英夫利西单抗对溃疡性结肠炎患者外周血淋巴细胞亚群的影响

田 柳

(重庆公安消防医院，重庆 400060）

溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）是一种病因尚不清楚的慢性非特异性炎症，好发于结肠，多呈连续性弥漫性分布，甚至累及全结肠及末段回肠，临床表现为腹泻、腹痛、黏液脓血便，长期发展还有诱发癌变的可能[1]。目前研究认为，UC的发病与遗产易感性、环境因素、免疫系统紊乱等多因素密切相关[2]。近年来，虽然英夫利西单抗（IFX）对UC的治疗取得了较满意的疗效，但约有30%的患者对IFX治疗不敏感[3]。因此，寻找影响IFX应答的因素对于UC的治疗具有重要价值。本研究中旨在观察IFX对UC患者外周血淋巴细胞亚群分布的影响及疗效，现报道如下。

1 资料和方法

1.1 一般资料

选择2011年3月至2014年1月医院接受IFX治疗的UC患者为研究对象，研究方案通过医院伦理委员会批准同意。所有患者均符合2007年中华医学会消化病学分会炎症性肠病协作组制订的《对我国炎症性肠病诊断治疗规范的共识意见（2007年，济南）》诊断标准[4]，剔除未按时随访和 IFX治疗少于3次者。纳入研究的23例患者作为观察组，其中男12例，女11例；年龄21～45 岁，平均 (31.8±5.5)岁；根据临床病程，初发型 4 例，慢性复发型 12例，慢性持续型 7例。选择医院同期健康体检人员23例作为对照组，其中男12例，女11例；年龄23～47岁，平均(32.6±5.3)岁。所有研究对象均签署知情同意书。

1.2 方法

观察组患者于入组第0，2，6周分别接受注射用英夫利西单抗（商品名类克，瑞士Cilag AG公司，规格为每支100 mg，国药准字 S20060024）静脉滴注治疗，剂量为5 mg/kg，滴注时间大于2 h，第14周维持治疗1次，总疗程14周。

1.3 观察指标

参照文献[5]分析观察组治疗前及治疗14周后Mayo评分和简化CD活动指数（CDAI）评分及内镜下CD严重度指数（CDEIS）评分。采集观察组治疗前1 d、治疗14周后及对照组同期空腹静脉血样本，应用美国Backman Coulter公司Ac.T Diff2型流式细胞仪及苏州生物基因有限公司检测免疫试剂检测样本总T淋巴细胞（CD3＋）、总 B 淋巴细胞(CD3－，CD19＋)、CD4＋T 淋巴细胞（CD3＋，CD4＋）、CD8＋T 淋巴细胞（CD3＋，CD8＋）及 NK 细胞（CD16＋，CD56＋）的比例。

1.4 统计学处理

运用 SPSS 15.0统计学软件对数据进行处理，计量资料以±s表示，采用 t检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

结果见表1至表3。与治疗前比较，观察组治疗后 Mayo评分、CDAI评分及 CDEIS评分均显著降低（P＜0.05）。应用 IFX治疗前，观察组 16例（69.57%)患者临床治疗有效，7例（30.43% ）患者治疗无效；治疗有效组患者总T淋巴细胞、CD8＋T淋巴细胞及 NK细胞比例与治疗无效组相比差异显著（P＜0.05），总B淋巴细胞及 CD4＋T淋巴细胞比例间未见明显差异（P＞0.05）。与治疗前比较，观察组治疗后总T淋巴细胞比例均明显增高（P ＜ 0.05），总 B 淋巴细胞比例未见明显改变（P ＞0.05）；观察组治疗后CD4＋T淋巴细胞、CD8＋T淋巴细胞及NK细胞比例均显著增高（P＜0.05）。与对照组比较，治疗后观察组总T淋巴细胞、总 B淋巴细胞、CD4＋T淋巴细胞及 CD8＋T淋巴细胞比例未见明显差异（P ＞0.05），NK 细胞比例显著降低（P ＜0.05）。

表1 观察组治疗前后Mayo评分、CDAI评分及CDEIS评分比较(±s，分，n＝23)

表1 观察组治疗前后Mayo评分、CDAI评分及CDEIS评分比较(±s，分，n＝23)

注：与治疗前相比，*P ＜0.05。

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表2 IFX治疗前观察组治疗有效和无效患者外周血淋巴细胞亚群分布情况（±s）

表2 IFX治疗前观察组治疗有效和无效患者外周血淋巴细胞亚群分布情况（±s）

注：与治疗无效组相比，△P ＜0.05。

组别有效组(n＝1 6)无效组(n＝7）总T淋巴细胞8 8.2 ± 8.1△7 7.1 ± 7.8总B淋巴细胞1 0.2 ± 2.9 8.9 ± 4.1 C D 4＋T 淋巴细胞4 3.6 ±9.1 4 1.3 ±8.2 C D 8＋T 淋巴细胞4 1.1 ± 8.6△3 1.2 ± 1 2.4 N K细胞8.5 ±4.3△4.4 ±3.1

表3 观察组治疗前后与对照组外周血淋巴细胞亚群分布情况（±s，n＝23）

表3 观察组治疗前后与对照组外周血淋巴细胞亚群分布情况（±s，n＝23）

注：与观察组治疗前相比，*P ＜0.05；与对照组相比，＃P ＜0.05。

组别观察组 治疗前治疗后对照组总T淋巴细胞5 6.8 ± 9.7＃7 0.7 ± 9.2*7 1.8 ± 1 0.1总B淋巴细胞9.4 ±6.3 9.5 ±3.8 9.6 ±6.5 C D 4＋T 淋巴细胞3 3.1 ±8.5＃4 2.3 ±8.2*4 5.8 ±7.6 C D 8＋T 淋巴细胞3 1.2 ± 1 2.4＃4 1.3 ± 1 0.6*4 4.7 ± 1 0.9 N K细胞5.0 ± 2.6＃7.2 ± 3.4*＃1 2.9 ± 7.2

3 讨论

生理状态下，免疫反应是在复杂而精确的调节下进行的，免疫反应异常是UC的重要发病机制之一。大量临床研究显示，UC患者存在严重的细胞免疫功能紊乱，尤其是活动期UC患者[6]。肠道免疫反应的调节有赖于免疫细胞、细胞因子、免疫球蛋白等的参与。肿瘤坏死因子α（TNF－α）是UC发病机制中重要的促炎症因子，表达水平在UC患者中显著高于正常人群，且其升高水平与病变范围及病情严重程度呈正相关[7]。IFX与TNF－α具有很高的亲和力，从而可有效抑制其生物活性，并在一定程度上诱导分泌 TNF－α的免疫细胞的凋亡。一项多中心研究显示[8]，97.0%的UC患者在接受3次IFX治疗后达到临床缓解，1年后71.3%的患者持续临床缓解，3年后51.5%的患者持续缓解，3次治疗结束后 72.1%的患者经内镜检查达到“黏膜愈合”。Caviglia等[9]对IFX维持缓解的有效性进行了长期随访研究，结果显示，78%的患者可保持最初的临床改善状态，平均缓解时间达35.5个月，疗效满意。

本研究中，观察组经 IFX治疗后 Mayo评分、CDAI评分及CDEIS评分均较治疗前显著改善，提示患者临床症状得到有效缓解，IFX治疗UC疗效确切。观察组接受IFX治疗前，临床治疗有效组患者总T淋巴细胞、CD8＋T淋巴细胞比例及NK细胞显著高于治疗无效组，也说明患者治疗敏感性与淋巴细胞亚群的分布特点切相关，这与周有连等[10]的研究结果基本一致。T细胞在机体防御和免疫监测反应中具有重要作用。近年来大量研究发现，UC患者总T细胞数量明显下降，导致机体对抗外来抗原免疫的监测作用减弱，从而引起细胞免疫调节失衡，这可能是诱发UC的重要因素[11]。本研究中23例UC患者治疗前总T淋巴细胞、CD4＋T淋巴细胞、CD8＋T淋巴细胞及NK细胞比例与健康对照组相比均明显降低，也证实了这一观点。Mamula等[12]的研究还发现，UC患者活动期外周血T淋巴细胞明显降低，其中CD8＋T淋巴细胞下降较 CD4＋T淋巴细胞更明显，CD4/CD8比值明显增高。王红等[13]的研究还发现，IFX可通过影响T－bet和RORC转录因子水平来调节CD4＋T细亚群数量，通过调节Th亚群相关细胞因子的水平，降低机体促炎因子的水平，从而达到调节机体免疫平衡、治疗炎症性肠疾病的作用。本研究中观察组治疗后总T淋巴细胞、CD4＋T淋巴细胞、CD8＋T淋巴细胞及NK细胞比例与治疗前相比均显著增高，提示IFX能有效纠正UC患者淋巴细胞分布异常和细胞免疫功能紊乱，疗效显著。

综上所述，外周血淋巴细胞亚群的改变与UC的发病密切相关，IFX能有效纠正患者淋巴细胞分布异常和细胞免疫功能紊乱，疗效确切。由于本研究样本量较少，同时肠道黏膜淋巴细胞亚群的变化可能较外周血更能有效反映UC患者病情的变化及治疗的疗效。因此，IFX对UC患者淋巴细胞细胞亚群分布的影响有待进一步深入研究。

参考文献：

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