肿节风总黄酮对阿糖胞苷诱发小鼠血小板减少症模型的影响※

何志坚 刘海云

（1江西省肿瘤医院放疗科，南昌 330029；2江西中医药大学基础医学院，南昌 330004）

肿节风是金粟兰科植物草珊瑚属植物，又名草珊瑚，九节茶，味苦、辛，性平，归心、肝经，具有活血化瘀、消肿散结、主骨生髓、凉血止血的功效，主要用于血热妄行，原发性、继发性紫癜。药理作用研究表明肿节风主要成分总黄酮有抑制肿瘤、广谱抗菌、抑制免疫、减轻化疗药物对骨髓系统的抑制，恢复骨髓巨核系造血功能等作用，血康口服液治疗特发性血小板减少性紫癜报道较多，总有效率为84.3%左右。目前应用肿节风能有效治疗特发性血小板减少性紫癜已经成为临床共识，但应用肿节风治疗化疗引起血小板减少症的临床研究甚少[1-2]。

1 材料与方法

1.1药材制备 0．9%氯化钠注射液，肿节风总黄酮（ZJF）使用前用蒸馏水配制，按肿节风片的用药剂量配成 6.5、 13、 26mg/ml。

1.2 动物 昆明种3月龄小鼠60只，体质量22～25g，雌雄各半。小鼠随机分为6组：正常对照组、模型组、肿节风总黄酮低中高剂量组和阳性药强的松龙组，每组10只。

1.3 实验方法 除正常对照组外，其余5组均通过腹腔注射阿糖胞苷建立血小板减少症小鼠模型。各给药组灌胃给药，正常对照组、模型组灌等体积的生理盐水，各组每次灌胃量均为0.1ml/10g，每天2次，强的松龙配成 2mg/ml，总黄酮配成 6.5、13、26mg/ml的低、中、高剂量，从开始腹腔注射阿糖胞苷时各给药组同时灌胃给药，第9天，将各组动物禁食12小时。第10天，称体重、给药1小时后小鼠眼眶静脉取血，置于室温静置 1h，3000r/min离心20分钟，取上清，-20℃保存作外周血象检测备用，最后颈椎脱臼处死小鼠。

1.4 观察指标 观察内容包括：外周血象检测、骨髓病理切片及骨髓涂片检测肿节风总黄酮对体内巨核细胞的影响。观察外周血血小板数 （PLT）、血小板平均体积 （MPV）、 红细胞数 （RBC）、 血红蛋白含量（HGB）和白细胞数 （WBC）的变化。1.5统计学分析 研究中所得到的相关数据采用SPSS 12.0统计学数据处理软件进行处理分析，连续性变量以均数±标准差表示，组间对比应用两独立样本计量资料采用t检验，计数资料采用χ2检验，以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

小鼠经阿糖胞苷造模后，模型组PLT显著低于正常对照组，数据差异具有统计学意义 （P＜0.05）；肿节风总黄酮中剂量组、阳性药强的松龙组PLT显著高于模型组，数据差异具有统计学意义 （P＜0.05）；阳性药强的松龙组WBC显著低于正常对照组，数据差异具有统计学意义 （P＜0.05）；而各组MPV、RBC、HGB与正常对照组相比，数据差异无显著性 （P＞0.05）， 见表 1。

表1 各组小鼠外周血象的变化

表1 各组小鼠外周血象的变化

注：①与正常对照组相比，数据差异具有统计学意义 （P＜0.05）；②与模型组相比，数据差异具有统计学意义 （P＜0.05）

?

3 讨论

血小板减少现在已经成为临床化疗常见的副作用，迄今现代医学对化疗引起血小板减少症的防治不甚理想，作用明显且副作用少的药物少之又少[5]。而中药却有广阔的前景和优势。

目前西医对化疗产生的血小板减少症多采用输注血小板，但疗效并不理想，且反复输注会产生抗血小板抗体而影响疗效，另外还增加了血源性感染 （如乙肝、丙肝、AIDS）的机会。随着基因重组技术的发展，临床还经常足时、足量应用巨核细胞正向调节因子TPO和IL-11，TPO能特异性地刺激巨核系祖细胞增殖分化成熟并产生血小板，但其对巨核细胞成熟释放血小板的最终生成过程作用更为强烈，可能诱发血小板聚集、黏附，影响到正常的凝血和止血功能，且反复使用TPO会产生抗体，直接影响药物的疗效。在美国，TPO因出现深部静脉血栓等严重不良反应而被迫停止了临床试验[4]。IL-11是一种血小板生长因子，可直接刺激巨核系祖细胞增殖分化成熟，加速体内血小板的生成，是迄今FDA批准的唯一一种用来防治血小板减少症的药物，但IL-11易产生一些不良反应，如水肿、头痛、发热、肌肉骨骼疼痛及中性粒细胞减少性发热、心动过速等，而且重组人IL-11价格昂贵，临床常规使用也极大地加重了患者的经济负担。输注血小板和各类造血因子的使用，虽然也能取得一定的临床效果，但仍存在造血恢复时间较长，并发症多的问题，威胁患者治疗过程的安全性，并降低化疗的效果，影响患者的预后。中医药以其独特的理论与疗效在治疗化疗引起血小板减少症方面有广阔的前景及优势。化疗引起血小板减少症归属于 “虚劳”、“血证”、 “外感发热”或 “内伤发热”等病证门类，以热、虚、瘀为主要病机特点，以扶正祛邪、益气养阴、调补脾肾、清热解毒凉血为治则[5]。

本试验利用阿糖胞苷建立了化疗后血小板减少小鼠模型，研究肿节风总黄酮对化疗后血小板减少小鼠模型的治疗效果，为治疗化疗引起血小板减少症提供新的思路，为开发肿节风治疗化疗引起血小板减少症提供科学依据，并研究其作用机制[6-7]。

本研究结果显示，小鼠经注射阿糖胞苷造模后，模型组PLT显著低于正常对照组，数据差异具有统计学意义 （P＜0.05）；肿节风总黄酮中剂量组、阳性药强的松龙组PLT显著高于模型组，数据差异具有统计学意义 （P＜0.05）；阳性药强的松龙组WBC显著低于正常对照组，数据差异具有统计学意义 （P＜0.05）；而各组MPV、RBC、HGB与正常对照组相比，数据差异无显著性 （P＞0.05）。结合研究结果认为，肿节风总黄酮中剂量、阳性药强的松龙具有提升PLT功效，同时肿节风总黄酮中剂量、阳性药强的松龙可实现小鼠模型PLT回到正常水平，即肿节风总黄酮作用部位为导致血小板减少的有效环节，本次研究结果与相关文献报道相符[8-9]。

总而言之，阿糖胞苷能够有效建立小鼠血小板减少模型，肿节风总黄酮能够明显对血小板起到提升作用。

[1]贾晓琳，杨丽艳，李玉芳，等．基因重组人白细胞介素-11治疗恶性肿瘤化疗所致血小板减少症的临床探讨[J]．中国肿瘤临床与康复，2007，14（5）：412-414．

[2]朱翔，方明治，黄欣，等．滋阴养血治疗结直肠癌化疗后血小板减少临床观察[J]．辽宁中医药大学学报，2010，12（2）：145-146．

[3]张苗海，胡小燕，汪运富，等．参仙合剂治疗肿瘤放化疗所致血小板减少症52 例临床观察[J]．中国中西医结合急救杂志，2009，16（6）：364-265．

[4]王玉，方明泊．四逆汤加味治疗结直肠癌化疗后血小板减少30例临床研究[J]．江苏中医药，2011，43（5）：28-29．

[5]贾新颜，廿欣锦，宗明，等．补肾健脾止血中药对恶性血液病化疗后血小板减少的干预作用[J]．中国中医急症，2010，19（9）：1490-1491．

[6]黄惠刚，朱奔奔，黄波．附子汤对慢性充血性心力衰竭模型大鼠BNP、IL-6水平的影响[J]．陕西中医，2009，30（6）：745-746．

[7]张大鹏，周联，张志敏，等．四君子汤总多糖对免疫抑制小鼠肠道slgA的影响及其机制研究[J]．中药新药与临床药理，2010，21（1）：11-14．

[8]杨艳梅，熊德上，徐两华，等．宁血饮对ITP模型小鼠血小板系统和免疫功能的影响[J]．重庆医学，2011，40（22）：2199-2205．

[9]付克，张春玲，闫广利．肿节风有效部位的纯化工艺研究[J]．中医药学报，2012，40（5）：59-62．