以整合素αvβ3为靶点的肿瘤靶向制剂

杨旺桂，刘芳，边疆

重庆佳辰生物工程有限公司 生物研究中心，重庆 400084

肿瘤的发病率呈上升趋势，治疗方法也在不断发展，寻找肿瘤的生物标志物进行靶向治疗已成为主流方向。血管是肿瘤获取营养的来源，抑制肿瘤血管生成可抑制肿瘤的生长和转移。因此，肿瘤血管的生物标志物也是肿瘤治疗不可抗拒的选择。2004年2月，以血管内皮生长因子（VEGF）为靶标的抑制血管生成的抗肿瘤药贝伐单抗被美国食品药品监督管理局（FDA）批准上市，成为重磅炸弹产品，这也为其他以肿瘤血管生物标志物为靶标的药物打开了成功的大门。

整合素是一类异二聚体跨膜细胞表面受体，由一个α亚基和一个β亚基通过非共价键结合而成，是细胞与细胞、细胞与细胞外基质（ECM）之间相互作用的媒介。迄今已报道的整合素有24个，包括18个α亚基和8 个β亚基[1]。整合素与ECM 蛋白结合，促进细胞的活动和侵袭[2]，在血管生成和肿瘤转移中发挥重要作用[3]。在特定环境中，整合素能否与ECM的配体结合，决定着细胞的存活或凋亡[2]。整合素与其配体结合后，启动细胞内的信号传导途径，诱导细胞迁移、存活、侵袭等活动[3-4]；整合素与配体的结合受阻，则会引起细胞凋亡[5]。

整合素αvβ3 是目前研究最广泛的整合素家族成员，在休眠的内皮细胞和其他正常组织中低表达甚至不表达[6]，但在多种肿瘤细胞[2]及肿瘤新生血管内皮细胞中[7-9]的表达量却会急剧升高，因此成为理想的抑制肿瘤及肿瘤血管生成的靶点。临床研究表明，整合素αvβ3 的表达水平与肿瘤分级呈正相关，是肿瘤恶性程度的标志[8,10]。通过抑制αvβ3的功能，可诱导新生血管内皮细胞凋亡，从而使肿瘤无法获得生长必需的营养，促使肿瘤细胞凋亡，达到抗肿瘤的目的，而这个过程并不会对正常组织的血管造成不良影响[7-8]。

整合素αvβ3 通过识别RGD（Arg-Gly-Asp）序列，与其细胞外配体结合实现细胞信号传导。RGD序列普遍存在于ECM 的玻璃粘连蛋白、纤维结合蛋白、骨桥蛋白、人纤维蛋白原等黏附蛋白中，在整合素识别其配体过程中起重要作用[11]。由于肿瘤细胞和肿瘤血管内皮细胞都能高表达整合素αvβ3，因此RGD 序列不仅能结合到肿瘤新生血管内皮细胞，还能与肿瘤细胞结合[12]。正因为这一优势，使RGD 得到众多研究者的关注，并设计和制备RGD 肽及其衍生物制剂进行肿瘤的诊断和治疗。

1 RGD诊断试剂

用放射性核素标记RGD 肽及其衍生物制备示踪剂，进行整合素αvβ3 表达水平的显影，达到肿瘤诊断的目的，已得到广泛关注和研究。Chen 等[13-14]发 现，［18F］FAl-NOTA-PRGD2、［68Ga］Ga-NOTAPRGD2和［18F］FPPRGD2 都有良好的整合素αvβ3 靶向性，且在显影和药代动力学方面没有显著差别，但［18F］FAl-NOTA-PRGD2和［68Ga］Ga-NOTA-PRGD2比［18F］FPPRGD2 的制备更加简单，表现出更好的应用前景。多中心临床研究表明，作为整合素受体显影的临床示踪剂，99mTc-3PRGD2 可敏感地用于肺癌的诊断[15]。［18F］AH-111585具有良好的生物分布，可无创检测肿瘤血管，在Lewis肺癌的小鼠模型中能如实反映抗肿瘤治疗的效果[16]，在7名患者中成功地检测出了原发和转移的乳腺癌[17]。另外，有多个放射性核素标记的RGD 肽及其衍生物正进行临床试验，GE Healthcare 开发的［18F］AH-111585 已在2012 年9月完成Ⅱ期临床试验。

2 RGD-脂质体抗肿瘤制剂

脂质体作为药物载体具有以下优点：既可包载疏水性药物，也能包载亲水性药物；具有良好的药代动力学，可保护包载的药物不被降解；表面用靶向抗体或配体修饰后具有特异靶向性[18]。RGD-脂质体可靶向高表达整合素αvβ3 的肿瘤细胞和肿瘤血管内皮细胞，在肿瘤治疗中作为抗肿瘤药物的载体，可提高疗效并降低副作用，具有广阔的应用前景[19]。

目前，以RGD-脂质体进行的抗肿瘤研究，主要将其作为放射性核素、细胞毒药物、siRNA 等的载体，把药物汇集在肿瘤组织，并通过内吞作用，使药物进入肿瘤血管内皮细胞和肿瘤细胞，提高它们的抗肿瘤作用。人脐静脉内皮细胞结合和内吞RGD-10B 脂质体的活性比RAD-10B 脂质体和PEG-10B 脂质体都高，且细胞活力下降程度较后两者更显著[18]。在人肺癌细胞A549和人脐静脉内皮细胞的药物吸收研究中，RGD-紫杉醇脂质体和紫杉醇脂质体的细胞吸收比泰素（Taxol）高3倍以上，RGD-紫杉醇脂质体比紫杉醇脂质体高约40%[20]。在人肺癌A549 裸鼠模型中，RGD-紫杉醇脂质体处理组的肿瘤微血管密度显著低于紫杉醇脂质体处理组[20]。RGD-阿霉素脂质体通过受体介导的内吞作用，可有效地把阿霉素载入肿瘤细胞，从而使肿瘤细胞中具有较高的阿霉素浓度[21-22]，对黑色素瘤细胞B16和A375的IC50分别仅为阿霉素脂质体的52%和68%[21]。B16 小鼠模型中，RGD-阿霉素脂质体比阿霉素脂质体更有效地抑制了肿瘤生长，两者延长小鼠的存活时间分别是生理盐水处理组小鼠寿命的25.2%和12.0%[21]。同样，在C26 直肠癌小鼠模型中，RGD-阿霉素脂质体的疗效比阿霉素和阿霉素脂质体更好，RGD-阿霉素脂质体延长小鼠的存活时间为18 d，阿霉素脂质体为15 d[23]。因此，以RGD-脂质体作为药物载体进行抗肿瘤治疗，使肿瘤细胞和肿瘤血管内皮细胞对抗肿瘤药物的吸收增多，提高了抗肿瘤药物的疗效。

在RGD-脂质体表面修饰细胞穿膜肽，可提高脂质体的细胞吸收率；而修饰另一个靶向配体制备成双靶向脂质体，则可提高靶向特异性。八聚精氨酸（R8）作为细胞穿膜肽修饰于RGD-PEG-siRNA 脂质体表面后，人脐静脉内皮细胞的吸收率和转染效率较RGD-PEG-siRNA 脂质体和PEG-siRNA 脂质体均高得多，而这3 种脂质体在不表达整合素αvβ3的皮肤内皮细胞中，其细胞吸收和基因表达却没有显著差异[24]。RGD/anginex（肿瘤血管生成抑制肽）双靶向脂质体在体外表现出协同靶向效应；在B16F10 黑色素瘤小鼠模型中，双靶向脂质体的特异性较anginex-脂质体和RGD-脂质体高[25]。

另外，肿瘤细胞可通过表达P-糖蛋白而拥有耐药性[26-27]，给肿瘤治疗带来不利，采用交叉给药可提高疗效。在阿霉素抗性的人乳腺癌MCF7/A 小鼠模型中，用RGD-P-糖蛋白siRNA 脂质体与RGD-阿霉素脂质体交替给药，肿瘤生长被显著抑制[19]。

3 RGD-胶束抗肿瘤制剂

聚合物胶束具备独特的核-壳结构，其疏水核提供天然的疏水性药物载体环境，亲水壳维持胶束在水溶液中的稳定性，是难溶性药物理想的给药备选方案。

聚合物胶束作为药物载体具有容易制备、粒径小（10～100 nm）、稳定性好、载量大、释放可控的优势[28]。制备胶束的聚合物有聚乙二醇-聚乳酸[28-31]、聚乙二醇-聚赖氨酸[32]、聚乙二醇-聚己内酯[33]、聚乙二醇-硬脂酸-壳聚糖[34]等两亲性化合物。聚合物胶束本身没有主动靶向功能，但可在循环系统中长时间保持稳定，通过EPR 效应，即被动靶向作用，作为抗肿瘤药物的给药系统[35]。在大多数临床条件下，被动靶向给药副作用较大，因此，通过特异性配体、抗体进行主动靶向给药，是胶束给药系统的发展趋势。

把两亲性聚合物的亲水端与RGD 肽或其衍生物偶联，制备的RGD-聚合物胶束可靶向肿瘤细胞的整合素αvβ3和αvβ5[36-37]。实验发现，黑色素瘤细胞B16和人脐静脉内皮细胞对RGD-聚合物胶束的吸收率分别比非靶向聚合物胶束高3.3和2.7 倍[28]，RGD-阿霉素聚合物胶束对MDA-435/LCC6WT细胞和MDA-435/LCC6MDR细胞的毒性分别是非靶向阿霉素聚合物胶束的10 倍和78 倍[33]；在MDA-435/LCC6WT小鼠模型中，注射RGD-阿霉素聚合物胶束的处理组，其存活时间显著高于非靶向阿霉素聚合物胶束组、阿霉素组和生理盐水组[33]。同样剂量的阿霉素，RGD-阿霉素聚合物胶束比阿霉素注射液更有效地抑制肿瘤生长，且没有明显的副作用[33]。RGD-阿霉素聚合物胶束在血浆中能维持较高的阿霉素浓度，在心脏、肝脏、脾脏、肺和肾脏中的阿霉素则显著低于阿霉素注射液；在肿瘤组织中，RGD-阿霉素聚合物胶束的阿霉素浓度显著高于非靶向阿霉素聚合物胶束[29]。肿瘤切片免疫染色发现RGD-阿霉素-考布他汀A4 聚合物胶束对CD31 阳性的小鼠肿瘤血管抑制率为84.6%，显著抑制了肿瘤细胞的繁殖，具有优越的抗肿瘤疗效[29]。B16F10 黑色素瘤小鼠模型注射RGD-阿霉素-考布他汀A4 聚合物胶束的肿瘤抑制率为90.3%，注射非靶向阿霉素-考布他汀A4 聚合物胶束的肿瘤抑制率则为66.7%，前者显著优于后者；延长小鼠存活时间上，靶向胶束也较非靶向胶束长，分别为生理盐水处理组小鼠寿命的82.2%和36.8%[29]。RGD-紫杉醇聚合物胶束对恶性胶质瘤U87MG 细胞的抑制能力较紫杉醇高2.5 倍，与非靶向紫杉醇聚合物胶束、紫杉醇处理组相比，显著延长了荷瘤裸鼠的生存时间[30]。

此外，RGD-聚合物胶束包载超顺磁纳米粒，可作为核成像探针对肿瘤进行灵敏地检测，是肿瘤诊断和肿瘤治疗监控的有力工具[31,38]。

4 RGD-纳米粒抗肿瘤制剂

纳米粒作为药物载体的主要作用是将药物输送到特定的细胞群，并释放药物发挥疗效，而在其他部位则尽量减少药物的滞留，使系统的毒性最小化。纳米粒包括聚合物纳米粒[39-44]、脂质纳米粒[45-46]、顺磁纳米粒[47-48]、生物大分子纳米粒[49]等，通过适当的方式在其表面修饰RGD 肽或其衍生物，可实现纳米粒的肿瘤靶向作用。

RGD-纳米粒与高表达整合素αvβ3 的血管内皮细胞和肿瘤细胞有很强的亲和性，载药后提高了药物对靶细胞的毒性。以聚氧乙烯-甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷包裹疏水性纳米晶制备的纳米粒，在100%胎牛血清中保持稳定，与生物大分子发生的非特异性结合仅限于较低水平，表面修饰cRGD（cyclo RGD）后，对高表达整合素αvβ3 的U87MG 胶质瘤细胞有很强的亲和性，而对低表达整合素αvβ3的MCF-7 乳腺癌细胞仅发生微量的结合[43]。以c（RGDfK）和转铁蛋白修饰的多分枝两亲性共聚物——聚胺酯丙交酯/L-磷脂酰乙醇胺共聚物嵌段制备的双靶向紫杉醇纳米粒，对人脐静脉内皮细胞的毒性比紫杉醇提高了10 倍，对高表达转铁蛋白受体的人宫颈癌细胞的毒性提高了2 倍[42]。说明靶向载药纳米粒通过受体介导的内吞作用使药物有效进入血管内皮细胞和靶向肿瘤细胞。

RGD-纳米粒的肿瘤组织靶向性，提高了药物的抗肿瘤疗效，延长了荷瘤小鼠的生存时间。c（RGDfK）-脂质纳米粒在体外能被高表达整合素αvβ3 的HEK293（β3）细胞特异性结合并内吞，静脉注射HEK293（β3）移植瘤裸鼠模型后，cRGD-脂质纳米粒可累积在肿瘤部位[46]。c（RGDyK）-PEG-聚环丙烷碳酸酯紫杉醇纳米粒比PEG-聚环丙烷碳酸酯紫杉醇纳米粒、泰素显示出更强的穿透性，并积聚在肿瘤组织，显示较强的肿瘤生长抑制作用[40]。c（RGDyK）-聚环丙烷碳酸酯纳米粒载药系统可以能量依赖的方式将紫杉醇转运到人U87MG 恶性胶质瘤细胞中，使细胞微管明显变得更加稳定，抑制了肿瘤细胞的繁殖，延长U87MG 小鼠模型的存活时间为生理盐水处理组小鼠寿命的52.4%，高于非靶向紫杉醇聚环丙烷碳酸酯纳米粒的28.6%[41]。生长在大脑的恶性胶质瘤进行药物治疗时，药物须通过血脑屏障和血管-肿瘤屏障，导致肿瘤对药物的吸收非常有限，严重影响了疗效[50-52]；当把肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）基因组装到RGD-纳米粒（RGD-PEG-PEI/pORF-hTRAIL）中，与靶向脑部血管的紫杉醇胶束（CDX-PEG-PLA-PTX）联合给药时，可显著延长颅内恶性胶质瘤（U87）裸鼠模型的生存时间[44]。另外，RGD-纳米粒在肿瘤部位的浓度高于肝脏、脾和肺，RGD-白介素2 基因纳米粒处理的神经母细胞瘤（Neuro-2A）小鼠模型，其肿瘤体积比对照小了75%，且该处理组有三分之一的小鼠长期生存[45]。

RGD-纳米粒除了可作为药物载体进行抗肿瘤治疗外，也可作为探针进行肿瘤诊断和治疗过程的监控。人脐静脉内皮细胞和卵巢癌细胞（MLS）对RGD-超小顺磁氧化铁纳米粒（RGD-USPIO）的吸收显著高于非靶向纳米粒，在恶性胶质瘤（U87MG）裸鼠模型中，RGD-USPIO 主要集中在肿瘤新生血管区域[48]。通过活体显微镜检查、核磁共振成像、整体荧光显像等技术的多模态成像，RGD-顺磁量子点纳米粒可监控肿瘤血管的生成[47]。以靶向核素、整合素αvβ3、Tnc蛋白的AS1411、RGD、TTA1制备的多适配体靶向纳米粒作为肿瘤探针进行肿瘤诊断，显示出比AS1411、RGD、TTA1 单个探针更强的特异性和信号强度[41]。

5 结语

发现RGD是细胞识别位点至今已超过20年，对其在疾病诊断和治疗中的应用备受关注。对RGD肿瘤诊断试剂的研究已进入临床阶段，而以RGD 制备靶向抗肿瘤药物还未见相关的临床试验报道。RGD-纳米抗肿瘤制剂，包括脂质体、胶束和纳米粒，在体外和动物移植瘤模型中都表现出比非靶向纳米抗肿瘤制剂和已上市药物有更好的疗效，其在临床上的应用效果值得期待。

[1]Ambros J B,Markus S.Imaging of integrin alpha v beta 3 expression[J].Cancer Metastasis Rev,2008,27(4):631-644.

[2]Desgrosellier J S,Cheresh D A.Integrins in cancer:biological implications and therapeutic opportunities[J].Nat Rev Cancer,2010,10(1):9-22.

[3]Hood J D,Cheresh D A.Role of integrins in cell invasion and migration[J].Nat Rev Cancer,2002,2(2):91-100.

[4]Guo W,Giancotti F G.Integrin signalling during tumour progression[J].Nat Rev Mol Cell Biol,2004,5(10):816-826.

[5]Stupack D G,Cheresh D A.Get a ligand,get a life:integrins,signaling and cell survival[J].J Cell Sci,2002,115(Pt 19):3729-3738.

[6]Somanath P R,Malinin N L,Byzova T V.Cooperation between integrin αvβ3 and VEGFR2 in angiogenesis[J].Angiogenesis,2009,12(2):177-185.

[7]Brooks P C,Montgomery A M,Rosenfeld M,et al.Integrin alpha v beta 3 antagonists promote tumor regression by inducing apoptosis of angiogenic blood vessels[J].Cell,1994,79(7):1157-1164.

[8]Brooks P C,Clark R A,Cheresh D A.Requirement of vascular integrin alpha v beta 3 for angiogenesis[J].Science,1994,64(5158):569-571.

[9]Van W C.Cell adhesion and regulatory molecules involved in tumor formation,hemostasis,and wound healing[J].Head Neck,1995,17(2):140-147.

[10]Gladson C L.Expression of integrin alpha v beta 3 in small blood vessels of glioblastoma tumors[J].J Neuropathol Exp Neurol,1996,55(11):1143-1149.

[11]Avraamides C J,Garmy-Susini B,Varner J A.Integrins in angiogenesis and lymphangiogenesis[J].Nat Rev Cancer,2008,(8):604-617.

[12]Zitzmann S,Ehemann V,Schwab M.Arginine-glycine-aspartic acid(RGD)-peptide binds to both tumor and tumor-endothelial cells in vivo[J].Cancer Res,2002,62(18):5139-5143.

[13]Guo N,Lang L,Li W,et al.Quantitative analysis and comparison study of [18F]AlF-NOTA-PRGD2,[18F]FPPRGD2 and[18Ga]Ga-NOTA-PRGD2 using a reference tissue model[J].PLoS ONE,2012,7(5):e37506.

[14]Lang L,Li W,Guo N,et al.Comparison study of [18F]FAl-NOTA-PRGD2,[18F]FPPRGD2 and [18Ga]Ga-NOTA-PRGD2 for PET imaging of U87MG tumors in mice[J].Bioconjug Chem,2011,22(12):2415-2422.

[15]Zhu Z,Miao W,Li Q,et al.99mTc-3PRGD2 for integrin receptor imaging of lung cancer:a multicenter study[J].J Nucl Med,2012,53(5):716-722.

[16]Morrison M S,Ricketts S A,Barnett J,et al.Use of a novel Arg-Gly-Asp radioligand,18F-AH111585,to determine changes in tumor vascularity after antitumor therapy[J].J Nucl Med,2009,50(1):116-122.

[17]Kenny L M,Coombes R C,Oulie I,et al.Phase I trial of the positron-emitting Arg-Gly-Asp(RGD) peptide radioligand18F-AH111585 in breast cancer patients[J].J Nucl Med,2008,49(6):879-886.

[18]Koning G A,Fretz M M,Woroniecka U,et al.Targeting liposomes to tumor endothelial cells for neutron capture therapy[J].Appl Radiat Isot,2004,61(5):963-967.

[19]Jiang J,Yang S J,Wang J C,et al.Sequential treatment of drug-resistant tumors with RGD-modified liposomes containing siRNA or doxorubicin[J].Eur J Pharm Biopharm,2010,76(2):170-178.

[20]Meng S,Su B,Li W,et al.Integrin-targeted paclitaxel nanoliposomes for tumor therapy[J].Med Oncol,2011,28(4):1180-1187.

[21]Xiong X B,Huang Y,Lu W L,et al.Enhanced intracellular delivery and improved antitumor efficacy of doxorubicin by sterically stabilized liposomes modified with a synthetic RGD mimetic[J].J Control Rel,2005,107(2):262-275.

[22]Xiong X B,Huang Y,Lu W L,et al.Enhanced intracellular uptake of sterically stabilized liposomal Doxorubicin in vitro resulting in improved antitumor activity in vivo[J].Pharm Res,2005,22(6):933-939.

[23]Hölig P,Bach M,Völkel T,et al.Novel RGD lipopeptides for the targeting of liposomes to integrin-expressing endothelial and melanoma cells[J].Protein Eng Des Sel,2004,17(5):433-441.

[24]Kibria G,Hatakeyama H,Ohga N,et al.Dual-ligand modification of PEGylated liposomes shows better cell selectivity and efficient gene delivery[J].J Control Rel,2011,153(2):141-148.

[25]Kluza E,Jacobs I,Hectors S J,et al.Dual-targeting of αvβ 3 and galectin-1 improves the specificity of paramagnetic/fluorescent liposomes to tumor endothelium in vivo[J].J Control Rel,2012,158(2):207-214.

[26]Ling V.Multidrug resistance and P-glycoprotein expression[J].Ann N Y Acad Sci,1987,507:7-8.

[27]Bradley G,Ling V.P-glycoprotein,multidrug resistance and tumor progression[J].Cancer Metastasis Rev,1994,13(2):223-233.

[28]Wang Y,Wang X,Zhang Y,et al.RGD-modified polymeric micelles as potential carriers for targeted delivery to integrinoverexpressing tumor vasculature and tumor cells[J].J Drug Target,2009,17(6):459-467.

[29]Wang Y,Yang T,Wang X,et al.Materializing sequential killing of tumor vasculature and tumor cells via targeted polymeric micelle system[J].J Control Rel,2011,149(3):299-306.

[30]Zhan C,Gu B,Xie C,et al.Cyclic RGD conjugated poly(ethylene glycol)-co-poly(lactic acid) micelle enhances paclitaxel anti-glioblastoma effect[J].J Control Rel,2010,143(1):136-142.

[31]Kessinger C W,Khemtong C,Togao O,et al.In vivo angiogenesis imaging of solid tumors by avb3-targeted,dual-modality micellar nanoprobes[J].Exp Biol Med(Maywood),2010,235(8):957-965.

[32]Mickler F M,Vachutinsky Y,Oba M,et al.Effect of integrin targeting and PEG shielding on polyplex micelle internalization studied by live-cell imaging[J].J Control Rel,2011,156(3):364-373.

[33]Xiong X B,Ma Z,Lai R,et al.The therapeutic response to multifunctional polymeric nano-conjugates in the targeted cellular and subcellular delivery of doxorubicin[J].Biomaterials,2010,31(4):757-768.

[34]Cai L L,Liu P,Li X,et al.RGD peptide-mediated chitosanbased polymeric micelles targeting delivery for integrin-overexpressing tumor cells[J].Int J Nanomed,2011,6:3499-3508.

[35]Du Y Z,Weng Q,Yuan H,et al.Synthesis and antitumor activity of stearate-g-dextran micelles for intracellular doxorubicin delivery[J].ACS Nano,2010,4(11):6894-6902.

[36]Oba M,Aoyagi K,Miyata K,et al.Polyplex micelles with cyclic RGD peptide ligands and disulfide cross-links directing to the enhanced transfection via controlled intracellular trafficking[J].Mol Pharm,2008,5(6):1080-1092.

[37]Oba M,Fukushima S,Kanayama N,et al.Cyclic RGD peptide-conjugated polyplex micelles as a targetable gene delivery system directed to cells possessing alphavbeta3 and alphavbeta5 integrins[J].Bioconjug Chem,2007,18(5):1415-1423.

[38]Khemtong C,Kessinger C W,Ren J,et al.In vivo off-resonance saturation magnetic resonance imaging of αvβ3-targeted superparamagnetic nanoparticles[J].Cancer Res,2009,69(4):1651-1658.

[39]Ko H Y,Choi K J,Lee C H,et al.A multimodal nanoparticle-based cancer imaging probe simultaneously targeting nucleolin,integrin αvβ3 and tenascin-C proteins[J].Biomaterials,2011,32(4):1130-1138.

[40]Jiang X,Xin H,Gu J,et al.Solid tumor penetration by integrin-mediated pegylated poly(trimethylene carbonate) nanoparticles loaded with paclitaxel[J].Biomaterials,2013,34(6):1739-1746.

[41]Jiang X,Sha X,Xin H,et al.Integrin-facilitated transcytosisfor enhanced penetration of advanced gliomas by poly(trimethylene carbonate)-based nanoparticles encapsulating paclitaxel[J].Biomaterials,2013,34(12):2969-2979.

[42]Xu Q,Liu Y,Su S,et al.Anti-tumor activity of paclitaxel through dual-targeting carrier of cyclic RGD and transferrin conjugated hyperbranched copolymer nanoparticles[J].Biomaterials,2012,33(5):1627-1639.

[43]Chen H,Wang L,Yeh J,et al.Reducing non-specific binding and uptake of nanoparticles and improving cell targeting with an antifouling PEO-b-PgMPS copolymer coating[J].Biomaterials,2010,31(20):5397-5407.

[44]Zhan C,Wei X,Qian J,et al.Co-delivery of TRAIL gene enhances the anti-glioblastoma effect of paclitaxel in vitro and in vivo[J].J Control Rel,2012,160(3):630-636.

[45]Tagalakis A D,Grosse S M,Meng Q H,et al.Integrin-targeted nanocomplexes for tumour specific delivery and therapy by systemic administration[J].Biomaterials,2011,32(5):1370-1376.

[46]Goutayer M,Dufort S,Josserand V,et al.Tumor targeting of functionalized lipid nanoparticles:assessment by in vivo fluorescence imaging[J].Eur J Pharm Biopharm,2010,75(2):137-147.

[47]Mulder W J,Castermans K,van Beijnum J R,et al.Molecular imaging of tumor angiogenesis using αvβ3-integrin targeted multimodal quantum dots[J].Angiogenesis,2009,12(1):17-24.

[48]Kiessling F,Huppert J,Zhang C,et al.RGD-labeled USPIO inhibits adhesion and endocytotic activity of alpha v beta3-integrin-expressing glioma cells and only accumulates in the vascular tumor compartment[J].Radiology,2009,253(2):462-469.

[49]Desai N,Trieu V,Yao Z,et al.Increased antitumor activity,intratumor paclitaxel concentrations,and endothelial cell transport of cremophor-free,albumin-bound paclitaxel,ABI-007,compared with cremophor-based paclitaxel[J].Clin Cancer Res,2006,12(4):1317-1324.

[50]He H,Li Y,Jia X R,et al.PEGylated poly(amidoamine) dendrimer-based dual-targeting carrier for treating brain tumors[J].Biomaterials,2011,32(2):478-487.

[51]Ding H,Inoue S,Ljubimov A V,et al.Inhibition of brain tumor growth by intravenous poly(beta-L-malic acid) nanobioconjugate with pH-dependent drug release[J].Proc Natl Acad Sci USA,2010,107(42):18143-18148.

[52]Xin H,Jiang X,Gu J,et al.Angiopep-conjugated poly(ethylene glycol)-co-poly(epsilon-caprolactone) nanoparticles as dual-targeting drug delivery system for brain glioma[J].Biomaterials,2011,32(18):4293-4305.