紫外可见分光光度法测定白菜中硝酸盐含量

赵杰

摘要 [目的]探究紫外分光光度法用于测定蔬菜中硝酸盐的含量是否快捷、方便、准确。[方法]选取日常生活中常见的、代表性较强的白菜为材料，分别放置0、2、4、6、8 d，用亚铁氰化钾、乙酸锌、硼酸、活性炭等试剂处理蔬菜匀浆，制得待测液。采用紫外分光光度法测定蔬菜样品待测液中硝酸盐含量，并做加标回收试验，以判断试验准确度。[结果]该方法加标回收率较高，说明准确度较高，RSD小于3.7%，具有较高的精密度。[结论]此方法操作简便、结果准确，适用于蔬菜中硝酸盐含量的测定。

关键词 紫外分光光度法；白菜；硝酸盐；含量测定

中图分类号 S609.9 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2014）27-09553-02

Determination of Nitrate in Vegetables by Ultraviolet Spectrophotometry Method

ZHAO Jie

（Guiyang University， Guiyang， Guizhou 550025）

Abstract [Objective] To explore the ultraviolet spectrophotometric method for determination of content of nitrate in vegetables is quick， convenient and accurate. [Method] Selecting common and representative vegetables in the daily life as materials， they were placed respectively 0， 2， 4， 6， 8 days， potassium ferrocyanide， zinc acetate， boric acid and activated carbon were used to process vegetable homogenate， so as to obtain test liquid. The content of nitrate in vegetables were determined by ultraviolet spectrophotometry， and standard addition recovery experiment was conducted， the accuracy of experiment was determined. [Result] The results showed that the standard addition recovery rate is higher， shows high accuracy， RSD is less than 3.7%， has higher precision. [Conclusion] This method is simple and accurate， and suitable for the determination of nitrate content in vegetables.

Key words Ultraviolet spectrophotometry； Vegetables； Nitrate； Content determination

蔬菜中硝酸盐的来源有环境污染、农药的大量使用以及肥料的施用（尤其是氮肥）等，由于蔬菜体内硝酸盐还原的速度跟不上其吸收氮素的速度，硝酸盐就会在蔬菜体内蓄积，主要食用部位为叶和根的蔬菜极易富集硝酸盐。

虽然硝酸盐对人体危害不大，但其在一定条件下转化成亚硝酸盐后会对人体造成一定伤害。蔬菜中的硝酸盐在食用之前就有部分被还原成亚硝酸盐，亚硝酸盐是一种有毒物质，摄入量达到一定值可直接使动物出现血液缺氧中毒反应，严重时甚至可导致死亡。NO-₂还可能与二级胺结合形成强致癌物亚硝胺，诱发人体消化系统的癌变。

硝酸盐含量是无公害蔬菜的一个重要指标。为了便于人们在选用蔬菜时能够作出更利于健康的判断，探究出一种简便、快速、准确的测定蔬菜中硝酸盐含量的方法，显得尤为重要。笔者以贵阳市某菜市场购买的白菜作为试验样品，以紫外分光光度法测定白菜中硝酸盐的含量，进而了解蔬菜中硝酸盐含量情况，为大批量蔬菜样品中硝酸盐含量的快速测定提供一定的参考。

1 材料与方法

1.1 材料

原料：市售大白菜。

主要仪器：

紫外分光光度计（UV250IPC），杭州科晓化工仪器设备有限公司；

捣碎机，上海昂尼仪器仪表有限公司；

水浴锅，河南郑州南北仪器设备有限公司；

电子天平（AL204），北京鑫联康盛科技有限公司；

恒温干燥箱（2022），天津市泰斯特仪器有限公司；

烧杯，上海雅东玻璃制品有限公司；

容量瓶，上海知瑞实业有限公司；

玻璃棒，广东鑫盛源玻璃制品有限公司；

移液管，祁阳县欧亚玻璃仪器有限公司。

主要试剂：

亚铁氰化钾，天津市福晨化学试剂厂；

乙酸锌，山东淄博临淄天德精细化工研究所；

氨基磺酸，烟台三鼎化工有限公司；

盐酸，杭州创高实业有限公司；

硝酸钾，郑州博轩化工产品有限公司；

硼砂，重庆齐星化工；

活性炭，国营重庆无机化学试剂厂；

纯净水，娃哈哈。

1.2 绘制标准曲线^[1-2]

1.2.1 吸收波长的选择。

吸取标准工作液1.2 ml于50 ml容量瓶中，用去离子水定容。于200～400 nm波长范围随同空白扫描，扫描结果显示NO-₃在200 nm处有最大吸收。因200 nm处于近紫外区（200～400 nm）和远紫外区（10～200 nm）分界值，故选择210 nm为样品中硝酸盐的测量波长。

1.2.2 标准曲线的绘制。

分别准确吸取硝酸根标准贮备液0、0.5、1.0、1.5、2.0、3.0、4.0、5.0 ml于8个50 ml容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀（此标准系列溶液分别含NO-₃浓度为：0、0.5、1.0、1.5、2.0、3.0、4.0、5.0 mg/L）。用1 cm石英比色皿于波长210 nm处测其吸光度。

1.3 样品待测液制备

1.3.1 样品制备。

将样品先用自来水冲洗，再用纯净水清洗干净，晾干表面水分，切碎，于组织捣碎机中匀浆（部分少汁样品可按一定质量比例加入等量纯净水），在匀浆中加1滴正辛醇消除泡沫。

1.3.2 样品待测液的制备^[1]。

称取白菜匀浆5.000 g于烧杯中，加入2.5 ml饱和硼砂溶液，用70～80 ℃纯净水洗入100 ml容量瓶中，置沸水浴中加热10 min（水浴时间采用蔡顺香通过试验选出的最佳水浴时间）^[3]。取出冷却至室温，分别加入5 ml亚铁氰化钾和乙酸锌溶液，及2 g活性炭粉，充分混合，定容充分摇匀，放置5～10 min，用定量滤纸过滤（蔬菜浓度：0.5 g/L）。

1.3.3 共存离子的消除^[1]。

样品提取液中含有亚硝酸根，它在210 nm处也有吸收，会对测定结果造成影响。每10～20 ml匀浆中，加入1 mol/L盐酸溶液12 ml可消除碳酸盐的干扰，再加1%氨基磺酸铵0.1 ml能很好消除NO-₂的干扰^[4]。100 ml中应加入5～10 ml HCl，1%氨基磺酸0.5～10 ml。

1.4 样品中硝酸盐含量的测定^[2]

取待测液1～5 ml于50 ml容量瓶中，用水定容。摇匀后于紫外分光光度计上，以样品空白溶液调零，用1 cm石英比色皿于波长210 nm处测定吸光度，从标准曲线上查得相应浓度，计算白菜样品中的硝酸盐含量。

样品中硝酸盐含量用质量分数W（mg/kg）表示，计算公式^[5]：

W=X×V₁×V₃/m×V₂

式中，V₁为提取液定容体积（ml）；V₂为吸取滤液体积（ml）；V₃为待测液定容体积（ml）；X为从工作曲线中查得测试液中硝酸盐质量浓度（mg/L）；m是样品质量（g）。计算结果保留到整数位。

1.5 硝酸盐回收率及精密度测定

称取样品匀浆液5.003 g，加入一定量的硝酸盐标准溶液，试验方法同“1.4”，于波长210 nm处测定吸光值。

2 结果与分析

2.1 标准曲线的绘制

经检测，不同浓度的硝酸根吸光值见表1。

3 结论

该试验结果表明，使用紫外分光光度法在波长210 nm处测定白菜中硝酸盐含量具有较高的准确度，其加标回收率在98.2%～103.0%，同时也具有较高的精密度，其相对标准偏差在0.48%～3.68%，能满足检测分析的要求。紫外分光光度法测定白菜中硝酸盐含量方便、快捷、计算方法简单，具有很高的可行性，可推广应用到其他蔬菜及水果中硝酸盐含量的测定。

参考文献

[1] 蔡顺香.紫外分光光度法快速测定蔬菜中的硝酸盐含量[J].福建农业学报， 2005，20（2）：125-127.

[2] 曹书杰.紫外分光光度法测定蔬菜中硝酸盐含量[J].南阳师范学院学报，2008，7（3）：53-54.

[3] 王晓菁，张艳，陈玲，等.紫外吸收光度法测定蔬菜中硝酸盐含量[J].宁夏农林科技，2005（6）：36-37.

[4] 杨锚，邵华，金芬，等.新鲜蔬菜和水果中硝酸盐紫外分光光度法的测定[J].华中农业大学学报，2009，28（1）：102-105.

[5] 张德纯，刘肃，钱洪.浅析我国蔬菜产品安全质量标准[J].中国农业科技导报，2002，4（5）：9-15.