T-spot.TB在克罗恩病和肠结核鉴别诊断中的价值

何 敏，荀安营，赖广顺，吴慧华，邹 兵，吴子刚

(北京大学深圳医院消化内科,广东 深圳 518000)

克罗恩病是发生于消化道的慢性肉芽肿性炎症，以末段回肠及其邻近结肠发病多见，肠结核是由结核杆菌在肠道引起的慢性特异性感染，以回盲部多见。克罗恩病与肠结核的临床、影像、内镜及病理表现均十分相似[1]，但治疗、预后和转归存在很大差异，两种疾病的鉴别诊断一直是消化科医师的难题，结核杆菌T细胞斑点试验(T-cell spot of tuberculosis test，T-spot.TB)在结核病的鉴别诊断中具有较高的价值[2-3]，但其用于克罗恩病与肠结核鉴别诊断国内研究不多，本研究通过分析两种疾病患者T-spot.TB和其他实验室检查情况，探讨T-spot.TB在克罗恩病与肠结核的鉴别诊断价值。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择2010年1月至2012年8月在北京大学深圳医院消化内科诊治的37例ITB和35例克罗恩病患者作为研究对象，肠结核患者中男21例、女16例，年龄11～68(34.5±6.7)岁；克罗恩病患者男17例、女18例，年龄13～71(36.7±7.2)岁，两组患者性别及年龄构成差异无统计学意义(P>0.05)。克罗恩病的诊断参照中华医学会消化病学分会炎症性肠病协作组制订的《中国炎症性肠病诊断治疗规范的共识意见》[4]，并且治疗随访超过12个月，符合克罗恩病的自然发展规律，并且经病理学诊断为克罗恩病，手术标本病变组织无干酪样坏死。肠结核诊断参照文献[5]，并且内镜或手术切除病变组织可见干酪样肉芽肿，正规抗结核治疗半年以上，临床及内镜检查痊愈，治疗后9个月以上无复发。两组患者均能够排除恶性肿瘤、女性生殖系统病变、肾衰竭、肺炎及肝硬化等病变。

1.2检测方法

1.2.1T-spot.TB 按照T-spot.TB试剂盒(购自英国Oxford Immunotec 公司，批号：J2918D6)操作说明书进行，应用肝素抗凝试管采集外周静脉血8 mL，密度梯度离心法分离外周血单核淋巴细胞，将阳性对照植物血凝素、阴性对照细胞培养液及结核杆菌特异性A抗原和B抗原分别加入已包被抗干扰素γ抗体的微量板中，然后在每孔加入外周静脉血单核细胞2.5×105个，置于37 ℃恒温箱内孵育16～20 h，取出进行磷酸盐缓冲液洗脱4次，加入抗干扰素γ抗体在4 ℃恒温下孵育2 h，再次磷酸盐缓冲液洗脱后显色，磷酸盐缓冲液 终止反应。在放大镜下进行斑点数阅读和人工计数。阳性评判标准：测量孔点数是阴性对照孔的2倍以上或者较阴性对照多 6个斑点。

1.2.2糖类抗原125测定 采集清晨空腹静脉血，采用快速发光免疫分析法检测，仪器选用美国雅培公司生产AXSYM型全自动快速发光免疫分析仪及配套试剂。严格按试剂说明书进行操作，以糖类抗原125(CA125)>35 kU/L为阳性。

1.3统计学方法 应用SPSS 19.0版本统计软件分析，计数资料以例(%)表示，组间比较采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

T-spot.TB、血CA125检测阳性率肠结核组均显著高于克罗恩病组，差异有统计学意义(P<0.01)，而红细胞沉降率增快率、C反应蛋白升高率、便潜血阳性率、结明三项阳性率、结核菌素试验阳性率及抗中性粒细胞胞浆抗体阳性率组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)(表1)。T-spot.TB检测阳性中肠结核为34例，克罗恩病为3例，T-spot.TB检测阴性中肠结核为3例，克罗恩病为32例，CA125检测阳性中肠结核为29例，克罗恩病为8例，CA125检测阴性中肠结核为9例，克罗恩病为32例，以病理检查结果为金标准，T-spot.TB鉴别克罗恩病和肠结核的灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值均高于血CA125检测(表2)。

表1 两组患者实验室检查指标比较 [例(%)]

表2 T-spot.TB、血CA125检测鉴别 克罗恩病和肠结核的价值 (%)

3 讨 论

克罗恩病是西方经济发达国家常见的消化系统疾病，近年来随着工业化的发展和生活环境的变化，我国克罗恩病的发病率也有所上升，肠结核在我国发病率较高，与克罗恩病临床表现酷似，且有部分重叠，两者的鉴别诊断多年来是消化科临床的难题，而鉴别诊断对于治疗方案的选择有重要意义，如果将克罗恩病误诊为肠结核，将使患者承受不必要的抗结核治疗，并且可延迟克罗恩病的正确治疗；而将肠结核误诊为克罗恩病，激素、免疫抑制剂甚至生物制剂的应用会加重克罗恩病患者的病情[6]。结核菌的病原学诊断是鉴别克罗恩病和肠结核的金标准，但标本中的细菌数量对检测结果的影响较大，并且结核杆菌培养周期较长，不利于早期诊断[7]，本研究T-spot.TB和血CA125检测阳性率在两种疾病患者中的差异有统计学意义(P=0.000)，两种检测方式均有助于克罗恩病和肠结核的鉴别。

结核杆菌的染色体上存在着一段名为RD1的基因序列，而在T-spot.TB中，感染结核杆菌患者外周静脉血T细胞可被RD1编码抗原活化而分泌干扰素γ，干扰素γ与微孔板上的相应抗体结合而显色为色素斑点，据此可对结核感染做出诊断[7]。T-spot.TB作为一种新的结核检测手段对结核杆菌感染具有较高的敏感性和特异性，近年来开始应用于克罗恩病和肠结核的鉴别。雷少妮等[7]的研究对T-spot.TB 鉴别克罗恩病和肠结核的价值进行了探讨，灵敏度、特异度分别为93.3% 、85.7%，并认为T-spot.TB检测有助于克罗恩病和ITB的鉴别。Beom 等[8]的研究也证实了T-spot.TB在克罗恩病和肠结核中的鉴别价值，其诊断肠结核的灵敏度为67%，特异度达到90%，阳性预测值和阴性预测值也分别达到87%和73%。本研究结果显示T-spot.TB鉴别克罗恩病和肠结核的灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值分别为91.9%、91.4%、91.7%、91.9%、91.4%，与雷少妮等[7]的结果一致，高于Beom等[8]的研究，可能与研究对象所处不同地区和不同生活环境有关。

CA125是一种高分子量糖蛋白，在结核病的诊断和鉴别诊断中有较高的价值，也有学者将其用于克罗恩病和肠结核的鉴别诊断，肠结核患者多合并肺部活动性结核，CA125主要是胸膜、腹膜间皮细胞或支气管黏膜上皮细胞在结核炎性刺激下产生的[9]。本研究结果显示肠结核患者血CA125的阳性率显著高于克罗恩病患者，提示血CA125检测对于克罗恩病和肠结核的鉴别有一定价值，但灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为78.4%、74.2%、76.3%、76.4%，均低于T-spot.TB检测，提示其诊断价值低于T-spot.TB，可能的原因为部分ITB患者未合并肠外结核，难以产生大量CA125，造成敏感性降低，而克罗恩病严重时也可存在透壁性炎症，刺激肠道浆膜的间皮细胞分泌CA125，导致其血液中水平升高，降低了血CA125在检测肠结核中的特异性。

综上所述，T-spot.TB方便快捷，敏感性和特异性高，在克罗恩病和肠结核的鉴别诊断中具有重要价值，但T-spot.TB也存在着较小的假阳性率，如结合血CA125及其他检测方式，更有利于两者的鉴别。

[1] 黄鑫，廖旺娣，朱萱. 回结肠克罗恩病与肠结核鉴别诊断研究进展[J].中国实用内科杂志,2013,33(4):318-321.

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[8] Beom J K,Yong SC,Byung IJ,et al.Prospective evaluation of the clinical utility of interferon-γ assay in the differential diagnosis of intestinal tuberculosis and Crohn′s disease[J]. Inflamm Bowel Dis,2011,17(6) : 1308-1313.

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