山楂切片工艺研究

石典花， 戴衍朋， 孙立立*，曹玉华， 王建刚

（1.山东省中医药研究院， 山东 济南 250014； 2.山东博康中药饮片有限公司， 山东 青州 2625000）

山楂切片工艺研究

石典花1， 戴衍朋1， 孙立立1*，曹玉华2， 王建刚2

（1.山东省中医药研究院， 山东 济南 250014； 2.山东博康中药饮片有限公司， 山东 青州 2625000）

目的 优选山楂最佳切片工艺。方法 以内在质量 （有机酸量、金丝桃苷量、水浸出物） 和传统外观质量为指标， 采用 L9（34） 正交试验， 对切片厚度、 干燥温度、 干燥时间三因素进行考察。 结果 优选的最佳切制工艺为：取鲜山楂， 切成厚度为 4mm的片， 置 60 ℃烘箱， 干燥 4 h， 取出， 晾凉。 结论 优选得到的山楂切片工艺可用于规范山楂的切片生产。

山楂；切片；正交试验；有机酸；金丝桃苷；水浸出物

山 楂 为 蔷 薇 科 植 物 山 里 红 Crataegus pinnatifida Bge. var.major N.E.Br.或山楂 Crataegus pinnatifida Bge.的干燥成熟果实。山楂具有消食健胃，行气散瘀，化浊降脂的功效，用于肉食积滞，胃脘胀满，泻痢腹痛，瘀血经闭，产后瘀阻， 心腹刺痛， 胸痹心痛， 疝气疼痛， 高脂血症［1］。山楂是药食两用品［2-3］， 市场需求量较大， 山东地区为山楂主要产区，通过实地调查发现，山楂采收后除部分用于食用外，大部分由当地农户手工切片，这个过程存在切片厚度参差不齐，晾晒程度受天气影响等问题，从而导致山楂片颜色变黄，甚至发霉，因此种植户为追求山楂片色泽好看，在山楂切制后用硫磺进行熏制，所以目前流通到市场上的山楂片多为硫磺熏制品，硫磺熏制品中残留的硫化物对人们的健康造成损害。

《中国药典》 2010 年版一部收载山楂的采收加工方法仅为 “秋季果实成熟时采收， 切片， 干燥”， 无具体工艺数据参数。因此本研究采用正交试验法，以内在质量 （有机酸量、金丝桃苷量、水浸出物）和传统外观质量为指标，对影响山楂片质量的切片厚度，干燥温度，干燥时间进行研究，优选出山楂最佳切片工艺，研究结果可用于规范山楂片的生产。

1 仪器与试药

1.1 样品 山楂 （山里红） 果实， 2012 年 10 月采于山东省青州市王坟镇陈家泉村，经我院中药资源室林慧彬研究员鉴定为蔷薇科植 物 山 里红 Crataegus pinnatifida Bge.var. major N.E.Br.的成熟果实。

1.2 仪器 Waters2695 型高效液相色谱仪， 2966 二极管阵列检 测 器 （ 美 国 Waters公 司）。 瑞 士 METTLER XS205 DU10-5电子天平。 B3200S-T型超声波清洗器 （上海必能信超声有限公司）， MILLI-Q超纯水纯化系统。

1.3 试药 金丝桃苷对照品 （自制， 归一化法测定纯度为99.0%）； 乙腈为色谱纯 （迪马公司）， 其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 山楂切片工艺的正交试验设计 影响山楂切片工艺的主要因素有切片厚度、干燥温度和干燥时间，因此，本实验选择以上三个因素，每个因素设立三个水平 （因素水平表见表1）， 在预试验基础上， 以传统外观性状、 有机酸含量、金丝桃苷含量、水浸出物的含量作为评价指标，以综合评分的方法， 进行三因素、 三水平的 L9（34） 正交试验，对试验结果进行直观分析和方差分析，优选出规范的山楂切片工艺。

表1 因素水平

2.2 山楂片质量评价指标的选择依据和评定标准 试验中采用以传统外观性状和内在质量 （有机酸含量、金丝桃苷含量、水浸出物）作为评价指标，为全面客观反映各个因素之间的关系及对山楂片质量的影响，采用综合评分法。

2.2.1 传统外观性状评分依据和标准 传统外观性状评价是我国中医药历史上沿用和发展起来的经验总结，是传统评价饮片质量优劣的标准，也是目前单一化学成分和化学部位不能替代和说明的评价标准，因此选其作为正交试验的评价指标之一。山楂片外观性状评价从片型和色泽两方面进行评价，其中以片型完整、不卷曲，色泽鲜白，不泛黄者为佳。

2.2.2 内在质量评价指标的选择 山楂果实内主要含有有机酸和黄酮类化合物［4-7］。

2.2.2.1 有机酸 有机酸为山楂健胃消食作用的主要有效成分，主要包括枸橼酸、苹果酸、亚麻酸、棕榈酸、丁烯二酸和亚油酸等［8］。 因此选择有机酸作为指标之一， 参考照2010 年版 《中国药典》 一部山楂项下有机酸测定方法进行［1］ 。

2.2.2.2 金丝桃苷 金丝桃苷是山楂中主要黄酮类成分［9］， 具有抗心肌缺血损伤、 抗心肌脂质过氧化、 降血脂等作用， 常被用作山楂质量控制 指标性成分［10-11］， 因此选择金丝桃苷作为指标之一。 采用 HPLC法测定山楂片中金丝桃苷的量［12］。

色谱条 件 Phenomenon HyperClone C18柱 （ 4.6 mm × 250 mm， 5 μm）； 流动相 A为乙腈， B相为 0.3%磷酸水，梯度洗脱 （0 ～60min， 10% ～27%A； 60 ～80 min， 27% ～50%A）； 体积流量 1 mL/min； 波长 355 nm； 柱温室温；进样量 10 μL。 理论塔板数按金丝桃苷峰计算不低于3 000。

对照品溶液的制备 取金丝桃苷对照品适量，精密称定， 加甲醇制成 每 毫升含金 丝 桃 苷 0.050 mg的 溶 液，即得。

供试品溶液的制备 取山楂粉末 （过四号筛） 2.0 g，精密称定， 置具塞三角瓶中， 精密加入甲醇 50 mL， 称定质量， 冷浸 2 h， 超声处理 1 h， 放冷， 再称定质量， 用甲醇补足减失的质量， 摇匀， 滤过， 取续滤液 25 mL， 蒸干，残渣加甲醇使溶解， 转移至 5mL量瓶中， 加甲醇稀释至刻度， 摇匀， 过 0.45 μm微孔滤膜， 即得。

测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10 μL， 注入液相色谱仪， 测定， 即得。

水浸出物 山楂片临床用药多以水煎和水泡代茶饮为主， 所以选择山楂片的水浸出物作为指标之一。 照 2010 年版 《中国药典》 一部热浸法 （附录Ⅹ A） 规定项下方法进行测定。

2.3 正交设计法优选山楂最佳切片工艺

2.3.1 样品的制备 取山楂 9 份， 大小分档， 每份均匀取大、 中、 小山楂各 10 枚， 按 L9（34） 正交表安排的 9 种工艺，分别进行手工切制和干燥。对得到的山楂片进行传统外观性状质量评分， 并对内在质量评价指标 （有机酸、 金丝桃苷及水浸出物）进行测定。

2.3.2 外观性状打分及内在质量指标的测定

2.3.2.1 传统质量 （外观性状） 评分 根据山楂片的片型和色泽进行打分， 片型平整， 厚度适中得分为 100 分， 片型卷曲， 厚度偏薄得分为 80 分， 片型平整， 厚度偏厚得分为90 分； 山楂片色泽鲜白为 100 分， 色泽稍差者按实际情况给予相应得分。 不同条件下制备的1 ～9号样品的得分见表2。

2.3.2.2 内在质量评价指标有机酸量、 金丝桃苷量、 水浸出物测定 照上述方法分别进行测定， 结果见表2。

表2 外观性状评分及有机酸、 金丝桃苷、 水浸出物测定结果

2.4 结果分析

2.4.1 综合质量评分 权衡传统外观性状、 有机酸量、 金丝桃苷量和水浸出物对山楂片质量的影响，确定外观性状的加权系数定为 0.4， 有机酸量、 金丝桃苷量和水浸出物加权系数均定为 0.2， 采用综合评分法， 综合评分按以下公式计算：

综合质量评分 =外观性状得分 （片型得分 ×0.5+色泽得分 ×0.5） ×0.4+有机酸量得分 ×0.2+金丝桃苷量得分 ×0.2+水浸出物得分 ×0.2

综合评分结果见表 3。 方差分析见表 4。

表 3 L9（34） 正交试验结果及直观分析

表4 方差分析

表5 山楂切片工艺验证试验结果

2.4.2 直观与方差分析

2.4.2.1 直观分析 由 R可以看出， 对 A、 B、 C三因素有 RA＞RB＞RC， 因此， A因素对山楂片质量的影响最大，B因素次之 ，C因 素 影 响 较 小， 对A因 素 有＞＞，对B因素有＞＞， 对 C因素有＞＞。 因此最佳组 合 为 A2B3C1。

2.4.2.2 方差分析 A因素和 B因素均为影响山楂切片工艺的显著性因素，C因素无显著性影响。

2.4.2.3 山楂最佳切片工艺技术参数的确定 根据上述试验结果 ， 山楂最 佳 切片 的 工 艺 参 数 应 为 A2B3C1， 即 取 山 楂切成 厚 度 为 4 mm的 片， 置 60 ℃ 烘 箱 ， 干 燥 4 h， 取出，晾凉。

2.5 工艺验证 为验证上述优选最佳山楂切片工艺的科学性、稳定性和可重复性，进行了3批验证试验，进一步考察正交试验结果的准确性和可靠性。

取山楂90 枚， 大小分档分为3 份， 每份30 枚， 分别切成厚度 为 4 mm片 后， 置 60 ℃ 烘 箱 ， 干 燥 4 h， 取 出 ， 晾凉。观察山楂片的外观性状，并对有机酸、金丝桃苷和水浸出物进行测定， 结果见表5。

3批验证试验结果表明，山楂片片型色泽俱佳，有机酸量在 9.30% ～9.36%之 间， 金 丝 桃 苷 量 在0.221 8 ～0.223 7 mg/g之间， 水浸出物在 69.73% ～69.85%之间， 说明正交试验确定的工艺合理，可得到优质的山楂饮片。

3 小结与讨论

本研究采用 L9（34） 正交试验法对山楂的切片工艺进行优选，以传统外观性状要求和内在质量要求为指标，采用综合质量评分法，把山楂饮片的传统质量与内部质量两个方面结合在一起，可更为客观地反映各个因素水平对山楂片质量的影响。

通过实验发现不同切片厚度、干燥温度和干燥时间对山楂片的外在质量和内在质量均有不同程度的影响，其中切片厚度和干燥温度对山楂片质量有显著性影响，优选得到山楂最佳切片工艺为：山楂切成厚度为4 mm的片，置60 ℃烘箱， 干燥 4 h， 取出， 晾凉。 3 批验证试验结果表明，确定的工艺条件操作简便，可用于规范山楂的切片生产，且生产出的山楂片片型色泽俱佳，可有效保证山楂临床用药和食用安全。

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R283

： B

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2013-04-22

国家中医药管理局全国名老中医药专家冯宝麟传承工作室 （2010）； “国家重大新药创制” “中药质量标准研究和信息化体系建设平台—中药饮片质量标准研究平台” （2009ZX09308-004）； 山东省中医药科技发展计划项目 （2011-170； 2013-132）

石典花 （1981—）， 女， 助理研究员， 主要从事中药炮制研究。

*通信作者： 孙立立 （1953—）， 女， 研究员， 主要从事中药炮制研究。 Tel： （0531） 82949829