高效液相色谱法测定止咳平喘类药中盐酸麻黄碱含量

吴芳花，邬月鑫

（1．广东省河源市食品药品检验所，广东 河源 517000； 2．广东医学院药学院，广东 东莞 523808）

盐酸麻黄碱属于芳香族氨基醇衍生物，为肾上腺素受体激动药，具有松弛平滑肌、收缩血管及中枢兴奋作用。主要用于治疗支气管哮喘、过敏性反应、鼻黏膜肿胀等症，可单独组方或与其他药物组成复方增效。用药过量时易引起精神兴奋、失眠、不安、神经过敏、震颤等症状，有严重器质性心脏病或接受洋地黄治疗的患者，也可引起意外的心律紊乱。服用麻黄碱后可明显增加运动员的兴奋程度，有极大的不良反应。故这类药品属国际奥委会严格禁止的兴奋剂。由于其止咳平喘效果显著，所以不少厂家虽未在处方中标示含盐酸麻黄碱，但却暗自添加该成分，以求达到更好疗效，笔者采用高效液相色谱法对止咳平喘类药的各种制剂中盐酸麻黄碱的含量进行测定[1－2]，结果表明，方法简便，结果准确，重现性好，可用于止咳平喘类药中盐酸麻黄碱的质量控制。

1 仪器与试药

1200型高效液相色谱仪（安捷伦公司，机身编号DE62964787），Edipse XDB－C18柱（安捷伦公司，柱号为 993967－902），UV －2450型紫外－可见分光光度计（机身编号A10834233686CS），台式电动离心机（HJDH1．6），超声波清洗器（KQ250DA）。盐酸麻黄碱对照品（中国药品生物制品药检定所，批号为171237－200505，105℃下干燥3 h）；乙腈为色谱纯，磷酸二氢钾、磷酸均为分析纯；强力枇杷胶囊（江西药都樟树制药有限公司，批号为091001）咳特灵片（广州白云山制药总厂，批号为1110548）；罗汉果止咳糖浆(桂林益佰漓江制药有限公司，批号为120304)；止嗽化痰丸（贵阳德昌祥药业有限公司，批号为20100141）；水为超纯水。

2 方法与结果

2．1 色谱条件

色谱柱：Edipse XDB －C18柱(150 mm ×4．6 mm，5 m)；流动相：乙腈 －0．02 mol／L 磷酸二氢钾溶液（用磷酸调 pH 至 3．0） －0．2%三乙胺（5 ∶95 ∶0．1）；检测波长：206 nm；流速：1．0 mL ／min；进样量：10 μL；柱温：35 ℃ 。

2．2 溶液制备

称取盐酸麻黄碱对照品约10 mg，精密称定，置50 mL容量瓶中，加水适量使溶解，并稀释至刻度，作为对照品贮备液。取对照品贮备液5 mL至25 mL容量瓶中，加水稀释至刻度，得质量浓度为40 μg／mL的对照品溶液。分别取各种制剂，加水适量，超声提取10 min，加水稀释至质量浓度为40 μg／mL（适当时可先定容制得浓溶液离心后取上清液再稀释），并用微孔滤膜0．45 μm过滤后取续滤液作为阴性对照品溶液。参照处方，添加有效浓度的盐酸麻黄碱，模仿制作工艺，配制盐酸麻黄碱的阳性样品，并按上述方法配制供试品溶液。

2．3 方法学考察

线性关系考察：精密量取对照品贮备液5 mL置25 mL容量瓶中用水定容至刻度，得质量浓度为 40 μg／mL的对照品溶液。分别进样 2，5，10，20，30 μL，将所得峰面积与所对应的对照品溶液质量浓度进行线性回归，得回归方程 Y＝24．18 X＋3．39，r＝1。结果表明，盐酸麻黄碱质量浓度在 8．144 ～122．16 μg／mL 范围内与峰面积呈良好线性关系，信噪比等于3时检测限为2．1 ng。

加样回收试验：取制备好的阳性咳特灵片样品精密加入盐酸麻黄碱对照品适量，按2．2项下方法制备供试品溶液。按拟订色谱条件测定，计算平均回收率和 RSD。结果见表1。

稳定性试验：取糖浆剂及片剂阳性供试品溶液，分别于0，1，2，4，8，12，24 h 时按拟订色谱条件进样，测定并记录峰面积。结果的 RSD为0．09%和0．10%，表明供试品溶液在24 h内稳定。

精密度试验：取2．2项下对照品溶液，连续进样6次。结果的RSD为0．3%，表明仪器精密度良好。

重复性试验：取同一批号样品6份，分别制备阳性溶液进行含量测定。结果含量平均值为 0．791 0 g／L，RSD 为 0．9% ，表明方法重复性良好。

表1 盐酸麻黄碱加样回收试验结果（n＝9）

2．4 样品含量测定

取多种剂型的止咳平喘类药物，包括胶囊、片剂、丸剂、口服液，按2．2项下方法配制供试品溶液，按拟订色谱条件进样测定，记录色谱图(图1)，计算盐酸麻黄碱的含量，结果胶囊、片剂、丸剂、糖浆剂中，盐酸麻黄碱含量分别为 0．321 5，0．212 5，0．278 2，0．791 0 g ／L。

图1 高效液相色谱图

3 讨论

由于盐酸麻黄碱也为制造冰毒的重要佐剂，已被纳入易制毒化学品管理。市面上已难买到标注含有盐酸麻黄碱的样品，所以只能用随机购买的各种样品中按处方工艺进行添加盐酸麻黄碱进行对比试验[3－4]。盐酸麻黄碱一般溶于乙醇、氯仿、乙醚，也溶于水。由于该类药大部分为中成药，成分复杂，同时考虑到环保安全的原则，故优先选择直接用水超声提取的方法进行提取[5－6]，结果证明该法操作简便、快捷、重现性好。取质量浓度为40 μg／mL的对照品溶液，置紫外－可见分光光度计下测定其紫外吸收光谱，结果显示，盐酸麻黄碱在206 nm波长处有最大吸收，故选择206 nm为测定波长。采用磷酸二氢钾溶液体系峰形不好，柱效低，通过添加三乙胺扫尾剂[7]和磷酸调节pH至3．0，以这样低有机相，高水相系统进行分离，不但峰形较好，分离度达到要求，杂质出峰时间也缩短，故缩短整个分析时间。本试验使用多种色谱柱，分别采用不同的高效液相色谱仪，峰形、分离度、理论板数都能达到要求。故本方法具有较好的耐用性。

参考文献：

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[7]陈 超.高效液相色谱法测定消咳宁片中盐酸麻黄碱含量[J]．中国药业，2009，18(6):39 －40．