖期需要接受积极治疗，以缩短其消退过程[12]。

2 β受体阻滞剂的临床应用

2008年，法国医生Léauté-Labrèze在使用普萘洛尔治疗1例心肌病伴血管瘤患儿和1例心输出量增加的患儿，意外发现这2名同时有血管瘤的患儿体表瘤体发生了变化，血管瘤瘤体颜色变浅、质地变软、体积缩小。在看到该变化后，Léauté-Labrèze尝试性对另外9名颌面部血管瘤患儿同样应用了普萘洛尔，这些患儿在服药24h后，均看到瘤体有不同程度的萎缩[4]。自此，国内外出现了大量关于普萘洛尔治疗血管瘤的报道。

普萘洛尔是一种非选择性β受体阻滞剂，临床上主要用于各种快速性心律失常、高血压等心血管系统疾病的治疗，以及婴幼儿和儿童心脏疾病或新生儿甲状腺功能亢进等治疗[13]。通过竞争性拮抗神经递质和儿茶酚胺对β受体的激动，降低心脏收缩力与收缩速率，抑制血管平滑肌收缩，降低心肌耗氧量，抑制肾素释放，降低心排出量而发挥作用。口服后经肠道吸收，肝脏代谢，在心、肺、脑、肾血药浓度较高。主要不良反应有心动过缓、低血糖、支气管痉挛、低血糖等，由于普萘洛尔能透入神经系统，还可能出现眩晕，嗜睡及失眠等中枢神经系统不良反应[14]。在用于治疗心绞痛时骤然停药可出现较高发作率的停药反应，甚至可诱发急性心梗。因此在治疗婴幼儿血管瘤时，服药前应给予三大常规，心脏彩超，肝肾功，甲状腺功能等检查，在确保心、肝、肺、肾功能良好的前提下服药[15]，服药后密切观察患儿血压、心率、肝肾功及血糖的变化，停药时应注意逐渐减量，并定期随诊及时复查。为使服用风险降至最低，学者们提出了多种不同的服用方法及剂量。Siegfried 等提出“阶梯”用药方案，初始剂量为0.16mg·Kg-1·d-1，每天3次，每2周剂量增加1倍，最大至2mg·Kg-1·d-1，持续用药至瘤体消退，不再生长，后缓慢减量，直至停药，减量时间至少2周。Bayliss等采用的方案则是起始量0.5mg·Kg-1·d-1，第2周起增至1mg·Kg-1·d-1，第3周起2mg·Kg-1·d-1，每天3次服用[16]。Holmes等则使用维持剂量3mg·Kg-1·d-1，每天3次服用的方法[17]。Lawly则采用初始随着对普萘洛尔研究的深入，其他关于β受体阻滞剂在婴幼儿血管瘤治疗中应用的报道也开始出现。Pope等[18]报道了应用噻吗洛尔凝胶（timolol，用于治疗青光眼的选择性β受体阻断剂）对6例头面部表浅血管瘤（其中包括眼周血管瘤）患者进行治疗，取得了良好效果。Bigorre等[19]报道用醋丁洛尔治疗腮腺血管瘤、肛周血管瘤和颜面部血管瘤的患儿，效果甚佳。

3 β受体阻滞剂诱导血管瘤消退机制研究

大量临床试验证实，β受体阻滞剂治疗婴幼儿血管瘤效果确切，起效快，副作用较少，相对安全，但其作用机制尚不完全清楚。Storch和Hoeger认为普萘洛尔对血管瘤的作用通过早期、中期、长期三个可能的机制来进行调节。早期收缩瘤体血管，通过降低NO的释放使外周血管收缩，血流量减少，因此可能出现服药24h后瘤体缩小，颜色变浅，质地变软[20]。中期通过阻断血管形成的信号通路使血管瘤成血管能力下降，最终停止生长。增殖期血管瘤中血管内皮生长因子（VEGF）明显较正常组织及消退期血管瘤高。VEGF的表达可受激酶（extracellular singal-regulated kinase，ERK）/丝裂原活化蛋白激酶（mitogenactivatedproteinkinase，MAPK）信号通路调控。PKA可激活该通路。β-肾上腺素受体（β-adrenergic receptor，β-AR）属于G蛋白偶联受体，与肾上腺素等激素激活后激活蛋白激酶A（PKA）。普萘洛尔作为非选择性β受体阻滞剂，可能通过抑制G蛋白耦联，抑制PKA的激活，从而抑制ERK/MAPK通路的激活，使VEGF分泌减少，降低血管瘤的成血管能力，最终引起血管瘤的消退[21]。长期疗效的机制是通过诱导血管内皮细胞的凋亡，从而促进肿瘤消退。血管瘤内皮细胞作为血管瘤重要的组成部分，血管瘤的消退同时伴随着内皮细胞的凋亡。且研究表明普萘洛尔以及其他特异性β-AR抑制剂均能促进内皮细胞的凋亡[22]。消退期血管瘤Bcl-2、Bax、Fas、caspase-3等凋亡信号高表达于增殖期，普萘洛尔可能通过β-AR诱导血管瘤内皮细胞的凋亡通路，引导凋亡信号[23]。

婴幼儿血管瘤不是单纯的血管内皮细胞肿瘤，还存在环绕于小血管内皮细胞周围的周细胞，增殖期的血管瘤中存在大量的周细胞。周细胞又称Rouget细胞或壁细胞，血管形成后期，被招募到新生血管周围，与内皮细胞共同作用，调控血管形成，并维持其稳定[24]。周细胞又称壁细胞或Rought细胞，由Zimmermann于1923年首先提出。周细胞通常于内皮细胞一起构成微血管或组织间隙的屏障[25]。毛细血管壁由内皮细胞和周细胞两种细胞构成。通常内皮细胞围绕成血管管腔，周细胞则由基底膜包绕，紧靠内皮细胞。两者通过三种不同方式的连接对血管的形成、稳定及渗透性等方面起到了重要作用[26-27]。对于周细胞的来源尚存争议，有学者认为周细胞与平滑肌细胞同属一细胞系，体外培养发现周细胞具有肌源性表型[28]，有研究表明周细胞可由内皮细胞分化而来[29]，但绝大多数学者均认为周细胞是一种原始的间充质干细胞，具有多种分化潜能。

增生早期血管瘤组织中微血管周围有多层不成熟周细胞包绕；增生中期细胞团块中微血管数量明显增多；增生晚期微血管只有单层内皮细胞包裹，并围绕一些扁平的周细胞。在消退早期，微血管团密集，周围有少量周细胞，随着消退期微血管逐渐闭塞消失，纤维脂肪组织增多；消退完成期，大部分微血管被纤维脂肪组织替代[8]。Yu等[30]学者研究表明，增殖期及消退期血管瘤中可获得MSCs，周细胞具有类似于间充质干细胞的特征，可诱导分化为脂肪细胞等间充质干细胞[20]。实验表明，周细胞中能抑制脂肪前体细胞向脂肪细胞分化的Pref-1的高表达，同时观察到消亡期瘤体内主要为内皮细胞凋亡，而瘤体间质较少凋亡，纤维脂肪组织沉积于血管周围，这些研究可提示婴幼儿血管瘤中周细胞/MSCs可能是脂肪前体细胞，而消退中期的脂肪细胞可能来源于瘤体内周细胞。而Berard，Tan 等[31-32]也已证实周细胞可分泌VEGF、bFGF等，通过旁分泌途径刺激内皮细胞增殖，并通过自分泌刺激自身增殖，在增殖期与内皮细胞共同进行微血管发生，微血管数量增多，瘤体增大。

4 展望

可见内皮细胞与周细胞共同主导血管瘤的演变，参与血管瘤的消退。β受体阻滞剂作用于血管瘤，诱导其向消退期转化机制尚不完全清楚。是否可通过作用于周细胞，抑制其VEGF、bFGF的分泌，降低血管瘤的成血管能力，或促使周细胞向脂肪组织前提分化而刺激血管瘤的消退，这些尚需进一步的确认。通过β受体的定位，确定β受体阻滞剂的结合位点，将有助于进一步明确β受体阻滞剂诱导血管瘤消退的机制，同时也为临床治疗血管瘤提出新思路。

[参考文献]

[1]Barnes CM，Christison-Lagay EA，Folkman J. The placenta theory and the origin of infantile hemangioma[J].Lymphat Res Biol， 2007，5（4）：245-255.

[2]Drolet BA，Swanson EA，Frieden IJ.Infantile hemangiomas： an emerging health issue linked to an increased rate of low birth weight infants[J].J Pediatr，2008，153（5）： 712-715，711-715.

[3]Boye E，Jinnin M，Olsen BR.Infantile hemangioma： challenges， new insights， and therapeutic promise[J].J Craniofac Surg，. 2009，20 Suppl 1：678-684.

[4]Leaute-Labreze C，Dumas DLRE， Hubiche T， et al.Propranolol for severe hemangiomas of infancy[J]. N Engl J Med，2008，358（24）： 2649-2651.

[5]Enjolras O.Classification and management of the various superficial vascular anomalies： hemangiomas and vascular malformations[J].J Dermatol，1997，24（11）： 701-710.

[6]Phung TL，Hochman M，Mihm MC.Current knowledge of the pathogenesis of infantile hemangiomas[J].Arch Facial Plast Surg，. 2005，7（5）：319-321.

[7]Tan ST，Velickovic M，Ruger BM，et al.Cellular and extracellular markers of hemangioma[J].Plast Reconstr Surg，2000，106（3）： 529-538.

[8]Chang LC，Haggstrom AN，Drolet BA，et al. Growth characteristics of infantile hemangiomas： implications for management[J].Pediatrics，2008，122（2）： 360-367.

[9]Smith SJ，Buckingham ED，Williams ER.Management of cutaneous juvenile hemangiomas[J].Facial Plast Surg，2008，24（1）：50-64.

[10]袁斯明，邢新，欧阳天祥，等.婴幼儿血管瘤病理演变过程中形态观察[J].临床与实验病理学杂志，2005，21（3）：290-294.

[11]Assaf A，Nasr A，Johnson T.Corticosteroids in the management of adnexal hemangiomas in infancy and childhood[J].Ann Ophthalmol，1992，24（1）：12-18.

[12]Mabry RL.Corticosteroids in the management of upper respiratory allergy： the emerging role of steroid nasal sprays[J]. Otolaryngol Head Neck Surg，1992，107（6 Pt 2）： 855-859，859-860.

[13]Sidbury R.Update on vascular tumors of infancy[J].Curr Opin Pediatr，2010，22（4）： 432-437.

[14]Buckmiller LM.Propranolol treatment for infantile hemangiomas[J].Curr Opin Otolaryngol Head Neck Surg，2009，17（6）： 458-459.

[15]Siegfried EC，Keenan WJ，Al-Jureidini S. More on propranolol for hemangiomas of infancy[J].N Engl J Med，2008，359（26）： 2846-2847.

[16]Gelmetti C，Frasin A，Restano L.Innovative therapeutics in pediatric dermatology[J].Dermatol Clin，2010，28（3）： 619-629.

[17]Holmes WJ，Mishra A，Gorst C，et al.Propranolol as first-line treatment for rapidly proliferating infantile haemangiomas[J]. J Plast Reconstr Aesthet Surg，2011，64（4）： 445-451.

[18]Pope E，Chakkittakandiyil A.Topical timolol gel for infantile hemangiomas： a pilot study[J].Arch Dermatol，2010，146（5）： 564-565.

[19]Bigorre M，Van Kien AK，Valette H.Beta-blocking agent for treatment of infantile hemangioma[J].Plast Reconstr Surg， 2009，123（6）：195e-196e.

[20]Gelmetti C，Frasin A，Restano L.Innovative therapeutics in pediatric dermatology[J].Dermatol Clin，2010， 28（3）： 619-629.

[21]Fredriksson JM，Lindquist JM，Bronnikov G E，et al.Norepinephrine induces vascular endothelial growth factor gene expression in brown adipocytes through a beta -adrenoreceptor/cAMP/protein kinase A pathway involving Src but independently of Erk1/2[J]. J Biol Chem，2000，275（18）：13802-13811.

[22]Yang H，Deng C，Shen S，et al.Expression and significance of Bcl-2， Bax， Fas and caspase-3 in different phases of human hemangioma[J].J Huazhong Univ Sci Technolog Med Sci，2006，26（4）：402-404.

[23]Sommers SS，Smith DM.Beta blockade induces apoptosis in cultured capillary endothelial cells[J].In Vitro Cell Dev Biol Anim，2002，38（5）：298-304.

[24]Kuhnert F，Tam BY，Sennino B，et al.Soluble receptor-mediated selective inhibition of VEGFR and PDGFRbeta signaling during physiologic and tumor angiogenesis[J].Proc Natl Acad Sci USA，2008，105（29）： 10185-10190.

[25]翟丽丽，杨迷玲，李争艳，等. 周细胞的研究进展[J]. 现代肿瘤医学，2011，19（8）：1672-1675.

[26]Cuevas P，Gutierrez-Diaz JA，Reimers D，et al. Pericyte endothelial gap junctions in human cerebral capillaries[J].Anat Embryol （Berl），1984， 170（2）：155-159.

[27]Caruso RA，Fedele F，Finocchiaro G，et al. Ultrastructural descriptions of pericyte/endothelium peg-socket interdigitations in the microvasculature of human gastric carcinomas[J].Anticancer Res，2009， 29（1）：449-453.

[28]Crisan M，Yap S，Casteilla L，et al.A perivascular origin for mesenchymal stem cells in multiple human organs[J].Cell Stem Cell，2008，3（3）：301-313.

[29]Deruiter MC，Poelmann RE，Vanmunsteren J C，et al.Embryonic endothelial cells transdifferentiate into mesenchymal cells expressing smooth muscle actins in vivo and in vitro[J].Circ Res，1997，80（4）： 444-451.

[30]Yu Y，Fuhr J，Boye E，et al.Mesenchymal stem cells and adipogenesis in hemangioma involution[J].Stem Cells，2006，24（6）： 1605-1612.

[31]Berard M，Sordello S，Ortega N，et al. Vascular endothelial growth factor confers a growth advantage in vitro and in vivo to stromal cells cultured from neonatal hemangiomas[J].Am J Pathol，1997，150（4）： 1315-1326.

[32]Tan ST，Velickovic M，Ruger BM，et al. Cellular and extracellular markers of hemangioma[J]. Plast Reconstr Surg，2000，106（3）： 529-538.

[收稿日期]2014-6-30 [修回日期]2014-7-23

编辑/李阳利