HPLC法测定芪蛭通脉胶囊中山奈素的含量

李松宾

（河南省商丘市食品药品检验所，商丘 476000）

芪蛭通脉胶囊是经河南省食品药品监督管理局批准的医疗机构制剂，由细辛、山楂、黄芪、水蛭、红花、桃仁、当归等10味中药材加工制成，具有和血益气，化瘀通脉，强心健步，益脑开窍之功效，用于气虚血瘀所致的中风，冠心病，心肌缺血，高血压，症见半身不遂，口眼歪斜，胸闷等[1]，长期的临床经验证明其具有良好的治疗作用。山奈素为红花的主要有效成分[2]，红花具有活血通经，散瘀止痛功效。用于经闭，痛经，恶露不行，癥瘕痞块，胸痹心痛，瘀滞腹痛，胸胁刺痛，跌扑损伤，疮疡肿痛，对芪蛭通脉胶囊疗效的发挥起重要作用。国内现行的质量标准中未收载山奈素含量测定项目，为了有效地控制制剂质量，本文采用高效液相色谱法测定了红花中山奈素的含量，现报道如下。

1 仪器与试药

1.1 仪器 AUW-220D电子分析天平 （精密至0.01mg），戴安U3000高效液相色谱仪。

1.2 试药 山奈素对照品 （批号：11736-201035，来源：中国药品生物制品检定所）；纯化水，甲醇为色谱纯，磷酸为分析纯。芪蛭通脉胶囊 （样品由柘城县人民医院提供，批号140626；140412；130904）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 色谱柱：ODS-C18色谱柱 (5μm，4.6×250mm)，0.4%磷酸： 甲醇 （48∶52） 为流动相； 检测波长367nm； 流速1.0ml·min-1； 进样量10μl。 理论板数按山奈素峰计算不低于3000。

2.2 对照品制备 取山奈素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml中含山奈素16.40μg的溶液，作为对照品溶液。

2.3 供试品溶液的制备 取本品内容物约11g（约相当于红花约0.5g），精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液15ml，置平底烧瓶中，加盐酸溶液(15→37)5ml，摇匀，置水浴中加热水解30分钟，立即冷却，转移至25ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.4 线性关系考察 取山奈素对照品溶液，按照 “2.1”项色谱条件，分别进样2、5、10、15、20μl，记录山奈素峰面积值，以峰面积 （A）为纵坐标，以对照品进样量 （C）为横坐标进行线性回归，得回归方程：Y=1.1067X-0.1968 r=0.9999。结果显示，在0.0328～0.3280μg范围内山奈素进样量与峰面积值呈良好的线性关系。

2.5 干扰试验 取不含红花的阴性样品 （自制）约11g，照供试品溶液制备方法制备，注入液相色谱仪，进样量10μl，阴性对照液对测定无干扰，结果见图1。

图1高效液相色谱图

2.6 精密度试验 取同一浓度的对照品溶液 （16.40μg/ml），重复进样6次，每次10μl，测定山奈素峰面积，RSD=0.44%(n=6)，表明仪器精密度良好。

2.7 稳定性试验 取同一浓度供试品溶液，分别在0、2、4、8、12h进样测定，结果山奈素峰面积RSD=0.94%，显示供试品溶液在12小时内峰面积基本稳定。2.8加样回收率试验 称取已知含量为0.04714mg/g的样品9份，精密称定，分别精密加入对照品储备液（0.1040mg/ml） 1ml、 2ml、 3ml， 按照供试品溶液制备方法制备，按照 “2.1”项色谱条件，分别测定，结果见表1。

表1加样回收率试验结果

2.9 含量测定 取3批样品，按制备供试品溶液方法制备样品溶液，按照 “2.1”项色谱条件测定，按外标法计算山奈素的含量，结果见表2。

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3 讨论

芪蛭通脉胶囊是医院制剂，为了保证药品质量，以其中的红花所含山奈素为质量控制标准，采用了高效液相色谱法测定制剂中山奈素的含量。实验结果表明，高效液相色谱法用于芪蛭通脉胶囊的质量控制，方法简便快捷，稳定，结果准确。

[1]河南省医疗机构制剂标准．豫药制字：Z20120776.

[2]国家药典委员会中华人民共和国药典(一部)[S]，北京：中国医药科技出版社，2010：141-142.