浙南地区女性人群OPRM1基因多态性（rs1799971）与舒芬太尼自控镇痛效果的研究

诸光峰 上官王宁 张高娇

浙南地区女性人群OPRM1基因多态性（rs1799971）与舒芬太尼自控镇痛效果的研究

诸光峰 上官王宁 张高娇

目的 探讨OPRM1基因多态性（rs1799971）对浙南地区女性妇科手术患者舒芬太尼自控镇痛效果的影响。方法收集浙南地区妇科手术患者200例，抽取外周血，采用直接测序法，分析患者OPRM1基因多态性（rs1799971），比较不同基因组患者之间舒芬太尼的累积量，记录镇痛起效时间、持续时间、VAS分值及不良反应。结果 AA型127例，AG型62例，GG型11例，OPRM1基因多态性（rs1799971）基因突变频率为36．50%，各基因组术后2、6、12h舒芬太尼累积量比较，AA组累积量最少，AG组及GG组均较AA组增高，差异有统计学意义（P＜0．05），术后24、48h，GG组较AA组及AG组增高，差异有统计学意义（P＜0．05）。各基因型组间不良反应发生率的差异均无统计学意义（均P＞0．05）。结论 在浙南地区女性人群中，OPRM1基因多态性（rs1799971）对舒芬太尼镇痛效果有显著影响。

OPRM 基因多态性 舒芬太尼 自控镇痛

手术患者由于手术本身及麻醉等因素的需要，术后常需要镇痛。阿片类镇痛药，如舒芬太尼，主要作用于中枢神经系统的μ受体，其镇痛疗效在不同个体间差异甚大，其中一个重要机制为不同基因对阿片类受体，尤其是μ受体的影响存在差异，μ受体是G蛋白偶联受体，由μ阿片受体基因（OPRM）来编码[1]。不同的基因型对吗啡用量及其代谢产物6-葡萄糖醛酸吗啡（M-6-G）有不同的影响[2]。笔者通过研究OPRM1基因多态性（rs1799971）对患者自控镇痛舒芬太尼用量的影响，以阐述不同基因型与舒芬太尼代谢及镇痛效果的关系，现将结果报道如下。

1 资料和方法

1.1 一般资料 收集2010-01—2014-05温州市中西医结合医院妇科收治行妇科手术患者200例（包括子宫全切术、子宫次切术、开腹子宫肌瘤剥除术），均为汉族，浙南地区，年龄20～53（41.71±11.98）岁；ASAⅠ～Ⅱ级。术前行简易智能精神状态检查量表（MMSE）评估，消除认知功能障碍对术后镇痛及疼痛评估的影响，排除患有严重肝脏和肾脏疾病、糖尿病、肝病、抑郁症、焦虑症、长期使用止痛药患者，术前1周服用解热镇痛类或者阿片类药物者，使用与阿片类药物动力学相抵触的联合制剂者。排除因采血失败、不合作、缺乏随访、初期疼痛视觉模拟评分法（VAS）＜2的患者，以及严重恶心、呕吐等原因中途退出研究者。经本院伦理委员会批准，所有患者均充分了解研究方案并签署知情同意书。

1.2 方法 术前禁食12h，禁饮8h。入手术室后，在手术开始60min内输入乳酸林格液以补充禁食所失液体量。麻醉诱导：予咪唑安定0.1mg/kg、芬太尼5μg/kg、维库溴铵0.1mg/kg静脉注射，诱导气管插管，接Drag麻醉机行纯氧机械间歇正压通气（IPPV），维持呼末二氧化碳分压（PETCO2）4～5kPa。术中静脉持续输注效应室靶控浓度为2～3μg/ml的丙泊酚、每隔30min静推维库溴铵2mg，吸入浓度为2.5%～3.2%的七氟烷维持全麻；术中低血压采用麻黄碱5mg，心动过缓采用阿托品0.5mg处理。术中维持PETCO2的稳定，同时监测心率（HR）、收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、平均动脉压（MAP）和中心静脉压（CVP），维持血流动力学稳定。所输入的液体均置入温水箱中保温达35℃。术中维持平均动脉压60～90mmHg。

舒芬太尼PCA泵配方：100ml 0.9%氯化钠溶液中含舒芬太尼200μg，单次量0.04μg/kg，锁定时间10min，设定最大量24μg/h，不设背景输入量。拔管后10min开始镇痛。

1.3 观察指标 镇痛效果评估指标采用VAS，0分为无痛，10分为最痛，并在患者静息状态记录VAS分值。患者入院即记录VAS分值作为基础对照值，并依次记录术后2、6、12、24、48h VAS分值。术前一晚由固定的神经精神科医师对患者进行焦虑抑郁评估，消除心理因素及其他因素对术后镇痛的影响。观察患者不良反应发生情况。

1.4 基因型分型

1.4.1 DNA提取 所有受检者均晨起抽取静脉血3ml，采用DNA试剂盒（日本Takara公司），提取人白细胞基因组DNA。将提取好的DNA置于-80℃冰箱保存备用。

1.4.2 基因型检测 上游引物∶5＇-GGT CAAA CTT GTC CCA CTT AGA TCG C-3＇，下游引物∶5＇-AAT CAC ATA CAT GAC CAG GAA GTT T-3＇。行直接测序方法，读取个体的基因型。

1.5 统计学处理 采用SPSS17.0统计软件，计量资料以表示，不同基因型组间比较采用方差分析，等位基因、基因型频率和遗传平衡定律（Hardy-Weinberg定律）及不良反应发生率的比较采用χ2检验。

2 结果

2.1 各基因分型及其一般资料的比较 OPRM1基因多态性（rs1799971）不同基因型分布如下：AA型127例，AG型62例，GG型11例，基因突变频率为36.50%，结果显示各组年龄、BMI、SBP、DBP、FPG、AST、ALT、肌酐、麻醉持续时间、MMSE评分比较差异均无统计学意义（均P＞0.05），详见表1。

表1 OPRM基因多态性（rs179997）各组患者一般资料的比较

2.2 Hardy-Weinberg平衡分析 OPRM基因多态性（rs1799971）基因型Hardy-Weinberg平衡分析，结果显示趋向于遗传平衡（χ2=0.86，P=0.35）。

2.3 各基因型患者术后舒芬太尼累积量及VAS比较 各基因型患者术后2、6、12h舒芬太尼累积量比较发现，AA组累积量最少，AG组及GG组均较AA组增高，差异有统计学意义（P＜0.05），术后24、48hGG组较AA组及AG组增高，差异有统计学意义（P＜0.05）。其余比较无统计学差异（P＞0.05）。3组间术后2、6、12、24、48hVAS分值比较差异均无统计学意义（均P＞0.05），详见表2、3。

2.4 各基因型组不良反应的比较 所有患者仅9例出现恶心、呕吐、大汗等不良反应，其中AA组4例，AG组2例，GG组3例，各组不良反应的比较差异无统计学意义（P＞0.05）。

3 讨论

本研究中浙南地区女性人群rs1799971基因突变频率为36.50%，其在亚洲人中发生率35%～47%（中国人35%，泰国人44%，马来西亚人45%，印度人47%），本研究结果与国内外研究基本一致[3]。本研究选取浙南地区女性人群作为研究对象，尽量消除性别因素及地域因素的影响，术前进行MMSE评分，尽可能排除认知功能差异对实验结果产生的影响[4]。本研究发现，与AA基因型相比，AG基因型患者舒芬太尼累积量在术后2、6、12h明显增多，而GG基因型舒芬太尼累积量在术后各个时段均明显增多；GG基因型较AG基因型舒芬太尼累积量在术后24h明显增多。各基因型组间不良反应的差异均无统计学意义（均P＞0.05）。

表2 OPRM基因多态性不同基因型组患者术后PCA镇痛期间舒芬太尼累积量（μg）

表3 OPRM基因多态性不同基因型组患者术后PCA镇痛期间VAS的比较（分）

舒芬太尼、芬太尼、吗啡等外源性阿片类镇痛药主要作用于μ受体继而发挥镇痛作用。μ受体基因至少存在43个SNP[4]，在编码区仅数个SNP会引起μ受体氨基酸顺序的改变。例如，如果位点268的丝氨酸被脯氨酸替代后可严重损害μ受体的信号[5]。有研究发现，rs1799971基因突变导致μ受体N末端区的N-糖基化的40位点的天冬酞氨变为天冬氨酸，从而改变受体与配体的亲和力和受体的作用效能，且提示G等位基因纯合子个体OPRM1与内啡肽的亲和力是A等位基因纯合子的3倍[6]，致β-内啡肽与μ阿片受体亲和力增加，影响其代谢率及利用率。这可解释本研究中AG及GG基因型患者在术后48h内需要更多的舒芬太尼才能达到镇痛效果。Chou等[7]发现，在全膝关节整形术后，突变纯合子GG组对术后镇痛吗啡的需要量比AA组、AG组均明显增多，研究结果与本研究结果类似。

本研究对OPRM1基因多态性（rs1799971）在浙南地区女性人群中的分布及其对舒芬太尼累积量的影响做了初步研究。但本实验仍存不足之处：首先，由于实验室条件限制，本研究暂未对血浆舒芬太尼及其代谢产物浓度进行测定，缺少其药代动力学指标；其次，本研究样本量尚小，不足以代表浙江地区人群，有待加大样本量进一步研究；第三，对还有待进一步研究关于增加术后舒芬太尼用药量的确切作用机制。。

[1]Gro sch S,Niederberger E,Lotsch J,et al．A rapid screening method for a single nucleotide polymorphism(SNP)in the human MOR gene[J]Br J Clin Pharmacol,2001,52(6):711-714．

[2]Lotsch J,Zimmermann M,Darimont J,et al．Does the A118G polymorphism at the mu-opioid receptor gene protect against morphine-6-glucuronide toxicity[J]?Anesthesiology,2002,97(4): 814-819．

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Association between OPRM1 gene polymorphisms and effect of sufentanil in postoperative patient-controlled analgesia

Objective To investigate the association between OPRM1 gene polymorphisms and efficacy of sufentanil in postoperative patient-controlled analgesia．Methods Two hundred patients undergoing hystermyoma received postoperative patient-controlled analgesia(PCA)with sufentanil from January 2010 to May 2012．Peripheral blood samples were collected for DNA extraction．OPRM1 gene(rs1799971)polymorphisms were detected．The sufentanil consumption,the release time on analgesia,analgesic duration,VAS,and adverse reaction were documented and compared among different genotype groups． Results Genotyping analysis revealed that the genotype distribution of polymorphisms in OPRM1 gene was AA in 127 cases,AG in 62 cases,and GG in 11 cases．The frequency of OPRM1 mutation was 36．5%．The sufentanil consumption at 2h,6h and 12h after surgery and VAS at 24h and 48h after surgery in GG group were higher than those in AG and AA groups(P＜0．05)． Conclusion The results indicate that OPRM1 gene polymorphism has the significant impact on analgesic efficacy of sufentanil．

μ-opioid receptor gene Polymorphisms SufentanilPostoperative analgesia

2014-07-28）

（本文编辑：严玮雯）

325000 温州医科大学（诸光峰为在职研究生，现在温州市中西医结合医院麻醉科工作）；温州医科大学附属第二医院麻醉科（上官王宁）；温州市中西医结合医院麻醉科（张高娇）

上官王宁，E-mail：sgwning@163.com