海南地区衣原体病血清学调查

陈有文 （青海省海南州畜牧兽医站 813000）

应用间接血凝(IHA)试验对海南州5县的1202份牛血清和1732份羊血清进行了衣原体病血清学检测，结果检出：牛阳性血清91份 ，阳性率为7.6 %，羊阳性血清63份，阳性率为3.6%。

衣原体病是由鹦鹉热衣原体引起羊、牛等多种动物的传染病.临床病理特征为流产、肺炎、肠炎、多发性关节炎和脑炎。衣原体为革兰氏阴性病原体，是专性细胞内寄生，能在鸡胚和易感的脊椎动物细胞内生长繁殖，在自然界中传播很广泛[1]。主要通过性接触传播，牛羊衣原体性流产常呈地方性流行，本病没有明显的季节性，但以冬春季节较多见，遇降雪、降温、寒流等气候突变时流产率显著升高。母牛羊怀孕各期都可能发生流产，以中后期居多。感染牛羊可长期带毒，但以后直至流产都无明显症状，对养殖业造成重大危害[2]。为摸清海南州牛羊衣原体病的感染情况，笔者于2013年6月，应用间接血凝试验(IHA)对海南州地区的牛羊随机抽样进行衣原体病血清学检测，现将检测结果报告如下：

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 待检血清 无菌采集牛羊静脉血，分离血清，4℃冰箱保存，待检。

1.1.2 诊断试剂 所用衣原体标准抗原，标准阴性、阳性血清。均由青海省动物疫病预防控制中心提供。

1.1.3 仪器 96孔1100V型血凝板，微量振荡器、恒温箱、微量加样器等。

1.2 方法

1.2.1 加稀释液 在96孔1100V型血凝板上每孔加稀释液75μl。

1.2.2 稀释待检血清 用微量加样器取待检血清25μl，加入第1排第1孔，并将塑咀插入孔底，右手拇指轻压弹簧1～2次混匀(避免产生过多的气泡)，从该孔取出25μl移入第2孔，混匀后取出25μl移入第3孔，混匀后从第3孔取出25μl丢弃。此时第1排1～3孔待检血清的稀释度(稀释倍数)依次为：1:4⑴、1:8⑵、1:16⑶；其他待检血清、标准阴性、阳性血清均按上法稀释。

1.2.3 加抗原 被检血清各孔、阴性对照血清各孔、阳性对照血清各孔、稀释液对照孔均各加衣原体血凝抗原(充分摇匀，瓶底应无血球沉淀)25μl，血凝板置于微量振荡器上1～2min，然后将血凝板放在白纸上观察各孔红血球是否混匀，不出现血球沉淀为合格。盖上玻板，37℃恒温箱静置1.5～2h判定结果，也可延至翌日判定。

1.2.4 判定标准 对照孔各孔均成立的前提下，被检血清1:16孔出现“﹢﹢”以上者为阳性，1:4孔出现“﹢”者为阴性，1:4孔“﹢﹢”1:16孔出现“﹢”以下者为可疑。

2 结果

检测牛血清共1202 份，阳性数91 份，阳性率为7.6%；检测羊血清共1732份，阳性数63份，阳性率为3.6%。详见表1、表2。

表1 牛衣原体病血清学检测结果 （%）

表2 羊衣原体病血清学检测结果 （%）

3 讨论

（1）本次衣原体病血清学检测对海南州5 县范围内天然放牧牦牛和藏系羊进行随机抽样，检测结果表明，海南地区牛羊群中在一定程度上存在衣原体病的感染，而且牛衣原体病的平均阳性率(7.6%)高于羊的平均阳性率(3.6%)，尤其是同德县牛的阳性率高达11.4%，笔者认为这与近几年牛羊频繁流产有一定关系。因此，建议各级畜牧兽医主管部门和广大牧民群众应从思想上提高认识，重视该病的防治工作。（2）据近几年的监测结果表明，衣原体病在青海省范围内的牛羊中普遍感染情况。说明随着市场的活跃，牲畜的流通频繁，在县与县之间、村与村之间牲畜的流通串换，导致疫源由外输入的现象存在。（3）建议通过血清学方法检测，及时淘汰检出的阳性畜。对已污染的畜棚、环境用2%～5%来苏儿或20%苛性钠等有效消毒剂进行消毒，力求从源头上控制和净化此病。（4）制定合理有效的防治措施。在衣原体病流行地区，应制定疫苗免疫计划，定期进行预防接种； 加强牛羊衣原体流行病学调查，建立疫情监测制度；加强检疫工作力度，防止疫病传入。

致谢：在牛羊衣原体病的采样和部分检测中得到了魏有梅、王烈琴、万玛吉、谢仁卓玛、巴特等同志的大力支持，在此表示衷心的感谢！

[1]陆承平.兽医微生物学[m].北京: 中国农业出版社, 2001.378-382.

[2]张绍贤.家畜传染病学[m].北京: 中国农业出版社, 1995.146-147.

[3]李世双.门源县西部地区牛羊衣原体病血清学调查[J].青海畜牧兽医杂志.2012.(6): 26.

[4]谢昌元.王光华等.青海省羊衣原体病综合防制措施[J].青海畜牧兽医杂志.2013(3): 39-40.

[5]祁小英.乐都县牛衣原体病血清学调查[J].青海畜牧兽医杂志.2013(4): 10.