血清高尔基体蛋白73检测在肝细胞癌诊断中的应用

孙学青 朱新兴 殷立奎 李志城

【摘 要】目的：检测血清高尔基体蛋白73（GP73）的含量，并比对血清甲胎蛋白（AFP），以探讨GP73在肝细胞癌（HCC）诊断中的应用价值。 方法：收集HCC患者65例、肝炎或 肝硬化（CH/LC）患者54例、正常健康人员（正常对照组）48例血清样本，分别采用酶联免疫吸附法（ELISA）定量检测GP73及电化学发光法检测AFP。 结果：正常对照组、CH/LC组、HCC组血清GP73浓度分别为（20.3±7.6）ng/ml、（79.6±51.4）ng/ml、（268.5±199.2）ng/ml，HCC组GP73水平明显高于CH/LC组（p<0.001）。HCC标本中GP73的阳性率为66.2%、AFP的阳性率为30.8%，两者差异有统计学意义（p<0.01）。在非HCC患者中GP73的诊断特异性为92.2%（94/102），AFP的诊断特异性为77.4%（79/102）， 两者差异有统计学意义（p<0.05）。 结论：GP73作为HCC诊断的良好血清标志物，明显提高了HCC诊断的灵敏度特异性， GP73的检测受肝部炎症影响很小且不受AFP浓度的影响。

【关键词】肝细胞癌（HCC）；高尔基体蛋白73（GP73）；甲胎蛋白（AFP）

【文章编号】1004-7484（2014）04-1896-01

Detection of serum Golgi protein 73 in hepatocellular carcinoma diagnosis Exploration

Sun Xueqing， Zhu Xinxing， Yin Likui， Li Zhicheng

（Dongying City， Shandong Province People's Hospital， 257091）

【Abstract】Objective：serum Golgi protein 73 （GP73） content and ratio of serum alpha-fetoprotein （AFP）， to explore the GP73 in hepatocellular carcinoma （HCC） diagnosis value. Methods：65 patients with HCC， hepatitis or cirrhosis （CH / LC） 54 patients， normal healthy people （control group） 48 cases of serum samples were used enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA） and quantitative detection of GP73 electrochemiluminescence detection of AFP. Results：normal control group， CH / LC group， HCC GP73 serum concentrations were （20.3 ± 7.6） ng / ml， （79.6 ± 51.4） ng / ml， （268.5 ± 199.2） ng / ml， HCC group were significantly higher levels of GP73 in CH / LC group （p <0.001）. HCC specimens GP73 positive rate of 66.2%， AFP positive rate of 30.8%， the difference was statistically significant （p <0.01）. In the non-HCC patients GP73 diagnostic specificity was 92.2% （94/102）， AFP diagnostic specificity was 77.4% （79/102）， the difference was statistically significant （p <0.05）. Conclusion GP73 good as diagnosis of HCC serum markers， significantly improved the sensitivity and specificity of diagnosis of HCC， GP73 detection by inflammation of the liver has little effect and is not AFP concentration.

【Key words】hepatocellular carcinoma （HCC）； Golgi protein 73 （GP73）； alpha-fetoprotein （AFP）

肝細胞癌（HCC）的增长速度之快已成为一个世界性难题，其发病率在全球位居第4位，总发病患者约56.4万[1]。在我国由于乙型肝炎病毒（HBV）携带者数量之庞大，与此相关的HCC患者已占世界的55%左右，其死亡率在恶性肿瘤中排第2位。在过去相当长的时间里，早期HCC主要依靠影像学手段及血清甲胎蛋白（AFP），但影像学检查对肿瘤体积较小者不易被发现；临床上最常用的AFP也因其敏感性（39%-64%）不高并不令人满意[2]。近年来研究发现多种物质如AFP-L3、磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC3）及肿瘤生长因子（TGF）等可用于早期诊断HCC，其中高尔基体蛋白 73（GP3）被认为是最具潜力的诊断HCC的血清标志物之一。

1 资料与方法

1.1 一般资料 167例血清标本来自我院2011年2月至2012年6月门诊或住院患者及体检人员，其中肝细胞癌（HCC）患者65例，肝炎或肝硬化（CH/LC）患者54例，正常健康人员（正常对照组）48例，男性116例，女性51例，年龄18-79岁。肝病诊断标准及肿瘤诊断标准符合2000年中华医学会传染病与寄生虫病学分会、肝病学分会联合修订的“病毒性肝炎防治方案”中病毒性肝炎诊断标准及中华人民共和国卫生院部医政司组织并由全国肿瘤防治办公室与中国抗癌协会合编的《新编常见恶性肿瘤诊治规范》中有关原发性肝癌等肿瘤疾病的诊断标准，其中影像学为B超检查结果。正常健康人员病毒学检测、肝功能检测项目均为阴性。采集血液标本4ml以3000r/min离心30min，分离血清，-80℃冰箱保存集中检测。

1.2 方法 GP73检测采用双抗体夹心酶联吸附法定量检测，ELISA试剂盒由北京热景生物技术有限公司提供，肝细胞癌判定值为≥150ng/ml；AFP检测采用cobas601罗氏电化学发光免疫分析系统（瑞士Roche公司），肝细胞癌判定值为≥400 ng/ml。

1.3 统计学方法 应用SPSS13.0软件系统进行统计分析，均数比较用t检验，检出率比较用X2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清GP73表达水平

GP73在所有标本中均有表达。正常对照组GP73水平最低（20.3±7.6）ng/ml；CH/LC组GP73水平为（79.6±51.4）ng/ml；两者差异有统计学意义（p<0.01）。HCC组GP73水平为（268.5±199.2 ）ng/ml，与正常对照组和CH/LC组比较，差异有统计学意义（p<0.01）。2.2 HCC和非HCC血清中GP73和AFP检出率比较

在65例HCC患者血清中GP73检出阳性43例，阳性率为66.2%；AFP检出阳性20例，阳性率为30.8%，两者差异有统计学意义（p<0.01）。在共计102例非HCC血清标本中GP73检出阳性8例，阳性率为7.8%；AFP检出阳性23例，阳性率为22.5%，两者差异有统计学意义（p<0.01）。

2.3 CH/LC组、正常对照组血清中GP73和AFP检出率比较

在54例 CH/LC患者中GP73检出阳性6例，阳性率为11.1%；AFP检出阳性15例阳性率为27.8%，两者差异有统计学意义（p<0.05）。在48例正常对照组中GP73检出2例，AFP检出例。3。在非HCC患者中GP73的诊断特异性为92.2%（94/102），AFP的诊断特异性为77.4%（79/102）， 两者差异有统计学意义（p<0.05）。

3 讨论

GP73在多种组织中均有表达，但强弱不等。在小肠、结肠以及胃中呈高表达，而在心脏中表达很少，在肝、肾、脾、肺、子宫及睾丸表达很弱但能检出。在正常肝脏组织GP73主要表达于胆管上皮細胞，而在肝细胞则无表达或表达很少，但是在有HBV及腺病毒感染的肝组织中，胆管细胞表达GP73改变不明显，而在肝细胞则呈高表达。GP73的异常表达与肝细胞癌密切相关。Block等科研小组首先用HBV感染土拨鼠建立HCC模型，应用糖蛋白组学手段分析了患有HCC组和正常组血清中的蛋白表达差异，结果发现HCC组血清中出现一个明显增强的FcA2G2组分，进一步分析发现其代表了GP73组分，从而推测其可能是HCC的重要肿瘤标志物，并在HCC患者中得到证实。此后，国外多项研究也证实了HCC患者血清中GP73含量较其他疾病高，并且在HCC患者其敏感性较AFP高。HCC患者一旦发现基本上为晚期，被公认为“金标准”的血清学指标AFP已在全球范围内广泛用于普查、诊断、疗效判断及复发监测但其敏感性不高，且有报道认为在其他疾病中亦有升高。GP73作为早期诊断HCC的潜在血清肿瘤标志物和我国肝癌高危人群的庞大基数，使GP73研究对降低我国肝癌病死率有着尤为重要意义，多项研究证实其在HCC患者血清中升高[3]。本研究中，GP73在所有标本中均有表达，在HCC患者中GP73的阳性率为66.2%高于AFP的阳性率30.8%，两者差异有统计学意义（p<0.01）。在非HCC患者中GP73的诊断特异性为92.2%，AFP的诊断特异性为77.4%。 GP73用于诊断HCC的灵敏度和特异性均优于AFP。AFP在CH/LC患者中检出阳性率为27.8%；而GP73在CH/LC患者中检出阳性率为11.1%，两者差异有统计学意义（p<0.05）。结果显示AFP诊断HCC容易受到肝部炎症的影响，而 GP73诊断HCC则受肝部炎症影响很小且不受AFP浓度的影响。总之，GP73是诊断HCC的良好血清标志物。

参考文献

[1] Jemal A，Siegel k，Ward E，Hao Y，Xu J，Murray T，Thun MJ.cancer statistics.2008.CA Cancer J clin.2008；58：71—98

[2] 徐海峰，杨华渝，张宏冰，毛一雷.改变肝癌早期诊断和治疗现状的新肝癌血清标志物.基础医学与临床[J].2008；28：103—109

[3] 李淑群，陈谦. GP73与肝脏疾病关系的研究进展. 世界华人消化杂志[J].2010；18（20）：2117—2120