白细胞介素12B基因多态性与丙型肝炎病毒感染相关性的Meta分析

王 凤，孙朝晖

南方医科大学附属广州军区广州总医院，广东广州 510010

白细胞介素12B基因多态性与丙型肝炎病毒感染相关性的Meta分析

王 凤，孙朝晖

南方医科大学附属广州军区广州总医院，广东广州 510010

目的探讨白细胞介素12B(interleukin 12B，IL-12B)基因3'UTR A＞C多态性与丙型肝炎病毒(hepatitis C virus，HCV)感染的相关性。方法计算机检索PubMed、Cochrane Library、CBM、万方、知网、维普等数据库，收集1988年11月- 2014年4月关于IL-12B基因3'UTR A＞C多态性与HCV感染相关性的病例对照研究。由两名评价者独立评价纳入研究的质量并提取资料，并用Stata12.0软件进行Meta分析。结果6项病例对照研究符合纳入标准，包括1 396例患者和1 254例对照者。Meta分析结果显示，人群中携带3'UTR C等位基因者发生HCV感染的风险是非携带者的1.12倍(OR=1.12，95% CI：0.90 ～ 1.39)，差异无统计学意义(Z=0.10，P＞0.05)。基于种族的亚组分析显示，亚裔人群中携带3'UTR C等位基因者发生HCV感染的风险是非携带者的1.04倍(OR=1.04，95% CI：0.67 ～ 1.61)，差异无统计学意义(Z=0.18，P＞0.05)；非亚裔人群中亦未发现相关性(Z=1.56，P＞0.05)。结论基于目前研究结果显示，IL-12B基因3'UTR A＞C多态性与HCV感染风险无明显相关性。

白细胞介素12B；丙型肝炎病毒；基因多态性；Meta分析

资料和方法

1 纳入与排除标准 纳入标准：1)公开发表的关于IL-12B基因多态性与HCV感染相关的病例对照研究；2)可获得相关基因频率分布的数据，对于多个重复报道的研究，纳入其中最近发表的或者提供大样本量的研究；3)对照组基因分布服从Hardy-Weinberg平衡(H-W平衡)。排除标准：1)未设立对照组的研究；2)动物实验研究；3)病例报告、综述等非病例对照研究。

2 检索策略 计算机检索PubMed、Cochrane Library、万方、知网、维普等数据库，检索时间为1988年11月- 2014年4月。检索词包括白细胞介素12，多态性，丙型肝炎病毒，IL-12，polymorphism，HCV。语种为中、英文，无年龄限制。

3 数据提取 由2名评价者根据纳入标准，独立对文献进行筛选，意见不一致时通过第三方讨论解决分歧。主要数据信息包括：第一作者、发表时间、国家、种族、研究设计、病例组和对照组例数、基因检测方法、等位基因或基因型频率、对照组H-W平衡情况等。

4 纳入文献质量评价 采用Newcastle-Ottawa Scale (NOS)标准评价纳入研究的方法学质量[5]。NOS评分对3部分进行评价：1)研究对象的选择；2)研究对象的可比性；3)危险因素的暴露情况。评分采用9分制，1 ～ 4分为低质量，5 ～ 9分为高质量。

5 统计学方法 采用Stata12.0统计软件进行Meta分析。合并效应量选用比值比(OR)以及95% CI。对纳入研究进行异质性检验，各研究结果间无异质性采用固定效应模型，否则采用随机效应模型，P＜0.1或I2＞50%提示各研究间存在异质性。同时，根据种族进行亚组分析。敏感性分析为依次排除单个文献后重新进行Meta分析，估计综合效应大小。采用Begg漏斗图分析纳入文献是否存在发表偏倚(P＜0.05为存在发表偏倚)。

结果

1 文献检索结果 根据检索词共获得9篇相关文献，其中1篇无健康对照组[6]，1篇为重复发表文献[7]，1篇研究目的不符[8]，最终纳入6篇文献，包括1 396例患者和1 254例对照者，所有纳入研究的对照组基因型频率均符合H-W平衡。纳入文献的基本特征及质量评分见表1、表2。

2 Meta分析结果 人群中携带3'UTR C等位基因者发生HCV感染的风险是非携带者的1.12倍(OR=1.12，95% CI：0.90 ～ 1.39)，差异无统计学意义(Z=0.10，P＞0.05)。基于种族的亚组分析显示，亚裔人群中携带3'UTR C等位基因者发生HCV感染的风险是非携带者的1.04倍(OR=1.04，95%CI：0.67 ～ 1.61)，差异无统计学意义(Z=0.18，P＞0.05)；非亚裔人群中亦未发现相关性(OR=1.17，95%CI：0.96 ～ 1.42；Z=1.56，P＞0.05)。相应基因型分析与等位基因分析结果一致。见表3，图1，图2。

表1 Meta分析纳入研究的基线特征Tab. 1 Main characteristics of the studies that were included in the meta-analysis

表2 IL12B 3'UTR多态性基因型和等位基因在HCV感染患者及正常对照者中的分布Tab. 2 Genotype and allele distribution of the IL12B 3'UTR polymorphism among HCV patients and controls that were included in the meta-analysis (n, %)

图 1 IL-12 B基因 3'UTR (C vs A)等位基因与HCV感染Meta分析森林图Fig.1 Forest fi gure of relationship between IL-12B 3'UTR C vs A polymorphism and HCV infection

图 2 IL-12B基因3'UTR (AC + CC vs AA)基因型与HCV感染 Meta分析森林图Fig.2 Forest fi gure of relationship between IL-12B 3'UTR AC + CC vs AA genotypes and HCV infection

3 敏感性分析 依次单独剔除1篇文献后，各合并效应量均无明显改变。但在C vs A和CC + AC vs AA模型分析中，当剔除Suneetha等[11]文献时，研究间异质性消失(P=0.27)；其他遗传模型未见变化。

4 发表偏倚评价 漏斗图分析结果显示，IL-12B基因3'UTR A＞C多态性与HCV感染相关性Meta研究所纳入文献分布整体比较集中，左右基本对称，未见发表偏倚(P＞0.05)。见图3。

图 3 IL-12B基因3'UTR与HCV感染 Meta分析Begg漏斗图Fig.3 Begg's funnel plot of relationship between IL-12B 3'UTR genotypes and HCV infection

讨论

有效的细胞免疫应答是病毒感染的关键，如细胞因子基因多态性，可以通过免疫反应决定疾病进展的结果[15]。IL-12是促进和维持抗病毒免疫应答的关键性细胞因子[16]。许多慢性感染，包括HCV，都与IL-12的分泌相关[17]。此前有多项研究报道，IL-12B基因3'UTR多态性与IL-12的分泌有关[18-20]。但其与HCV感染的相关性的研究结果尚存在争议，故本文就此采用循证医学Meta分析的方法分析IL-12B基因3'UTR多态性与HCV感染的相关性。

本文研究共纳入6项病例对照研究，包括1 396例患者和1 254例对照者。其中4项研究认为IL-12B基因3'UTR A＞C多态性与HCV感染相关，其他研究则认为两者无相关性[11-13]。Meta分析结果显示，IL-12B基因3'UTR A＞C多态性与HCV感染不相关，基于种族的亚组分析也没有发现两者关联。

异质性是影响本研究结果可靠性的主要因素，CvsA和CC + ACvsAA遗传模型经异质性检验存在异质性。敏感性分析显示，C vs A模型分析中，当剔除Suneetha等[11]文献时，研究间异质性消失(P=0.27)；在CC+AC vs AA模型分析中，剔除Suneetha等[11]文献后，研究间异质性亦消失(P=0.11)。说明此文献可能是这两种遗传模型的异质性所在。该研究认为：IL-12B基因多态性与HCV感染无明显相关性，但同亚组的Youssef等[13]、朱蓓[14]文献研究结果却表明：IL-12B基因型的分布差异影响HCV感染的结果，这可能导致了异质性的产生。针对种族的亚组分析中，白种人亚组各个文献同质，亚洲人种亚组仍存在异质性，说明针对不同人种的研究可能会导致异质性。

本文研究存在一定的局限性：1)虽然已纳入符合标准的可查到的相关文献，但是仍然可能有符合纳入标准而未被纳入的研究；2)经Begg漏斗图检测，未提示存在发表偏倚，但可能存在潜在的发表偏倚；3)可能存在潜在的干扰因素，如种族、年龄、性别、地域分布等。

尽管存在上述局限性，本研究仍可较客观地反应IL-12B基因3'UTR A＞C多态性与HCV感染的相关性。因此，基于目前研究结果，可得到以下初步结论：IL-12B基因3'UTR A＞C多态性与HCV感染无相关性。由于文献数量及样本量的局限，本研究结论尚需更多前瞻性试验研究进一步加以证实。

1 杨锡琴.丙型肝炎病毒血清学分型方法的建立及初步临床评价［D］.北京：中国人民解放军军事医学科学院，2013.

2 Lavanchy D. The global burden of hepatitis C［J］. Liver Int， 2009，29（S1）：74-81.

3 Czepiel J， Biesiada G， Mach T. Viral hepatitis C［J］. Pol Arch Med Wewn， 2008， 118（12）：734-740.

4 宋舸，袁玫，卢世璧.白细胞介素-12临床应用研究进展［J］.中华肿瘤防治杂志，2007，14（1）：75-79.

5 曾宪涛，刘慧，陈曦，等.Meta分析系列之四：观察性研究的质量评价工具［J］.中国循证心血管医学杂志，2012，4（4）：297-299.

6 Yin LM， Zhu WF， Wei L， et al. Association of interleukin-12 p40 gene 3'-untranslated region polymorphism and outcome of HCV infection［J］. World J Gastroenterol， 2004， 10（16）： 2330-2333.

7 Hegazy D， Thurairajah P， Metzner M， et al. Interleukin 12B gene polymorphism and apparent resistance to hepatitis C virus infection［J］. Clin Exp Immunol， 2008， 152（3）： 538-541.

8 Lee JH， Teuber G， Von Wagner M， et al. Antiviral effect of human recombinant interleukin-12 in patients infected with hepatitis C virus［J］. J Med Virol， 2000， 60（3）： 264-268.

9 Mueller T， Mas-Marques A， Sarrazin C， et al. Influence of interleukin 12B （IL12B） polymorphisms on spontaneous and treatment-induced recovery from hepatitis C virus infection［J］. J Hepatol， 2004， 41（4）： 652-658.

10 Ksiaa Cheikhrouhou L， Sfar I， Aounallah-Skhiri H， et al. Cytokine and apoptosis gene polymorphisms influence the outcome of hepatitis C virus infection［J］. Hepatobiliary Pancreat Dis Int， 2011， 10（3）：280-288.

11 Suneetha PV， Goyal A， Hissar SS， et al. Studies on TAQ1 polymorphism in the 3’untranslated region of IL-12P40 gene in HCV patients infected predominantly with genotype 3［J］. J Med Virol， 2006， 78（8）： 1055-1060.

12 Houldsworth A， Metzner M， Rossol S， et al. Polymorphisms in the IL-12B gene and outcome of HCV infection［J］. J Interferon Cytokine Res， 2005， 25（5）：271-276.

13 Youssef SS， Abd El Aal AM， Nasr AS， et al. Interleukin-12B gene polymorphism frequencies in Egyptians and sex-related susceptibility to hepatitis C infection［J］. J Interferon Cytokine Res， 2013， 33（8）：415-419.

14 朱蓓.中国血液透析人群丙型肝炎病毒感染及与白细胞介素12B基因多态性关系研究［D］.南京：南京医科大学，2009.

15 Hill AV. The immunogenetics of human infectious diseases［J］. Annu Rev Immunol， 1998， 16：593-617.

16 Morahan G， Huang D， Wu M， et al. Association of IL12B promoter polymorphism with severity of atopic and non-atopic asthma in children［J］. Lancet， 2002， 360（9331）： 455-459.

17 Piazzolla G， Tortorella C， Fiore G， et al. Interleukin-12 p40/p70 ratio and in vivo responsiveness to IFN-alpha treatment in chronic hepatitis C［J］. J Interferon Cytokine Res， 2001， 21（7）： 453-461.

18 Morahan G， Huang D， Ymer SI， et al. Linkage disequilibrium of a type 1 diabetes susceptibility locus with a regulatory IL12B allele［J］. Nat Genet， 2001， 27（2）： 218-221.

19 Seegers D， Zwiers A， Strober W， et al. A TaqI polymorphism in the 3’UTR of the IL-12 p40 gene correlates with increased IL-12 secretion［J］. Genes Immun， 2002， 3（7）： 419-423.

20 Bergholdt R， Ghandil P， Johannesen J， et al. Genetic and functional evaluation of an interleukin-12 polymorphism （IDDM18） in families with type 1 diabetes［J］. J Med Genet， 2004， 41（4）：e39.

Correlation between interleukin-12B gene polymorphism and hepatitis C virus: A Metaanalysis

WANG Feng, SUN Chao-hui
General Hospital of Guangzhou Military Command of PLA affiliated to Southern Medical University, Guangzhou 510010, Guangdong Province, China

SUN Chao-hui. Email: zhaohui3@126.com

ObjectiveTo explore the correlation between interleukin 12B (IL-12B) 3'UTR A＞C polymorphism and hepatitis C virus infection.MethodsSystematic searches of electronic databases as PubMed, Cochrane Library, CBM and CNKI were performed, and then case-control study about correlation between interleukin 12B (IL-12B) 3'UTR A＞C polymorphism and hepatitis C virus infection from November 1988 to April 2014 were collected. Meta-analysis was conducted using Stata 12.0 software.ResultsA total of 6 studies were identif i ed, including 1 396 patients and 1 254 controls. The results of meta-analysis showed that the ratio of patients with 3'UTR C polymorphism had the risk of infecting with the HCV to patients without 3'UTR C polymorphism was 1.12∶1 (OR=1.12, 95% CI: 0.90-1.39), and no signif i cant difference was showed in the correlation between IL-12B 3'UTR A＞C polymorphism and HCV infection (Z=1.56, P＞0.05). In the subgroup analysis on ethnicity, the ratio of patients in Asia with 3'UTR C polymorphism had the risk of infecting with the HCV to patients without 3'UTR C polymorphism was 1.04∶1 (OR=1.04, 95% CI: 0.67-1.61), while no signif i cant correlation was found (Z=1.56, P＞0.05).ConclusionMeta-analysis strongly suggests that the correlation between IL-12B 3'UTR A＞C polymorphism and HCV is not signif i cant.

interleukin 12B; hepatitis C virus; gene polymorphism; meta-analysis

R 512.63

A

2095-5227(2014)12-1257-05

10.3969/j.issn.2095-5227.2014.12.022

时间：2014-08-12 08:47

http://www.cnki.net/kcms/detail/11.3275.R.20140812.0847.003.html

据世界卫生组织统计，目前全球约有1.8亿人感染丙型肝炎病毒(hepatitis C virus，HCV)，感染率约为3%，其中1.3亿人为慢性HCV携带者[1]。HCV具有高致病性和广泛流行性的特点，不同地区HCV的流行情况不同，欧美等国属于低流行地区，非洲属于高流行区，我国则属于中度流行地区[2]。感染HCV后呈持续性感染，只有少数患者能够自我清除病毒并康复，而康复后依然存在再次感染的风险[3]。白细胞介素12(interleukin-12，IL-12)是一种重要的免疫调节因子，主要由抗原递呈细胞产生，是连接早期非特异免疫反应和继发性抗原特异性免疫反应的桥梁，在抗病毒免疫反应中发挥重要的作用[4]。近年来，国内外多项研究报道了IL-12基因3'非编码区(3'UTR)A＞C多态性与HCV感染的相关性，其结果不一致。因此，本研究运用循证医学Meta分析方法，全面收集相关病例对照研究，探讨IL-12B基因3'UTR A＞C多态性与HCV感染的关系。

2014-06-11

王凤，女，在读硕士。研究方向：生物信息学。Email: zhifeng121@126.com

孙朝晖，男，主任技师。Email: zhaohui3@126.com