中药罗汉果对小鼠急性毒性和致突变性研究

艾丽萍　高顺

摘要 [目的]研究罗汉果水提取物在小鼠体内的急性毒性及致畸变性效应，为罗汉果临床用药安全提供理论依据。[方法]对小鼠进行罗汉果水提取物最大给药量急性毒性试验，观察小鼠给药后的体征及生理变化，进行血液检查以及剖检；采用小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验进行致畸变性检测。[结果]在最大给药量90 000 mg/kg剂量下，小鼠无明显中毒症状，生理指标、血液与空白对照组无显著差异，内脏器官解剖无病理变化；微核试验結果呈阴性。[结论]罗汉果水提取物无急性毒性以及致突变性。

关键词 罗汉果水提取物；最大给药量；急性毒性；微核试验

中图分类号 S567 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2014）03-00774-02

Abstract [Objective] To study the acute toxicity and mutagenicity of Siraitia grosvenorii extract in mice. [Method] Mice stomach was irrigated with the maximum dosage in testing acute toxicity of Siraitia grosvenorii extract. The influence of Siraitia grosvenorii extract on the sign and physiology in mice after administration was observed and recorded. Autopsy and blood tests were done in mice. Micronucleus test in polychromatophil cells was performed to test mutagenicity of Siraitia grosvenorii extract. [Result] In the maximum dosage （90 000 mg/kg）， the mice had not obvious symptoms of poisoning and pathological changes of internal organs. Physiological and blood indexes was normal compared to the control group. Micronucleus test was the negative reaction. [Conclusion] The Siraitia grosvenorii extract did not show the acute toxicity and mutagenicity.

Key words Siraitia grosvenorii extract； Maximum dosage； Acute toxicity； Micronucleus test

使用抗生素控制畜禽疾病不仅容易产生抗药性，而且药物在食品中的残留可威胁到人类健康，中药因其毒性低、残留量少等优点成为近年来饲料添加剂的研究热点[1]。中药罗汉果性凉、味甘，归肺、大肠经，有清热解毒、润肺止咳、凉血滑肠的功效。研究表明罗汉果提取物具有抑菌作用[2-3]、增强免疫力[4-5]、促进胃肠蠕动[6-8]、抗氧化[9]、保护肝脏[10]、镇咳平喘[11-12]等功能，临床上可用于治疗高血压、肺结核、哮喘等多种呼吸系统、消化系统疾病。笔者通过罗汉果水提取物急性毒性和微核试验，研究罗汉果对小鼠的毒性和致畸变性，旨在为中药罗汉果在饲料添加剂中的应用和临床用药安全提供试验依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1

实验动物。小鼠由中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心提供，昆明种，体重18～22 g，雌雄各半。购回后适应性饲养7 d后进行试验。

1.1.2

试验材料。罗汉果购自天津中医药大学附属医院。

1.2 方法

1.2.1

样品的制备。干燥罗汉果破碎后称取120 g加入400 ml蒸馏水，沸水浸提30 min，滤布过滤煎液，药渣中再次加入400 ml蒸馏水煎煮20 min，合并2次煎液，浓缩体积至120 ml，煎液最终浓度为1 g/ml（1 g生药/ml）。

1.2.2

急性毒性试验。

1.2.2.1

预试验。“1.2.1”中样品用蒸馏水配制成1.0和0.1 g/ml浓度溶液。20只小鼠，雌雄各半，随机平均分为2组。禁食（不禁水）12 h后，分别用1.0 g/ml高浓度和0.1 g/ml低浓度溶液灌胃给药1次，给药体积均为0.03 ml/g。给药后各组小鼠均常规饲养7 d，观察并记录小鼠在10%和100%的药物浓度下死亡数。如果小鼠无死亡，急性毒性试验中可使用最大给药量。

1.2.2.2

最大给药量试验。小鼠40只，雌雄各半，常规适应性饲养7 d后按照体重与性别均分为试验组与空白对照组。首次灌胃前禁食（不禁水）12 h。试验组小鼠以罗汉果提取物最大浓度1 g/ml、最大体积0.03 ml/g灌胃，每隔4 h给药1次，共3次。空白对照组给予等体积生理盐水。给药后正常饲养，连续观察记录7 d内小鼠体重、进食、活动、精神等反应情况。7 d后测定小鼠血液指标，剖解观察主要脏器（肝、心、脾、肾）的变化。取心、肝、脾、肾，用生理盐水冲洗，滤纸吸干后称重，计算各脏器指数（各脏器重量与体重之比）。

1.2.3

微核试验。小鼠50只，雌雄各半，随机平均分为5组。分别设罗汉果水提取物1.0、0.5、0.1 g/kg 3个剂量组。阳性对照组腹腔注射环磷酰胺，注射体积50 mg/kg。阴性对照组灌服同体积蒸馏水。给药2 次，间隔24 h。第2次给药后6 h，将各组小鼠处死，迅速取后肢股骨，小牛血清冲洗骨髓腔，滤膜过滤取滤液制骨髓涂片，自然晾干后甲醇固定10 min，姬姆萨染色20 min，细胞涂片置于油镜下观察。每只小鼠计数1 000个骨髓嗜多染红细胞中含微核的嗜多染红细胞数。

2 结果与分析

2.1 罗汉果水提取物的急性毒性试验

以1 g/ml罗汉果水提液按照最大给药体积对小鼠灌胃后，未观察到明显的中毒症状，无小鼠死亡。因为无法测定半数致死量，所以急性毒性试验可使用最大给药量，小鼠最大给药量（折合成生药）为90 000 mg/kg。

2.2 一般体征观察

3次给药后，除给药当天小鼠少动且进食、饮水稍有减少外，在7 d的观察期内试验组小鼠活动正常、反应灵敏、进食饮水、尿便等均正常，未出现毒性反应，与空白对照组无明显差异。试验组与空白对照组小鼠体重均呈增长趋势，无显著性差异（P>0.05）（表1）。

3 结论与讨论

罗汉果具有较大的综合开发潜力，应对罗汉果根、茎、叶等组织进行全面研究和开发利用，最大限度地发挥其医药价值，不应仅局限于果实。该试验中罗汉果水提取物在最大给药剂量90 000 mg/kg下未导致小鼠死亡，因为半数致死量（LD50）>5 g /kg时药物实际属于无毒性物质，表明罗汉果急性毒性极低，这与以前研究报道相符[6]；致突变试验结果呈阴性，说明罗汉果水提取物无致突变性，但仍要考虑其潜在的遗传毒性[13]、慢性毒性和胚胎发育毒性[14-15]，关于罗汉果的安全性评价有待进一步研究。综上所述，罗汉果无急性毒性，可较安全地应用于临床治疗试验，在畜禽养殖业中具有广阔的应用前景。

参考文献

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