莼菜叶斑病的防治药剂研究

赵瑶 王文泽 彭伟 毕朝位

摘要：莼菜作为绿色蔬菜珍品，是石柱出口及农民致富的支柱产业之一，而莼菜叶斑病在当地的发生危害越来越严重。本研究通过室内平板筛选和田间小区试验，获得对莼菜叶斑病有较好防效的杀菌剂。研究结果表明，戊唑醇、苯醚甲环唑、苯甲·丙环唑、吡唑醚菌酯的平板抑菌效果较好，对病原菌的生长抑制率可达75%；而吡唑醚菌酯的田间防效最好，3次用药后8天、16天对莼菜叶斑病的相对防效为43.63%和47.96%，并且对植株生长未见影响。以上结果表明，吡唑醚菌酯可以作为防治莼菜叶斑病的备选药剂。

关键词：莼菜；叶斑病；杀菌剂；吡唑醚菌酯

中图分类号：S482.2文献标志码：论文编号：2014-0058

0引言

莼菜(Brasenia schreberi J. F. Gmel.)又名菁菜、马蹄菜、湖菜等，为多年生宿根水生草本植物，其味鲜美滑嫩，并含有丰富的胶质蛋白、碳水化合物、脂肪、多种维生素和矿物质，有抗肿瘤、抗溃疡、抗菌消炎和促进免疫等生物活性, 为具有营养、医疗和保健功效的绿色蔬菜珍品[1-5]。莼菜对生长的自然条件要求非常高，在世界上除日本尚有少量栽培外，主要在中国重庆石柱、浙江杭州西湖、湖北利川佛宝山等地有较大面积栽培[6-8]。石柱县种植莼菜始于1991年，目前种植面积已达 870 hm2，产值7000多万元，已成为全球最大的莼菜基地，也是当地出口及农民增收的主要支柱产业之一[9]。然而近年来，石柱莼菜叶斑病发生十分严重。它主要为害叶片，多从叶缘开始发病，初为黑色小点，后逐渐扩大，形成具轮纹的黑褐色大斑，病斑边缘具黄色晕环，多个病斑可愈合并使整个叶片逐渐腐烂。在石柱，一般田块发病率在10%~30%，重病田达100%，其严重影响产量和品质，并且发生面积和严重程度有逐渐加重的趋势。对于莼菜病害的研究报道本就十分少，而从未见国内外对莼菜叶斑病的系统研究报道。本实验室前期研究表明，引起该病害的病原菌为链格孢菌(Alternaria alternate)（待发表）。而对该病害采用何种防治措施是目前生产上急需解决的问题。笔者通过室内平板筛选和田间小区试验，以期获得对莼菜叶斑病有较好防效的杀菌剂。

1材料与方法

1.1试验时间、地点

研究田间试验于2013年在石柱县冷水镇八龙村进行，室内试验在西南大学植保学院真菌学实验室进行。

1.2试验材料

1.2.1供试菌株莼菜叶斑病病原菌分离自重庆市石柱县冷水镇田间发病的病株，本实验室保存。

1.2.2供试杀菌剂85%戊唑醇水分散粒剂（青岛润生农化）；25%嘧菌酯悬浮剂（先正达）；30%苯甲·丙环唑乳油（先正达）；10%苯醚甲环唑水分散粒剂（先正达）；50%多菌灵可湿性粉剂（江苏蓝丰生物化工）；25%吡唑醚菌酯乳油（巴斯夫）。

1.3试验方法

1.3.1不同杀菌剂的室内抑菌试验采用菌丝生长速率法比较不同杀菌剂的抑菌作用[10]。将菌株在PDA平板上25℃培养5天，沿菌落边缘制成直径6 mm的菌碟，以不同杀菌剂的推荐田间用药浓度再稀释10倍和100倍配制含药PDA平板，将菌碟移至含药平板上，每处理重复3次，以不含药平板作对照，25℃培养7天后十字交叉法测量菌落直径，计算不同杀菌剂的抑制率，如式(1)。

抑制率=[(对照菌落直径-处理菌落直径)/(对照菌落直径-菌碟直径)]×100%…(1)

1.3.2田间小区试验选用常发病田，当地常规栽培管理。根据室内抑菌试验结果，选用85%戊唑醇（用量510 g a.i./hm2）、25%嘧菌酯(112.5 g a.i./hm2)、30%苯甲·丙环唑(135g a.i./hm2)、10%苯醚甲环唑(60 g a.i./hm2)、25%吡唑醚菌酯(150 g a.i./hm2)5种杀菌剂处理，以清水为空白对照。每处理3次重复，每小区30 m2，各小区随机排列。根据田间发病情况及天气情况，于4月28日、5月11日、5月20日施药3次。

于每次药前以及末次药后8天、16天调查病害发生情况。采用随机取样，每小区随机调查50个叶片，记录总叶片数、病叶数和各级病叶数。参照大多数叶部病害设定病情分级标准：0级—无病斑，1级—病斑面积占整个叶面积5%以下，3级—病斑面积占整个叶面积6%~10%，5级—病斑面积占整个叶面积11%~20%，7级—病斑面积占整个叶面积21%~50%，9级—病斑面积占整个叶面积50%以上。

病情指数及相对防治效果的计算如式(2)~(3)。式中，CK0—空白对照区施药前病情指数；CK1—空白对照区施药后病情指数；PT0—药剂处理区施药前病情指数；PT1—药剂处理区施药后病情指数。

[病情指数=各级病叶数×相对级数值调查总叶数×最高级数值×100]…(2)

[相对防效=(1-CK0×PT1CK1×PT0)×100%]…(3)

2结果与分析

2.1不同杀菌剂的室内抑菌作用

选用不同类型的常用杀菌剂，以其推荐田间用药剂量的浓度再稀释10倍和100倍配制含药平板，接种病原菌，测定不同杀菌剂的室内抑菌效果，结果（表1）表明，戊唑醇和苯醚甲环唑在2种浓度下的抑菌效果都是最好的，分别都在90%和75%以上；苯甲·丙环唑和吡唑醚菌酯的抑菌效果次之，在高浓度下的抑菌效果达75%以上；嘧菌酯平板抑菌效果较差，并且2个浓度间无抑菌效果无差异，为37%和36%；而多菌灵的抑菌效果最差，仅为14%和6%。根据以上结果并结合各类杀菌剂的作用方式及防治对象，选用戊唑醇、苯醚甲环唑、苯甲·丙环唑、吡唑醚菌酯和嘧菌酯等5种杀菌剂用于田间小区试验。

2.2不同杀菌剂的田间防效

对选用的5种杀菌剂进行田间小区试验，结果（表2）表明，在推荐剂量下，吡唑醚菌酯的相对防治效果最好，3次用药后8天、16天对莼菜叶斑病的相对防效为43.63%和47.96%，嘧菌酯的相对为防效21.19%和32.11%，戊唑醇为31.63%和29.63%，苯甲·丙环唑为19.51%和26.67%，而苯醚甲环唑仅为2.34%和13.37%。以上结果表明吡唑醚菌酯对莼菜叶斑病具有一定的田间防治效果，可以作为防治该病害的备选药剂。

3结论与讨论

莼菜为中国重要的野生经济植物，分布于江苏、浙江、安徽、江西、湖南、四川、云南和台湾等省份。由于人类活动导致野生生境破坏及过度的经济开发，莼菜的群落面积与种群数量急剧减少，目前已被林业局和农业部列为国家I级重点保护野生植物[11-13]。野生莼菜主要在浅水湖泊、池塘内呈间断分布，其生境隔离现象十分突出[13]，因此也不会有病虫害的大面积严重发生，有关莼菜病虫害的研究报道也就十分少见。但由于近年来在部分地区人工大面积的连片种植，莼菜病害发生也有逐渐加重的趋势。比如莼菜叶斑病在石柱县的发生危害就越来越严重。本研究也是首次对该病害的防治作初步的探讨。

本研究选用属甾醇生物合成抑制剂的戊唑醇、苯醚甲环唑、苯甲·丙环唑和属β-甲氧基丙烯酸酯类的嘧菌酯、吡唑醚菌酯等5种杀菌剂用于室内平板抑菌和田间小区试验。室内平板抑菌试验结果表明，戊唑醇和苯醚甲环唑的抑菌效果最好，苯甲·丙环唑和吡唑醚菌酯次之，嘧菌酯较差。而田间小区试验结果与此并不完全一致，相对防效最好的是吡唑醚菌酯，其次是嘧菌酯、戊唑醇和苯甲·丙环唑，而苯醚甲环唑较差。产生这种差异是由于在2种试验方法下药剂对病原菌的接触方式不同，前者药剂直接接触病原菌，而后者药剂要通过植物吸收后才能接触病原菌，此过程中受植物对药剂的粘附性、吸收性、传导性、降解等方面的影响，还受施药期间环境的影响。因此，室内平板抑菌试验结果是田间小区试验药剂选择的参考，而田间小区试验结果更能指导实际生产。

莼菜是一种水生的绿色蔬菜珍品，一般在1000~1500 m的高山地区生长，要求阳光充足、水源丰富、水质清洁、土壤pH 5.5~7.0、无污染的自然环境条件[14-16]，因此在莼菜栽培中基本不施用化肥等。在本研究的田间小区药效试验中，施用杀菌剂后结合病害调查，还会定期观测、评价各药剂处理对莼菜的安全性，如叶色、叶斑、长势等生长发育指标的影响。在整个施药过程中及药后3周的田间调查均未发现药害的产生，表明以上杀菌剂在试验施药水平下对莼菜是安全的。

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