张顺瑜,周云,邓亚芳,朱娜,张晨冬,莫建初
(1.杭州市余杭区白蚁防治所,浙江 杭州 311100;2.浙江大学昆虫科学研究所,浙江 杭州 310058)
白蚁是目前世界范围内的重要害虫,在适宜的环境条件下繁殖能力强,给许多国家造成了极大的经济损失。我国南方地区由于气候温暖湿润特别适宜白蚁生存,因而白蚁危害更为严重。为了防治白蚁,人们利用毒死蜱、氰戊菊酯、联苯菊酯、氟虫腈、吡虫啉、氟铃脲、伊维菌素等对其种群进行控制[1]。然而,这些化学药剂对环境或多或少有一些负面影响。为了获得更加环境友好的白蚁防治药剂,我们在室内测定了AcMNPV悬浮剂对台湾乳白蚁的毒杀效果。
AcMNPV悬浮剂是一种新型的生物杀虫剂。上世纪60年代后期,Vail等从美国加利福尼亚洲1头苜蓿银纹夜蛾幼虫体内分离出1株多粒包埋的核型多角体病毒(Autographa californica nuclear polyhedrosis virus,AcMNPV),因它能交错感染30多种鳞翅目害虫而受到重视[2]。
台湾乳白蚁Coptotermes formosanus Shiraki是一种典型的土木两栖性白蚁,它既能栖居地下,又能生活在地上,也能在特定的环境中如树干、船体内等处营巢,扩散和适应力很强。但它需要不断获得水分,因此它的巢一般筑在接近水源的地方,在主巢至水源之间有粗大的吸水线[1]。
本研究主要是通过滤纸浸药法和松木粉混药法来测定不同浓度的AcMNPV对台湾乳白蚁的毒杀效果。
1.1 供试白蚁 供试的台湾乳白蚁巢挖取自浙江省诸暨市的行道树内。搬回室内后饲养在黑暗的环境中,饲养温度为(25±1)℃,相对湿度为(65±5)%。试验时,用湿润滤纸从巢内诱取健康成熟的工蚁。
1.2 供试药剂 AcMNPV悬浮剂的商品名为奥绿1号悬浮剂,其有效成分为10亿PIB/mL,由安徽绩溪庆丰农化有限公司生产。
1.3 试验方法
1.3.1 含药滤纸对白蚁的毒杀效果 参考刘自力等[3]的方法,用纯净水将药剂稀释10倍、100倍、500倍、1000倍、1500倍和10000倍,以不加药的纯净水作对照。在培养皿(D=90 mm)内放置1张清洁的滤纸(D=90 mm),用移液管将1.2 mL药液或纯净水均匀地滴加在滤纸上,使滤纸刚好湿润。然后,将30只健康成熟的工蚁移入培养皿内。每个药液浓度及对照各设3个重复。每天定时检查,记录培养皿中白蚁的死亡情况,检查时根据滤纸的湿润情况滴加适量的水。
1.3.2 混药松木粉对白蚁的毒杀效果 用过40目筛的松木粉将药剂稀释500倍、1000倍和1500倍。用松木粉稀释药剂时,先将松木粉放在搅拌机内,然后将需要量的药剂滴加在松木粉中,用搅拌机充分搅拌混匀。对照松木粉则滴加相同量的纯净水,并搅拌均匀。
试验分强迫取食和选择取食2种方式进行[4]。1)强迫取食。将10 g过20目筛的细沙均匀铺在培养皿(D=90 mm)内,形成薄薄的沙层,并用纯净水将沙润湿。称取0.2 g的饵剂或对照松木粉置于塑料薄片上,然后放在培养皿内的细沙上。在培养皿内放入30只健康成熟的工蚁。每种处理各设3个重复。每天定时检查,记录培养皿内白蚁的死亡情况,检查时根据需要滴加适量的水于细沙中以供白蚁饮用。2)选择取食。将40 g过20目筛的细沙均匀铺在培养皿(D=160 mm)内,形成薄薄的沙层,并用纯净水将沙润湿。在细沙表面放置2个塑料薄片,一个塑料薄片上放0.2 g的无药松木粉,另一个塑料薄片上放0.2 g的饵剂或无药松木粉。在培养皿内放入40只健康成熟的工蚁。每种处理各设3个重复。每天定时检查,记录培养皿内白蚁的死亡情况,检查时根据需要滴加适量的水于细沙上。
1.4 数据统计与分析 采用Excel软件、DPS软件等统计软件对试验数据进行汇总和方差分析。
2.1 不同浓度药剂处理滤纸时白蚁的死亡情况
AcMNPV悬浮剂的稀释倍数不同,对白蚁的毒杀效果差别明显。从死亡率均值大小来看,稀释倍数越低,对白蚁的毒杀能力越强,说明这种药剂对白蚁的毒杀效果与药液的浓度有关(表1)。
表1 不同浓度药剂处理下白蚁的死亡率%
2.2 不同浓度药剂处理松木粉时白蚁的死亡情况
2.2.1 强迫取食含药松木粉时白蚁的死亡情况用松木粉将AcMNPV悬浮剂稀释500~1500倍,然后用它们分别饲喂台湾乳白蚁工蚁时,取食病毒处理松木粉的白蚁均在8~9 d的时间里全部死亡,但在供试的浓度条件下,药剂对白蚁的致死效果差异不明显(表2)。
表2 强迫取食含药松木粉时白蚁的死亡率%
2.2.2 选择取食含药松木粉和对照松木粉时白蚁的死亡情况 在同时提供无药松木粉和病毒处理松木粉给白蚁取食的情况下,3种浓度处理的白蚁均在10多天的时间内基本全部死亡,且3种处理浓度间白蚁死亡的速度差异不很明显,只相差2~3 d(表3)。与强迫取食相比,选择取食条件下白蚁的死亡速度要慢一些。
表3 选择取食含药松木粉和对照松木粉时白蚁的死亡率 %
本研究采用含药滤纸饲喂法和含药松木粉饲喂法在室内测定了AcMNPV悬浮剂对台湾乳白蚁的毒杀效果。研究结果表明,AcMNPV悬浮剂的500倍至1500倍稀释液,对台湾乳白蚁工蚁具有良好的毒杀效果,取食病毒液处理食物的白蚁会在几天至十几天的时间内死亡,说明AcMNPV悬浮剂可在生产上用于防治白蚁。不过在现场条件下,AcMNPV悬浮剂能否灭杀白蚁巢群,则需进一步的研究验证。AcMNPV悬浮剂是一种微生物农药,目前的研究结果表明,这种病毒对一些鳞翅目害虫具有良好的致死效果[5-6],但其对白蚁的毒杀效果在现有的文献中未见报道。在害虫的生物防治中,病原微生物的利用是重要的一环。其中,从病原微生物的种类来看,以病毒为最多,在后效作用及安全性方面也以病毒为最好。因此,许多人认为病原病毒是最有发展前途的微生物农药之一。
目前,各国科学家已从鞘翅目、双翅目、半翅目、同翅目、膜翅目、等翅目、鳞翅目、脉翅目、蜻蜓目、直翅目和毛翅目等11个目的900多种昆虫中发现了1300余种病毒和病毒样粒子,它们分属于杆状病毒科、痘病毒科、虹色病毒科、细小病毒科、肠孤病毒科、微核糖核酸病毒科、弹状病毒科、松大蚕蛾β病毒科和野田病毒科等9个科[7]。在这些昆虫病毒中,特别是来源于等翅目昆虫的病毒中,可能存在对白蚁具良好致病效果的病毒,如果对它们开展深入的研究,则可望研发出具应用前景的防治白蚁的病毒产品。
谢鸣荣等[8]从死亡的黑翅土白蚁体内分离到了1种属于微核糖核酸科的昆虫病毒,将该病毒提纯液(浓度为109/mL)配制成诱饵供白蚁取食时,所有供试白蚁均在7 d后死亡。对死亡白蚁所做的电镜检查结果表明,虫体内含有供试的病毒颗粒,证明白蚁是被该病毒感染致死。在国外,Gibbs等[9]从鼻白蚁科乳白蚁属的白蚁Coptotermes lacteus(Froggatt)体内分离到了1种可致该种白蚁染病的病毒,这种病毒与导致蜜蜂Apis mellifera Linnaeus急性麻痹的病毒相似。从鳞翅目夜蛾科昆虫灰翅夜蛾Spodoptera littoralis Boisduval体内分离得到的1种核型多角体病毒对木白蚁科欧洲木白蚁Kalotermes flavicollis(Fabricius)的室内巢群具有较强的感染性,被病毒感染的白蚁会在2~10 d内死亡[10]。进一步的组织形态学研究结果表明,该种病毒主要感染欧洲木白蚁的前肠、贲门瓣、幽门瓣、后肠、肠道肌肉、脂肪体、神经组织、肌肉、输卵管、翅芽若蚁、气管皮膜组织、马氏管和真皮等,对中肠的感染能力有限。不过,当白蚁被病毒严重感染时,其中肠上皮细胞会脱落到肠腔液中[11]。因此,Al Fazairy和Hassan[11]认为可利用这种核型多角体病毒在现场防治欧洲木白蚁,但现场防治效果有待进一步研究。
目前,国内外有关病毒防治白蚁的研究比较少。到目前为止,病毒防治白蚁的研究仍局限于室内试验,野外试验尚未开展,因为病毒本身的一些缺陷(如在暴露环境下易受外界温湿度的影响、病毒的生产易受活体宿主的限制、成本较高等)限制它的开发和应用[12]。在今后的研究工作中,应加强病毒产品如病毒饵剂的研究,以便为生产上的白蚁防治工作提供新的手段。
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