自体脂肪颗粒加毛囊干细胞移植在脱发治疗中的应用

孙凯　甄永环　刘永葆

[摘要]目的：观察自体脂肪颗粒加毛囊干细胞移植治疗脱发的疗效。方法：自体脂肪颗粒分离纯化后， 加毛囊干细胞第一代培养细胞，对头顶脱发部位进行注射治疗。结果：36例患者，经过多次注射干细胞移植，均获得了明显改善，可见新生头发，效果满意，没有出现特殊并发症。结论：对于大面积脱发患者，应用自体脂肪颗粒加毛囊干细胞移植是一种安全、有效的方法，值得临床推广应用。

[关键词]毛囊干细胞移植；脂肪移植；脱发

[中图分类号]R622+.9 [文献标识码]A [文章编号]1008-6455（2014）13-1053-02

自体颗粒脂肪注射移植治疗半面部萎缩、面部凹陷、隆乳等，在我国的整形美容手术中已有许多报道，但国内在治疗脱发方面未见报道[1]。有很多因素影响头发的生长，如头皮变薄，病理可见毛囊萎缩， 皮下脂肪变薄，甚至消失等，就会使人看起来苍老。目前，有多种方法来刺激毛囊，增加头皮的血供， 如：梅花针、艾灸等，但各有优劣， 效果不尽人意。自2012年以来，笔者应用自体脂肪颗粒加毛囊干细胞移植来填充头皮下脂肪层共36例患者，均取得了良好效果，现报道如下。

1 临床资料

36例脱发患者，其中男性20例，女性16例，年龄23～46岁，脱发面积20～40cm2，发软，质干枯， 绒毛状，细小， 脱发部位以头顶为主，采用脂肪移植加干细胞注射治疗。

2 手术方法

2.1脂肪供区的选择：患者脂肪供区多选择腹部及腰背部。龙胆紫标记范围，用膨胀麻醉液皮下注射（配制方法为每1000ml生理盐水加2%利多卡因25ml，肾上腺素1mg），局部注射至皮肤发白，采用普通的注射器抽吸颗粒脂肪。用20ml注射器连接16～18号针头，将针头插入抽吸部位后回抽针芯，使针筒内形成负压，并保持负压，采用扇形往复抽吸技术，取得脂肪颗粒200～250ml[2]。

2.2脂肪颗粒的分离[3]： 经负压抽吸的皮下脂肪膨胀麻醉液混合液，在注射器中静置分层，可分为上、中、下三层。上层为黄色透明的脂肪细胞释放的脂滴层，中层为黄色颗粒状的脂肪颗粒，下层为血液与膨胀液的混合部分，呈粉红色，上层脂滴可用纱布细心吸去，下层血液与膨胀液可直接弃除。保留中层淡黄色的脂肪颗粒，用生理盐水清洗2遍后备用。

2.3供区的处理：供区用弹力绷带加压包扎3～5天，以防皮下积血、积液及血清肿等并发症的产生。

2.4毛囊干细胞的制备：0.8mm口径FUE机器打孔（中美之光， 型号PK9000），取患者后枕部毛囊500～600根，解剖显微镜下分离并游离毛囊干细胞[4]。

2.5 毛囊干细胞的培养：用标准培养基（DMEM）， 加10%牛胎儿血清和抗生素（amfoterycinB（5μg/ml，链霉素100μg/ml），传代培养于37℃，5%CO2的培养箱中14天，培养的细胞密度最终为2×104/cm2[5]。

2.6 毛囊干细胞悬液的制备：毛囊干细胞经胰酶消化（0.25%胰蛋白酶/EDTA，PAA）10min，并离心10min，1200rpm/min，沉淀的细胞加生理盐水5ml制成毛囊干细胞悬液，子代干细胞计数是每毫升5×103个。

2.7脂肪颗粒加毛囊干细胞混合液的注射： 脂肪颗粒100ml加毛囊干细胞2ml（干细胞计数是每100ml 1×104个）。上述混合液采用皮下线形注射法，头皮根据术前标记的填充范围及需注射厚度直接皮下注射即可。术中避免误注血管及皮下团块状脂肪颗粒堆积。术者均使用7号针头与1ml注射器进行脂肪颗粒移植较为方便。充填范围30～60cm2，充填量100～200ml。

2.8移植区的处理：移植区术后妥善消毒后，不要包扎，保持清洁干燥即可。术前术后均拍照留档，术前常规体检，避开月经期，保持局部清洁干燥2～3天，随访0.5～1年以观察效果。

3 结果

本组36例患者，均经过半年以上的随访，所有患者经过治疗后均达到较好效果，充填区饱满， 未出现血肿，感染等并发症。填充区头发生长旺盛，发质良好，脱发得到控制，18例男性（占90%）， 16例女性（占100%）看到新生头发。患者均较满意，达到了预期效果。

4 讨论

自体脂肪颗粒加毛囊干细胞移植，是一种原料充足，组织相容性好，易于被患者接受，且移植后不存在排异，而且供体无限，可重复治疗多次的方法。36例脱发患者经毛囊干细胞移植后， 患者已停止脱发，增加头皮头发血供，滋养毛囊，并且可见新生头发，这项技术国际医学杂志报道很多[6]，但国内报道较少。

头部皮下血液循环丰富，移植脂肪成活率较高，也较少发生的感染并发症，良好的脂肪颗粒选择，脂肪颗粒的正确处理，均匀的移植，准确地估计注射量，在本组患者的治疗中，未发生感染病例，移植后的随访中远期结果也较为满意。

单纯脂肪注射只能改变毛囊生长环境，不能增加毛囊个数。而单纯的毛囊干细胞注射，由于头皮环境不好，往往效果不尽人意。笔者选择36例脱发患者进行脂肪干细胞和脂肪颗粒混合注射，取得了十分满意的疗效。毛囊干细胞培养，最重要的是毛囊干细胞子代细胞必须保持较高的衍生和分化功能[7]，国外文献报道第一代和第二代毛囊干细胞活性最高[8]，移植后2周即可看到新生毛发。 在本组治疗中，笔者均采用第一、第二代干细胞，随访半年 可以看到新生的毛发生长速度很快，几乎和周围毛发无差别，但质软，细长[9-10]。

[参考文献]

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[3]张新合，高建华.取脂方法及吸脂压力对脂肪细胞损伤程度的实验研究[J]. 中华医学美学美容杂志，2001，7（5）：254-257.

[4]Chajehir A.Benzaqueen I fat grafting injection soft tissue augm entation[J].Plast Reconstr Surg，1989，84：921-923.

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[6]Zhang S，Hu H，Zhang H，et al. Hair folliclestem cells derived from single rat vibrissa via organ culture reconstitute hairfollicles in vivo[J].Cell Transplant， 2012，21（6）：1075-1085.

[7]刘萍，刘毅，任文明，等.自体颗粒脂肪移植570例临床总结[J].中国美容医学，2007，16（4）：462.

[8] Amoh Y， Hoffman RM. Isolation and culture of hair follicle pluripotent stem （HFPS） cells and their use for nerve and spinal cord regeneration[J]. Methods Mol Biol， 2010，585：401-420.

[9]Zhang S， Hu H， Zhang H， et al. Hair follicle stem cells derived from single rat vibrissa via organ culture reconstitute hair follicles in vivo[J]. Cell Transplant ，2012，21（6）：1075-1085.

[10]Driskell R， Jahoda CA， Chuong CM， et al. Defining dermal adipose tissue[J]. Exp Dermatol， 2014，5： 19.

[收稿日期]2013-11-22 [修回日期]2014-05-07

编辑/李阳利