高试剂空白测定值对稀释法测丙氨酸氨基转移酶结果的影响及对策

李术惠 王晓燕 曲本祥 兰 彦 刘 怡 崔 勇

1.山东省威海市传染病医院检验科，山东威海264200；2.山东省威海市中医医院检验科，山东威海264200；3.山东省威海市海大医院检验科，山东威海264200

高试剂空白测定值对稀释法测丙氨酸氨基转移酶结果的影响及对策

李术惠1王晓燕1曲本祥2兰 彦1刘 怡1崔 勇3

1.山东省威海市传染病医院检验科，山东威海264200；2.山东省威海市中医医院检验科，山东威海264200；3.山东省威海市海大医院检验科，山东威海264200

目的了解常用项目在不同生化检测系统上的试剂空白测定值情况，探讨用稀释法检测丙氨酸氨基转移酶（ALT）时，高空白测定值对其结果的影响及纠正办法。方法在迈瑞BS-820、西门子Dimension Rxl Max全自动生化系统上共观察了ALT、三酰甘油（TG）、碱性磷酸酶（ALP）、转肽酶（GGT）、乳酸脱氢酶（LDH）、磷（Phos）、钙（Ca）7种生化项目的空白测定值。在Dimension Rxl Max生化系统上，对3份血清标本分别按1∶2、1∶4及1∶8稀释后再测ALT，所得结果乘以稀释倍数，并进行了纠正。结果在迈瑞BS-820生化系统上，ALT、TG、ALP、GGT、LDH、Phos、Ca 7种项目的空白测定值分别是：1.0 U/L、0.0mmol/L、3.0 U/L、1.0 U/L、-1.0 U/L、0.0mmol/L、0.0mmol/L；在西门子Dimension RxlMax系统上，依次为18.0 U/L、0.0mmol/L、10.0 U/L、2.0 U/L、0.0 U/L、0.0 mmol/L、0.0mmol/L。在Dimension RxlMax系统上，3份血清标本经系列稀释测得的ALT结果乘以稀释倍数后，分别是64、104、176 U/L；108、144、224 U/L；246、292、360 U/L。经纠正后，则为46、50、50 U/L；90、90、98 U/L；228、238、234 U/L。结论在不同的系统上，这些生化项目的空白测定值会存在差异，应加以重视。在Dimension Rxl Max生化系统上，由于高空白测定值的存在，血清标本经稀释后再测ALT时，结果仅乘以稀释倍数是不准确的。经合理校准后的结果才是可靠的。

丙氨酸氨基转移酶；空白测定值；稀释；影响；纠正

空白测定值，是指用蒸馏水代替血清，测得的某一试剂的活力单位或者浓度值[1]。笔者在工作中发现，有的检验项目如丙氨酸氨基转移酶（ALT），在不同的生化检测系统上，其空白测定值会存在较大差异。另据文献[2-4]报道，高脂浊血清标本尤其是高浓度三酰甘油（TG）存在时，会对ALT等检验项目的测定结果造成严重干扰，致使ALT结果严重失真；而采用稀释法降低TG浓度至合理水平后再重测，结果乘以稀释倍数是获得ALT准确结果的简便、易行的有效方法[5-6]。本文主要探讨了高空白测定值存在时，对稀释法测ALT造成的影响及解决办法。现报道如下：

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

西门子医学诊断公司的Dimension Rxl Max全自动生化分析仪（原德灵公司产品）及与其配套的试剂和定标液；深圳迈瑞公司的BS-820全自动生化分析仪及其配套试剂；日立7080全自动生化分析仪及其配套试剂。

1.2 稀释液

实验过程中使用的稀释液是我室用杭州永洁达净化科技有限公司的RO-MB-40A超纯水器自制的纯净水；另一种是山东威高药业有限公司生产的注射用生理盐水（批号：313062403，有效期至2015年5月）。

1.3 方法

在上述3种检测系统上，分别测定了部分项目的空白测定值。观察含有高TG的血清等标本经1∶2、1∶4及1∶8系列稀释后，高空白测定值的存在对ALT结果的影响，并探讨其解决对策。

2 结果

2.1 不同生化项目在2套检测系统上的试剂空白测定值观察

分别对ALT、TG、碱性磷酸酶、转肽酶、乳酸脱氢酶、钙、磷共7种常用生化项目在Dimension Rxl Max及迈瑞BS-820系统上，用自制纯净水进行了试剂空白测定值检测，3次测量取均值。结果见表1。

表1 7种常用生化项目在不同检测系统上的试剂空白测定值

2.2 使用不同稀释液时ALT试剂的空白测定值观察

实验过程中，又以威高药业生产的注射用生理盐水在西门子系统上观察了ALT的空白测定值，3次测量取均值为19 U/L。结果与“2.1”项下的纯净水类似。

2.3 其他3家实验室所用生化分析系统上ALT试剂的空白测定值情况

其他3家实验室所用生化分析系统上ALT试剂的空白测定值情况见表2（选用了纯净水）。

表2 其他3家不同单位的分析系统上ALT试剂的空白测定值（U/L）

2.4 标本经系列稀释后再测定的ALT及TG结果观察

随机选取了无溶血、无黄疸的1例高脂浊标本、1例高ALT标本及1例基本正常的血清标本，在西门子系统上先测得其ALT及TG结果；再用纯净水分别稀释为1/2、1/4、1/8后重测，并对稀释后的结果用公式y=[x-（n/N）×x0]×N=Nx-nx0进行了纠正。其中，x0指每单位体积试剂的空白测定值；x指血清被稀释后每单位体积混合液中的实际测定结果；y指校准后最终应报告的结果；N指血清被稀释后在每单位体积混合液中各组分总的份额；即被测血清为1份时，稀释液为n份；N=n+1。3例血清标本在系列稀释前后的ALT、TG测定值及纠正结果见表3。

2.5 正常血清标本在2种生化系统上的ALT检测结果比较

随机选取了10例健康查体者的无溶血、无黄疸、无脂浊的血清标本，同时在迈瑞及西门子检测系统上测定了其ALT活力单位；其结果分别为（21.7±8.9）、（39.5±9.6）U/L，均值相差17.8 U/L。

3 讨论

由表1、2可见，同一生化项目在不同的生化检测系统上，其试剂的空白测定值会存在较大差异。被观察的7种项目，在迈瑞Bs-820系统上其空白测定值均较低，多接近零水平；在日立7080系统上，ALT的空白测定值同样较低，仅为1.0 U/L；在西门子Dimension RxlMax系统上，ALP的空白测定值较高为10.0U/L，而ALT的空白测定值可高达18.0~20.0 U/L。生理盐水也是临床实验室中经常选用的稀释液[6]；在西门子系统上，生理盐水与去离子水所测得的ALT空白测定值结果相当。

表3 3例血清标本在系列稀释前后的ALT、TG测定值及纠正结果（U/L）

ALT试剂高空白测定值的存在，产生了多种影响；值得加以重视。据文献[7]报道，北京市47家医院的实验室，其ALT参考区间低值介于0~10 U/L之间，高值介于40~46 U/L之间；世界上4个地区（意大利米兰，中国北京，土耳其布尔萨和北欧国家）多中心研究表明[8]，不同地区间ALT的参考区间差异不大，成年男性为9~59 U/L，女性8~41 U/L。而西门子ALT试剂说明书中提供的参考值范围为30~65 U/L，显然高于文献[7-8]报道的参考值；尤其是参考值下限差别更明显。10例健康查体者在西门子及迈瑞系统上同时测定ALT的结果显示，西门子系统的ALT结果要比迈瑞系统的平均高17.8 U/L。参考区间的不同、同一批查体者在不同系统上测得的ALT结果的差异，均应与西门子系统上ALT试剂的高空白测定值存在有关。

另外，由表3可见，由于高空白测定值的存在，血清样本被稀释后再测ALT时，结果不能简单的乘以稀释倍数，否则随着稀释比例的增大误差越来越大，会误导临床；必须采用公式y=[x-（n/N）×x0]×N=Nx-nx0加以纠正，除去高空白测定值的影响后，才能获得可靠的结果。而对于无空白测定值存在的TG而言，样本被稀释后所测得的结果乘以稀释倍数或用纠正公式计算，结果是一样的。比如样本1，被稀释为1/2、1/4、1/8后所测的结果，经公式纠正后分别为46、50、50 U/L，加上未稀释时所测结果45 U/L，它们最大值与最小值相比仅相差（50-45）/45=11.1%，完全符合ALT的可接受范围是“靶值±16.0%”质量控制要求[9]；但若简单的乘以稀释倍数，结果依次为64、104、176 U/L，最大值与原始值相差巨大：（176-45）/45=291.1%。样本3与此类似。样本2较为特殊，高TG的存在严重干扰了用未稀释血清所测得的ALT结果，仅为5 U/L；样本被依次稀释后经计算纠正，结果分别为90、90、98 U/L，三个结果最大相差8.9%，符合质量控制要求[9]；可见，在西门子系统上高TG存在时稀释后再测ALT也是非常必要的。还有一种情况，当标本中ALT太高时，由于底物迅速耗尽也会导致结果不准确[10]；应当稀释后再重测，结果也同样需要加以纠正。

ALT的测定，是判断肝细胞损伤的重要指标之一；监测ALT可以观察肝病患者病情的发展变化，并作出预后判断[11-12]。因此，实验室人员应当充分了解自己所用仪器及试剂的性能、特点，能够排除各种干扰、准确报告出患者真实的ALT水平，对于指导临床更好地诊治疾病具有重要意义。

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Effect of high measured value of alanine am inotransferase reagent blank when serum specimenswere detected after being diluted

LIShuhui1WANG Xiaoyan1QU Benxiang2LAN Yan1LIU Yi1CUIYong3
1.Departmentof Laboratory Medicine,Weihai Infectious Disease Hospital,Shandong Province,Weihai 264200,China; 2.Department of Laboratory Medicine,Weihai Traditional Chinese Medicine Hospital,Shandong Province,Weihai 264200,China;3.Department of Laboratory Medicine,Weihai Haida Hospital,Shandong Province,Weihai 264200, China

Ob jective To investigate the measured values of some test items'reagent blanks in different biochemical detection systems;and to explore the effect of high measured value of alanine aminotransferase(ALT)reagent blank on the detected results of ALT when serum samples were detected after being diluted,as well as the corrective methods. Methods The blank measurement values of seven different test items were observed in both Mindray BS-820 and Siemens Dimension Rxl Max automatic biochemical systems,including ALT,triacylglycerol(TG),alkaline phosphatase (ALP),γ-glutamyl transferase(GGT),lactate dehydrogenase(LDH),phosphorus(Phos)and calcium(Ca).In Dimension Rxl Max system,the ALT activities in three serum sampleswere detected after being diluted by 1∶2,1∶4,1∶8.The results weremultiplied by the dilution factors,and corrected.Results The blank measurement values of ALT,TG,ALP, GGT,LDH,Phos and Ca were 1.0 U/L,0.0 mmol/L,3.0 U/L,1.0 U/L,-1.0 U/L,0.0 mmol/L,0.0 mmol/L in Mindray BS-820 system;and they were 18.0 U/L,0.0mmol/L,10.0 U/L,2.0 U/L,0.0 U/L,0.0mmol/L,0.0 mmol/L in Dimension Rxl Max system.In Dimension Rxl Max system,the ALT results in three samples after beingmultiplied by the dilution factorswere 64,104,176 U/L;108,144,224 U/L;246,292,360 U/L.However,they were 46,50,50 U/L;90,90,98 U/L; 228,238,234 U/L after being corrected.Conclusion Themeasured values of these reagent blanks are various in different biochemical detection systems,and we should paymore attention to it.Themeasurement results of ALTmust be corrected when serum specimens are detected in Siemens Dimension Rxl Max system after being diluted,because of the existence of highmeasured value of ALT reagent blank.

Alanine aminotransferase;Measured value of reagent blank;Dilution;Effect;Correction

R446.11

C

1673-7210（2014）02（c）-0149-03

2013-10-20本文编辑：卫轲）