广东省各年龄段妇女人乳头瘤病毒感染率及型别分布情况

陈亮 黄健初 姜碧 姚倩瑜 吴剑英

广东省各年龄段妇女人乳头瘤病毒感染率及型别分布情况

陈亮 黄健初 姜碧 姚倩瑜 吴剑英

目的 检测分析广东省各年龄段妇女人乳头瘤病毒感染率及型别的分布情况，为个体化治疗以及疫苗的开发及注射指导方面提供流行病学资料。方法 利用ILLumina公司新一代HPV DNA测序技术对广东省十个城市18～74岁年龄段妇女共78410人进行HPV的检测，并对HPV阳性者进行HPV的型别测定，统计分析各年龄组HPV的感染率及型别分布情况。结果 受检者共78410人，其中阳性者5693人，阳性率7.26%，各年龄段感染率依次为8.18%、6.49%、7.44%、7.91%、10.73%、8.16%，各年龄组除总体的 3个主要感染型别 16、52、58型外，还出现 6、66、18和 31型。结论 各年龄段HPV感染率无明显统计学差异，但有年龄倾向性；不同年龄段的主要感染型别具有一定的差异性。

人乳头瘤病毒；基因型别；感染率；宫颈癌

宫颈癌是严重危害妇女健康的恶性肿瘤之一，居世界女性癌症死亡率的第2位，仅次于乳腺癌。宫颈癌是一种感染性疾病，研究表明，人乳头瘤病毒HPV持续感染是其主要病因[1-2]。人乳头瘤病毒（HPV）是双链DNA病毒，其亚型多达100多种，其中低危型有 6、11、42、43、44 等；高危型有 16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68 等型别。近年来发现年龄与HPV感染及宫颈癌的发生有着密切的联系[3]，由于基因的多态性原因，本研究主要是通过大人群的筛查，了解广东省各年龄段妇女的HPV感染型别的分布情况，为宫颈疾病治疗效果的检测以及HPV特异性基因疫苗的研发与推广提供流行病学资料。

1 资料与方法

1.1 一般资料 分别在广东省东莞、广州，珠海、清远、汕头、深圳、韶关、湛江、佛山、惠州十个城市随机抽取18～74岁年龄段妇女共78410人进行宫颈脱落细胞的采集。

1.2 方法

1.2.1 宫颈脱落细胞的采集 （1）放置窥阴器，观察宫颈口，如有血液或者黏液，用无菌棉签拭净；（2）将专用的宫颈刷置于宫颈口，插入子宫颈内，直到只有刷头最后面的刷毛暴露在子宫颈外口为止；（3）抵住刷把，慢慢将宫颈刷以同一方向转动3～5圈；（4）打开细胞保存液管，将细胞刷浸入保存液中，沿刷柄折痕处折断，拧紧瓶盖。

1.2.2 HPV DNA检测及分型测定 采用ILLumina公司的新一代测序技术(NGS,Next Generation Sequencing),即高通量测序技术是一种基于边合成边测序技术的新型测序方法，通过利用单分子阵列实现在小型芯片（Flow Cell）上进行桥式聚合酶链反应（PCR）反应。主要流程：（1）待检测DNA文库的构建，通过PCR扩增，芯片捕获，DNA打断等方式获取所需检测DNA片段；（2）芯片制备和上机测序；（3）边合成边测序，向反应体系中同时添加DNA聚合酶，接头引物和带有碱基特异荧光标记的4种dNTP。用激光激发荧光信号，用光学设备完成荧光信号的记录，并通过计算机分析转化为测序结果；（4）信号记录完后，加入试剂，淬灭荧光信号，随后加入第2个核苷酸，如此重复，直到每条模版序列都完全被聚合为双链。

1.3 统计学方法 采用SPSS10.0软件进行数据处理。计数资料组间比较行χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义.

2 结果

2.1 各年龄段与HPV感染关系 参检的总人数为78361例，最小年龄18岁，最大年龄74岁，分6个年龄组，18～24岁共2517人，25～34岁共 27750人，35～44岁共 35681人，45～54岁共11264人，55～64岁共1100人，65～74岁共98人，总共6个年龄组，其中第1年龄组HPV检出阳性例数206人；阳性率为8.18%，第2年龄组检出阳性例数1801人；阳性率为6.49%，第3年龄组检出阳性例数2655人；阳性率为7.44%，第4年龄组检出阳性例数891人；阳性率为7.91%，第5年龄组检出阳性例数118人；阳性率最高为10.73%，第6年龄组检出阳性例数8人；阳性率8.16%。经统计学χ2检验，各年龄段HPV阳性率差异无统计学意义。

2.2 各年龄组中HPV型别的分布情况 将每个分组前4个主要感染型别进行汇总后得如下结果：18～24年龄组是16、52、58、6型；25～34 岁年龄组是 16、52、58、18 型；35～44岁年龄组是16、52、58、18 型；45～54 岁年龄组是 16、52、58、18 型；55～64 岁年龄组是 16、52、58、18 型；65～74 岁年龄组是 31、66、16、52 型。

3 讨论

3.1 各年龄组感染情况 本研究中，受检者最小年龄18岁，最大74岁，感染率最低在25～34岁年龄组6.49%，最高在55～64岁年龄组，为10.73%，HPV人群感染率1.4%～25.6%[4]，本研究所得感染率与欧美一致，其中35～44岁年龄组受检人数最多共35681人，感染率7.44%，感染率最高的55～64岁年龄组，人数共1100人，感染率10.73%，分析其高感染率的原因可能有两点：（1）55～64岁年龄段受检人数只有1100人，样本量过少，不具有代表性；（2）另一种可能是55岁左右年纪的女性多处于绝经期，由于激素分泌和宫颈鳞状细胞层薄等原因，从而导致该年龄段的HPV感染率偏高。本研究结果显示，各年龄组HPV感染率差异无统计学意义，但有年龄的倾向性，感染率随年龄增长逐渐增高，这也说明人体随着自身年龄的增长，自身清除HPV的能力逐渐降低，而且随着年龄增大，宫颈癌的发病率明显增高，所以对于30岁以上妇女，发现HPV的感染应该更加引起重视及需要进一步处理[5-9]。

3.2 各年龄组HPV感染型别的分布情况 通过本次调查，除65～74岁年龄组外，各年龄段HPV感染型别居首位是16型，这与国外报道的欧美HPV16型是主要感染型别[10-11]是一致的，除65～74岁年龄组外，各年龄组前3位主要感染型是一致的，均为16、52、58型，但在第4位HPV感染型别中，25～34岁、35～44岁、45～54岁以及55～64岁4个年龄段为18型，而18～24岁是6型，65～74岁是58型。经过分析，随着年龄增大，HPV18型感染概率增高，相关资料显示随着年纪增长，宫颈癌的发病率也增高，其高发年龄段在45～54岁，基于这一点，我们以18～24岁年龄段与45～54岁年龄段作比较发现，在两个年龄组里，前3种感染型别是一致的，在第4种HPV型别中18～25岁是6型，45～54岁是18型。相关文献报道[8]，这两个年龄组的宫颈癌发病率是有差异的，所以我们设想可能是18型导致两个年龄段宫颈癌发病率出现差异的主要原因，这也进一步说明18型是导致宫颈癌发生的一个重要型别[12]。同时，本研究对25～34岁、35～44岁、45～54岁以及55～64岁年龄组做比较，其各年龄组前4位感染型别是一致的，但各组的宫颈癌的发病率是不同的[8]，分析除随年龄增大，自身清除病毒能力下降这一因素外，可能与HPV多重感染有关。65～74岁年龄组前四位感染型别分别是31、66、16、52型，与其余各年龄组差别较大，分析可能原因有：（1）样本量过少，结果不具有代表意义；（2）该年龄组处于绝经期，激素水平与自身代谢水平的改变，从而导致感染型别的差异。对于该年龄组的这种感染型别的差异值得引起重视及研究。综合以上分析，可以说明，HPV16、HPV18型是进一步分析研究HPV感染与宫颈癌发生机制的突破口，同时也需对HPV多重感染与宫颈癌的发生之间的相关性做进一步研究。

3.3 HPV感染型别与疫苗的研发 宫颈癌是一种感染性疾病，只有从根本上杜绝HPV的感染，才能大大降低宫颈癌的发病率。所以最理想的防治模式是以一级预防为主，二级预防为辅。美国FDA与2006年批准Cardasil HPV预防性疫苗上市，标志着宫颈癌的防治已开始进入一级预防为主，二级预防为辅的模式。但该疫苗有地区的局限性，疫苗只是针对该地区的几种常见型别，本次研究中，除65～74岁年龄段外，各年龄组HPV感染型别前3位的均为16、52、58型。国内吴玉萍等[11]报道山西省宫颈癌患者主要感染HPV型别前4种分别为16、58、33、31型。欧美在妇女人群中主要常见感染型别分别是16、18、58型[4]，但在非洲西部HPV45常见，以上数据都进一步说明常见HPV感染型别是具有地区差异性的。因此，大型人群的流行病学资料对于HPV特异性疫苗的研发与推广是必须的。

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Objective To detect human papillomavirus infection distribution and types of Guangdong province women of all ages,to provide epidemiological data for individual treatment and the development of vaccines and injection guidance. Methods ILLumina's next-generation HPV DNA sequencing technology was used,city, ten women aged 18-74 were 78 410 people in Guangdong province were test for HPV and HPV-positive for HPV type were determined, HPV infection and type distribution of all ages group were statistical analyzed. Results Subjects were 78,410 people, of which 5693 positive, the positive rate was 7.26%, prevalence of all ages were 8.18%, 6.49%, 7.44%, 7.91%, 10.73%, 8.16%, in each age group In addition to the three general types 16,52,58 type primary infection, but also the emergence of 6,66,18 and 31 type. Conclusion HPV infection of all ages is no signifi cant difference, but there is the age tendentious; different ages of primary infection type has some differences.

Human papillomavirus; Genotype; Infection; Cervical cancer

10.3969/j.issn.1009-4393.2014.3.016

广东 523000 广东省东莞市计划生育服务中心 （陈亮 黄健初 姜碧 姚倩瑜 吴剑英）