浙江省金华地区系统性红斑狼疮患者一级亲属抗核抗体谱检测及意义

王颖芳 杜红卫 吴红华 华丽 马大庆 谢素红 郑昭璟

浙江省金华地区系统性红斑狼疮患者一级亲属抗核抗体谱检测及意义

王颖芳 杜红卫 吴红华 华丽 马大庆 谢素红 郑昭璟

目的 了解金华地区系统性红斑狼疮（SLE）患者一级亲属抗核抗体谱的分布及意义。 方法 收集SLE患者一级亲属162例以及80例健康体检者，分别检测自身抗核抗体谱、相关免疫学指标情况，并进行统计。 结果 162例SLE患者一级亲属中，确诊为SLE 6例，3例为先证者母亲，2例为先证者姐妹，1例为先证者子女,其患病率为3．7%，同时确诊干燥综合征（SS）2例、混合型结缔组织病（MCTD）1例。剔除以上9例患者，其余153例“健康”一级亲属中ANA阳性15例（9．8%），抗Ro52阳性8例（5．2%），抗核小体阳性3例（2．0%），抗SSA阳性6例（3．9%），抗nRNP阳性9例（5．9%），抗心磷脂抗体IgG阳性11例（7．2%），抗心磷脂抗体IgM阳性3例（2．0%），抗ds-DNA阳性12例（7．8%）；IgG升高10例（6．5%），IgM升高12例（7．8%），IgA升高3例（2．0%）；补体C3下降9例（5．9%），补体C4下降6例（3．9%）。与健康对照组相比，SLE患者一级亲属中ANA、抗心磷脂抗体IgG、抗ds-DNA阳性率与健康对照组比较明显升高，差异均有统计学意义（均P＜0．05），其余抗体及免疫球蛋白、补体的差异均无统计学意义（均P＞0．05）。 结论 与正常人群相比，金华地区SLE患者一级亲属的ANA、抗心磷脂抗体IgG及抗ds-DNA阳性率明显升高，为狼疮的高危人群，需加强其筛查及随诊。

系统性红斑狼疮 一级亲属 自身抗体谱

系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）是一种较为常见的可累及多系统的自身免疫性疾病，好发于年轻女性，可侵犯全身各个脏器，严重时危及患者生命，目前尚无根治性治疗措施。现已明确，遗传背景在SLE的发病中起重要作用，SLE具有明显的家族聚集现象，SLE患者一级亲属是SLE的好发人群。出现各种抗核抗体是SLE患者最重要的血清学特征，超过95%的SLE患者血清抗核抗体阳性。Arbuckle等[1]研究发现，SLE患者在发病前数年，体内已存在不同种类的抗核抗体，而在SLE发病前抗核抗体的种类、数量逐渐增多。笔者通过检测金华地区SLE患者一级亲属的抗核抗体谱及其他免疫相关指标，以了解以上指标在金华地区SLE患者一级亲属中的分布情况并评估其意义，为金华地区SLE的预防提供方向，现报道如下。

1 对象和方法

1.1 对象 收集2009-08—2012-12在金华市中心医院风湿免疫科门诊及住院的SLE患者88例，均来自浙江省金华城区及周边郊县。所有患者均符合美国风湿病学会1997年修订的SLE分类标准[2]，所使用的临床及实验室资料以患者初诊时的资料为准，并且选择初诊医院均为本院的患者。一级亲属包括：SLE先证者的父母、兄弟姐妹、子女，排除暴露于环境（长期室外工作紫外线照射）、药物因素（有肼苯达嗪、普鲁卡因酰胺、异烟肼、甲基多巴、奎尼丁、米诺四环素用药史）及吸烟的一级亲属，共收集SLE患者一级亲属162例，其中先证者父母69例，子女55例，同胞兄弟姐妹38例；男59例，女103例；年龄4～68岁，平均（28.2±10.2）岁。选取性别、年龄与一级亲属组匹配的本院健康职工、大学生（来自金华职业技术学院及温州医学院）及职工子女80例作为健康对照组，排除免疫或免疫相关性疾病病史及家族史。本研究所有参与者均已知情同意。

1.2 方法 收集SLE患者一级亲属以及健康对照组的一般资料，即性别、年龄、职业、既往健康状态、既往用药情况、吸烟史及与先证者的关系等，检测抗核抗体谱及其他免疫学指标。抗核抗体谱项目包括：ANA及抗Ro52、抗PM-Scl、抗着丝点抗体、抗PCNA、抗核小体、抗组蛋白抗体、抗AMA-M2、抗核糖体P蛋白、抗SSA、抗SSB、抗Jo-1、抗nRNP、抗Sm、抗Scl-70、抗ds-DNA、抗心磷脂抗体等，同时检测免疫球蛋白G、A、M及补体C3、C4等。比较不同SLE患者一级亲属（父母、同胞、子女）间抗核抗体谱等指标的分布，以及SLE患者一级亲属组与健康对照组间的抗核抗体谱等分布情况。

1.3 主要实验试剂及仪器 抗核抗体谱检测使用欧蒙试剂盒、间接免疫荧光法；免疫球蛋白、补体检测使用德灵仪器、免疫散射比浊法。所有入选的一级亲属及健康对照组的实验室检查项目均由本院检验科同1位副主任医师完成。

1.4 统计学处理 采用SPSS16.0统计软件，计量资料以表示，SLE患者一级亲属组与健康对照组抗核抗体谱等阳性率的比较采用χ2检验，当频数＜5时采用四格表资料的Fisher确切概率法。

2 结果

2.1 SLE患者一级亲属中结缔组织病患病情况 162例SLE患者一级亲属中，确诊为SLE 6例，其中3例为先证者母亲，2例为先证者姐妹，1例为先证者女儿，金华地区SLE患者一级亲属SLE患病率为3.7%。除SLE外，确诊为干燥综合征（SS）2例（均为先证者母亲），确诊为混合型结缔组织病（MCTD）1例（先证者姐姐）。

2.2 SLE患者一级亲属免疫学指标检测结果 剔除一级亲属中已确诊的6例SLE、2例SS以及1例MCTD患者，153例SLE患者“健康”一级亲属的风湿相关抗体检测结果显示，ANA阳性15例（9.8%），其中ANA滴度1∶100 9例，1∶160 3例，1∶320 3例，其核型颗粒型6例，均质型4例，斑点型3例，核膜型2例。其他抗体阳性情况：抗Ro52阳性8例（5.2%），抗核小体阳性3例（2.0%），抗SSA阳性6例（3.9%），抗nRNP阳性9例（5.9%），抗心磷脂抗体IgG阳性11例（7.2%），抗心磷脂抗体IgM阳性3例（2.0%），抗ds-DNA阳性12例（7.8%）。免疫球蛋白及补体检测结果显示，IgG升高10例（6.5%），IgM升高12例（7.8%），IgA升高3例（2.0%）；补体C3下降9例（5.9%），补体C4下降6例（3.9%）。

2.3 SLE患者一级亲属组与健康对照组免疫学检测结果的比较 与健康对照组相比，SLE患者“健康”一级亲属中ANA、抗核小体、抗SSA、抗nRNP、抗心磷脂抗体IgG、抗心磷脂抗体IgM、抗ds-DNA的阳性率及高免疫球蛋白、低补体血症的发生率较高。其中ANA、抗心磷脂抗体IgG、抗ds-DNA与健康对照组比较差异均有统计学意义，而其他抗体及免疫球蛋白、补体与健康对照组比较差异均无统计学意义，详见表1。

表1 SLE患者一级亲属组与健康对照组免疫学指标检测结果比较[例（%）]

3 讨论

SLE好发于青年女性，尤其是20～40岁的育龄期妇女，男女之比为1∶3～1∶8，部分高达1∶10，幼儿及老年人亦可患病，但性别差异不明显。目前世界SLE患病率为17/ 10万～48/10万[3]。SLE作为一种抗原诱导下的T细胞依赖性自身免疫疾病，以多种自身抗体的产生亢进为特征。虽然具体的病因及发病机制尚不明确，但同卵双生子和患者亲属的高共患率（29%～57%，10%～12%），以及多种基因与SLE的相关性均说明遗传易感性是发病的主要因素[4-5]，SLE的家族聚集现象已得到公认。目前，针对SLE患者亲属这一高危人群的免疫指标分布情况的研究较少，国外有学者进行初步SLE家系调查，结果显示各种自身抗体如抗核抗体、抗心磷脂抗体等阳性率升高[6]，血沉、免疫球蛋白升高，低补体血症也不少见。一些更细致深入的基础研究显示，“健康”的SLE患者一级亲属与患者一样存在雌激素羟基化作用的增强，雌激素样物质产生增多，雌激素/雄激素比例升高，从而促进体液免疫的亢进[7]。

本研究收集了金华城区及周边郊县88例SLE患者的一级亲属共162例，在检测其一级亲属自身抗体谱及其他免疫相关指标分布情况的过程中，确诊为SLE的一级亲属6例。有文献报道SLE最常见的共患关系是手足（45%），其次是父母与子女（31%），最后是二、三级亲属（24%）[8]。本研究确诊的6例SLE中包括3例先证者母亲，2例先证者姐妹，1例先证者女儿，已根据其病情轻重选择激素和（或）免疫抑制剂治疗。本研究发现，金华地区SLE先证者一级亲属的SLE患病率为3.7%，该数据与既往相关报道相比略高。有报道显示，SLE患者的所有一级亲属中约3%患病[9]，说明金华地区SLE先证者一级亲属的SLE患病率可能较一般水平略高。同时，在162例一级亲属中确诊SS 2例、MCTD 1例，提示SLE患者一级亲属中其他结缔组织病的发生率可能高于正常人，相关结论还需更科学、更大样本的调查加以证实。

剔除一级亲属中已确诊的6例SLE、2例SS以及1例MCTD患者，金华地区153例“健康”的SLE一级亲属免疫学检测结果中，ANA阳性率较高（间接免疫荧光法，1∶100为阳性），共15例（9.8%），其中50岁以上6例（男2例，女4例）；ANA滴度1∶100 9例，1∶160 3例，1∶320 3例，其核型颗粒型6例，均质型4例，斑点型3例，核膜型2例。ANA是SLE中最常见的自身抗体，据国外资料统计，SLE患者中ANA的阳性率为90%～96%，而SLE血亲的阳性率为10%～12%[10]，其中一级亲属的ANA阳性率未见报道。因正常老年人的ANA阳性率本身较高（低滴度），故青年及儿童阳性者更值得关注。与健康对照组相比，金华地区SLE先证者“健康”一级亲属的ANA、抗ds-DNA及抗心磷脂抗体IgG阳性率明显升高，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。抗ds-DNA对SLE的诊断有特异性，其他疾病少见。在SLE患者中的阳性率为30%～70%，并与狼疮性肾炎及疾病活动关系密切[11-12]。只有Arbuckle等[1]报道过在诊断SLE前发现抗ds-DNA阳性，这对预示SLE的发生意义重大。本研究发现，12例抗ds-DNA阳性的一级亲属中，有2例ANA、抗Ro52、抗SSA同时阳性，但无其他异常，无法确诊任何结缔组织病。正常人中抗ds-DNA是阴性的，因此，其发生SLE的概率较其他亲属升高，需要严密随访。抗心磷脂抗体是一种以血小板和内皮细胞膜上带负电荷的心磷脂作为靶抗原的自身抗体，其免疫学分型有IgG、IgM和IgA 3类，其中高水平的IgG型对原发性抗磷脂综合征（APS）的诊断最具有特异性。有报道认为，SLE患者出现抗心磷脂抗体阳性更易发生高血压、神经系统症状和肾炎[13]。抗心磷脂抗体在SLE中的阳性率为10%～40%[14]，主要是IgG和IgM型，血栓形成、习惯性流产和血小板减少主要与IgG型的抗体相关，其滴度越高，越易发生并发症。目前，SLE患者一级亲属的抗心磷脂抗体阳性率笔者在文献检索中未发现相关报道，本研究发现在153例SLE患者一级亲属中，抗心磷脂抗体IgG阳性11例、抗心磷脂抗体IgM阳性3例，其阳性率分别为7.2%、2.0%，其中抗心磷脂抗体IgG阳性率与健康对照组相比明显升高，差异有统计学意义（P＜0.05），提示金华地区SLE患者一级亲属中抗心磷脂抗体IgG阳性率较健康人群高，需要加强对SLE患者一级亲属抗心磷脂抗体筛查。

另外，SLE先证者“健康”一级亲属中抗核小体、抗SSA、抗nRNP、抗心磷脂抗体IgG阳性及高免疫球蛋白、低补体血症的发生率虽然较高，与健康对照组比较无统计学差异（P＞0.05）。

综上所述，与正常人群相比，金华地区SLE患者一级亲属的ANA、抗心磷脂抗体IgG及抗ds-DNA阳性率高。金华地区SLE患者一级亲属的SLE患病率（3.7%）可能较其他地区略高，与普通人群相比为高危人群，对该类人群应定期进行自身抗体谱及其他相关风湿抗体、免疫指标的筛查，加强随诊，以早期发现疾病、尽早干预。

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Antinuclear antibodies levels in first-degree relatives of patients with systemic lupus erythematosus

Objective To investigate the distribution of antinuclear antibodies level in first-degree relatives(FDR)of patients with systemic lupus erythematosus(SLE)．Methods Serum levels of antinuclear antibody and other autoantibodies were measured in 162 first-degree relatives of SLE patients and 80 healthy subjects in Jinhua region． Results Prevalence rate of SLE in first-degree relatives was 3．7%(6/162)．Among remaining 152 non-SLE first-degree relatives,antinuclear antibody (ANA),anti-Ro52 antibody,anti-nucleosome,anti-Ro/SSA antibody,anti-nRNP antibody,anticardiolipin antibody(ACA)-IgG, ACA-IgM and anti-ds-DNA antibody were positive in 15 cases(9．8%),8 cases(5．2%),3 cases(2．0%),6 cases(3．9%),9 cases(5．9%),11 cases(7．2%),3 cases(2．0%),12 cases(7．8%),respectively．Higher positive rate of ANA,(ACA)-IgG and anti-ds-DNA antibody were found in FDR of SLE patients than healthy control group(P＜0．05)．Conclusion The first-degree relatives of SLE patients have higher positive rate of ANA,(ACA)-IgG and anti-ds-DNA antibody,indicating high risk of SLE for FDRs．

Systemic lupus erythematosus First-degree Relatives Antinuclear antibodies

2014-08-26）

（本文编辑：严玮雯）

（本文由浙江省医学会风湿病学分会推荐）

金华市科技研究计划项目（2009-3-020）

321000 金华市中心医院风湿免疫科（王颖芳、杜红卫、吴红华、华丽），保健科（谢素红），检验科（郑昭璟）；金华市文荣医院肾脏风湿科（马大庆）

王颖芳，E-mail：1427198357@qq.com